本文關(guān)鍵詞：GM1聯(lián)合生長因子誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細胞分化為神經(jīng)元樣細胞的研究

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【摘要】：目的:探討單唾液酸四己糖神經(jīng)節(jié)苷脂(monosialoteterahexosyl ganglioside,GM1)聯(lián)合生長因子(bFGF+EGF)能否更為高效地促進骨髓間充質(zhì)干細胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)分化為神經(jīng)元樣細胞,從而為細胞替代治療缺血性腦卒中提供實驗依據(jù)。方法:采用密度梯度離心法獲取骨髓單個核細胞,行原代、傳代培養(yǎng),取第3代BMSCs,用流式細胞術(shù)鑒定其表面標志物;同時鑒定其多分化潛能。將第3代BMSCs分四組向神經(jīng)元樣細胞誘導(dǎo)分化,A組:單用(bFGF+EGF);B組:單用GM1;C組:GM1聯(lián)合(bFGF+EGF);D組:對照組。分別在正式誘導(dǎo)前后行免疫細胞化學(xué)法檢測各組細胞Nestin、β-TubulinⅢ、GFAP的陽性表達率并行數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析。結(jié)果:流式細胞術(shù)鑒定BMSCs表面標志物呈CD29(+)、CD105(+)、CD34(-)、CD45(-);同時其具分化為成骨細胞和成脂細胞潛能。BMSCs誘導(dǎo)為神經(jīng)元樣細胞之前,四組細胞Nestin、β-Tubulin、GFAP表達均呈陰性;誘導(dǎo)2~4 d時,A、B、C三組Nestin陽性細胞表達率均呈上升趨勢,且C組高于A、B、D組;誘導(dǎo)6~8 d時,A、B、C三組Nestin陽性細胞表達率均有所降低,而β-TubulinⅢ、GFAP陽性細胞表達率則呈較明顯上升趨勢,且C組較A、B組升高明顯。綜合實驗數(shù)據(jù),C組Nestin、β-TubulinⅢ、GFAP陽性細胞表達率均高于A、B、D組。結(jié)論:GM1聯(lián)合生長因子(bFGF+EGF)相比單獨的生長因子(bFGF+EGF)或GM1,可更為高效地促進BMSCs誘導(dǎo)分化為神經(jīng)元樣細胞。
【作者單位】： 寧波市第二醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科;寧波市第二醫(yī)院干細胞研究室;
【關(guān)鍵詞】： 骨髓間充質(zhì)干細胞 GM 生長因子 誘導(dǎo) 神經(jīng)元樣細胞
【基金】：浙江省醫(yī)學(xué)會臨床科研基金(2013XYC-A73)
【分類號】：R329
【正文快照】： 骨髓間充質(zhì)干細胞(bone marrow mesenchymalstem cells,BMSCs)是一群能不斷自我更新(復(fù)制)、分裂增殖,且具多譜系分化潛能的多能干細胞#1$。研究表明,BMSCs在特定誘導(dǎo)劑作用下能定向分化為神經(jīng)元樣細胞,包括神經(jīng)干細胞、神經(jīng)元和星形膠質(zhì)細胞。因此,BMSCs可作為理想的種子細胞

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