本文關(guān)鍵詞：Beclin1基因真核表達(dá)載體的構(gòu)建、鑒定及在真核細(xì)胞內(nèi)的表達(dá)

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【摘要】：目的構(gòu)建Beclin1真核表達(dá)載體,檢測該基因在真核細(xì)胞內(nèi)的表達(dá),為進(jìn)一步研究其在弓形蟲感染致病中的作用打下基礎(chǔ)。方法 PCR擴(kuò)增目的基因Beclin1后插入到真核表達(dá)載體pEGFP中,雙酶切鑒定并進(jìn)行序列測定;通過脂質(zhì)體介導(dǎo)的方法用重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染293T細(xì)胞,再以Western blot方法檢測該基因編碼蛋白在真核細(xì)胞內(nèi)的表達(dá)。結(jié)果 PCR擴(kuò)增出目的基因Beclin1片段,大小為1 353bp,與預(yù)期值一致。構(gòu)建了pEGFP-Beclin1真核表達(dá)載體,經(jīng)雙酶切鑒定插入片段大小正確;DNA測序后與GenBank中的Beclin1基因序列比對,同源性為100%;Western blot檢測該蛋白在真核細(xì)胞內(nèi)表達(dá)。結(jié)論成功構(gòu)建了pEGFP-Beclin1真核表達(dá)載體,該基因編碼蛋白可以在真核細(xì)胞內(nèi)表達(dá),為進(jìn)一步研究該基因在弓形蟲感染致病中的作用打下了基礎(chǔ)。
【作者單位】： 安徽醫(yī)科大學(xué)病原生物學(xué)教研室;安徽醫(yī)科大學(xué);
【關(guān)鍵詞】： Beclin基因 真核表達(dá)載體 鑒定
【基金】：安徽省教育廳高校省級自然科學(xué)研究重點(diǎn)項(xiàng)目(No.KJ2013A149)
【分類號】：R382.5
【正文快照】： ***Beclin1基因也稱BECN1基因,是一種自噬相關(guān)基因,它與Bcl-2基因相互拮抗調(diào)控自噬。自噬是細(xì)胞中初級溶酶體處理內(nèi)源性底物的重要過程,同時(shí)參與維持細(xì)胞內(nèi)蛋白代謝平衡及內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定的維持,在清除廢物、結(jié)構(gòu)重建以及細(xì)胞生長發(fā)育中起重要作用[1-2]。近來Ⅱ型程序性細(xì)胞死亡-自

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 張欠欠;成俊珍;王逢會;;延安市2850例孕婦弓形蟲感染情況調(diào)查[J];中國病原生物學(xué)雜志;2013年03期

2 王旗;楊雯;楊小迪;陳興智;;抗弓形蟲藥物的研究進(jìn)展[J];中國病原生物學(xué)雜志;2014年05期

3 侯麗萍;張慧芳;饒華祥;赫燕俠;侯紅娟;崔愛永;侯玉英;;太原市孕婦弓形蟲感染現(xiàn)況調(diào)查[J];中國病原生物學(xué)雜志;2015年01期

【共引文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前7條

1 王旗;楊小迪;薛洪寶;陳興智;崔潔;陶莉;李倩;蘇胖胖;李江艷;胡守鋒;孫新;;金絲桃素對急性弓形蟲感染小鼠脾臟CD4~+和CD8~+T淋巴細(xì)胞亞群的影響[J];中國病原生物學(xué)雜志;2014年12期

2 寇景軒;趙桂華;魏慶寬;徐超;朱嵩;尹昆;;弓形蟲表面抗原IMP1的克隆原核表達(dá)及免疫學(xué)鑒定[J];中國血吸蟲病防治雜志;2015年03期

3 羅嵐;敖科萍;李冬冬;王婷婷;陶傳敏;;國產(chǎn)化學(xué)發(fā)光法弓形蟲IgM抗體診斷試劑結(jié)果評價(jià)[J];現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué);2015年15期

4 尹昆;寇景軒;王利磊;魏慶寬;趙桂華;黃炳成;徐超;李琛琛;朱嵩;閆歌;;靶向弓形蟲毒力決定因子Rop18激酶抑制劑的虛擬篩選[J];中國病原生物學(xué)雜志;2015年06期

5 張瑞玲;李曉霞;楊春貴;于愛蓮;張忠;;以科研促教學(xué)——《人體寄生蟲學(xué)》教學(xué)實(shí)踐與體會[J];中國病原生物學(xué)雜志;2015年09期

6 王雅波;黃建榮;鄧剛;周健;張行芬;;育齡期婦女弓形蟲抗體血清學(xué)調(diào)查[J];浙江預(yù)防醫(yī)學(xué);2015年12期

7 馬莉;景彩霞;薛亞娟;;弓形蟲對雄性生殖的毒性作用研究新進(jìn)展[J];中國病原生物學(xué)雜志;2015年10期

【二級參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 張瑞巖;劉全;商立民;吳永魁;;抗弓形蟲藥物研究進(jìn)展[J];動物醫(yī)學(xué)進(jìn)展;2010年01期

2 李秉鴻;弓形蟲病流行病學(xué)及防疫措施研究進(jìn)展[J];廣西畜牧獸醫(yī);1997年03期

3 楊秋林;許麗芳;桂慶軍;沈元瓊;徐剛;梁麗紅;陳揚(yáng)勤;;紅霉素、阿奇霉素、磺胺嘧啶、大蒜素體外抗弓形蟲作用的研究[J];南華大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2007年01期

4 崔君兆;我國孕婦弓形蟲感染致胎嬰先天畸形、缺陷研究近展(講座)[J];臨床兒科雜志;1995年04期

5 謝霖崇;人體弓形蟲病的臨床治療[J];中國熱帶醫(yī)學(xué);2003年03期

6 蔣松云,卞紅珍,楊蕓,周杭娟,周建華,盧丹;上海市虹口區(qū)孕婦弓形蟲感染情況調(diào)查[J];上海預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志;2005年05期

7 索慶麗;劉勝武;姚婷;;武漢市弓形蟲IgM陽性孕婦異常妊娠結(jié)局研究[J];現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué);2011年05期

8 龔國華;侯加法;蔣蔚;劉迎春;陳永軍;荊振宇;王權(quán);;7種藥物體內(nèi)外抗弓形蟲效果分析[J];畜牧與獸醫(yī);2011年07期

9 司進(jìn),朱蔭昌,曹利民,王曉婷,梁幼生,管曉虹;抗弓形蟲靶向抗菌肽的構(gòu)建及其效應(yīng)的初步評價(jià)[J];中國血吸蟲病防治雜志;2005年05期

10 呂元聰;鄭挺;崔君兆;謝麗群;;孕婦弓形體感染2781例調(diào)查[J];實(shí)用婦科與產(chǎn)科雜志;1991年04期

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 吳宏,張紹昆,王桂云,張曉光1;人堿性成纖維細(xì)胞生長因子基因真核表達(dá)載體的構(gòu)建[J];吉林大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2002年04期

2 高全文,董紹忠,陳希哲,陳琰,楊連甲;人血管內(nèi)皮生長因子165基因真核表達(dá)載體的構(gòu)建及表達(dá)[J];細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志;2003年01期

3 廖榮霞,孫建國,陳正堂,周建新;小鼠肝臟特異的微RNA真核表達(dá)載體的構(gòu)建及鑒定[J];重慶醫(yī)學(xué);2004年07期

4 代芳,王佑民,王長江,佘其美,周劍,時(shí)照明,胡紅琳;人過氧化物酶體增殖體激活受體γ2基因克隆及真核表達(dá)載體的構(gòu)建與鑒定[J];安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2004年06期

5 汲振余;李肖蕖;禹麗娜;趙立群;張聚真;裘一兵;張亞冰;裘宋良;楊觀瑞;;野生型抑癌基因PTEN真核表達(dá)載體的構(gòu)建及鑒定[J];鄭州大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2005年06期

6 寧寒冰;張玲;李建生;李繼昌;;端粒重復(fù)序列結(jié)合因子2真核表達(dá)載體的構(gòu)建及表達(dá)[J];鄭州大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2006年03期

7 吳波;陳秉;熊群英;容振勤;張偉林;李永浩;;人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子165基因真核表達(dá)載體構(gòu)建[J];醫(yī)學(xué)研究雜志;2006年01期

8 唐昊U，

本文編號：993472