本文關(guān)鍵詞：胸骨上小切口大鼠左心室肥厚及其逆轉(zhuǎn)模型的建立和研究

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【摘要】：研究背景和研究目的 壓力超負(fù)荷誘發(fā)的心肌肥厚是導(dǎo)致心力衰竭和心源性猝死的重要原因之一。主動(dòng)脈瓣狹窄和高血壓是臨床常見的引起壓力超負(fù)荷原因。然而，通過(guò)藥物干預(yù)高血壓及行主動(dòng)脈瓣置換術(shù)去除壓力負(fù)荷后部分患者心肌肥厚持續(xù)存在，最終發(fā)展為心力衰竭。這些研究表明，僅針對(duì)壓力超負(fù)荷抑制因子的治療是不夠的。目前，針對(duì)心肌肥厚的研究多集中在其發(fā)生的原因、分子機(jī)制及對(duì)壓力超負(fù)荷進(jìn)行干預(yù)后左室功能的變化等。然而，對(duì)于完全去除壓力負(fù)荷后左室肥厚及左室功能的轉(zhuǎn)歸的研究還較少見。 因此，有必要建立一個(gè)理想的左心室肥厚及其逆轉(zhuǎn)模型，來(lái)研究其中的分子機(jī)制，這個(gè)模型必須能夠很好的模擬左心室壓力超負(fù)荷—去負(fù)荷過(guò)程中左心室結(jié)構(gòu)和功能的變化特征。過(guò)去人們多通過(guò)結(jié)扎腹主動(dòng)脈來(lái)制作大鼠左室肥厚模型，然而通常認(rèn)為結(jié)扎部位越靠近心臟越能模擬人類壓力超負(fù)荷時(shí)左心室發(fā)生的病理生理變化。近幾年來(lái)已有主動(dòng)脈弓縮窄模型的報(bào)道，但比較少，且需要?dú)夤懿骞苋斯ね鈼l件支持。然而，結(jié)扎主動(dòng)脈弓可使右側(cè)大腦及右側(cè)肢體壓力升高，經(jīng)頭臂的側(cè)支循環(huán)增加進(jìn)而降低后負(fù)荷，且氣管插管可使動(dòng)物出現(xiàn)嚴(yán)重的并發(fā)癥，尤其是大鼠等小動(dòng)物氣管插管更為困難。 本研究擬在非人工通氣條件下，通過(guò)胸骨上小切口建立大鼠升主動(dòng)脈根部縮窄模型，探尋一種更為簡(jiǎn)單、有效、重復(fù)性好的大鼠壓力超負(fù)荷左室肥厚動(dòng)物模型，并在不同時(shí)間點(diǎn)去除壓力負(fù)荷，，觀察左心室肥厚及其逆轉(zhuǎn)過(guò)程中心肌間質(zhì)膠原纖維含量及心功能的變化，為心肌肥厚及其逆轉(zhuǎn)的研究提供一種更為優(yōu)秀的動(dòng)物模型。 方法 1.動(dòng)物分組，將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物隨機(jī)分為升主動(dòng)脈縮窄3周組（AB3W），升主動(dòng)脈縮窄9周組（AB9W），升主動(dòng)脈縮窄15周組（AB15W），早期去縮窄組（AB3W+DB6W），晚期去縮窄組（AB9W+DB6W），假手術(shù)組（sham組）。 2.模型建立，大鼠經(jīng)麻醉后，在自主呼吸條件下，經(jīng)胸骨上窩向下剪開胸骨至第二肋間，依次分離皮下筋膜及氣管前肌層，暴露出氣管，沿氣管正中向下分離胸腺，找到升主動(dòng)脈，于升主動(dòng)脈的根部將其內(nèi)徑縮窄一半，則其橫截面積減小約75％。早期去縮窄組術(shù)后3周、晚期去縮窄組術(shù)后9周沿原切口進(jìn)胸去除縮窄。假手術(shù)組只進(jìn)行開胸操作，不結(jié)扎。 3.心臟超聲檢查，分別于升主動(dòng)脈縮窄術(shù)前、術(shù)后3周、6周、9周、12周、15周及去縮窄后3周、6周行超聲心動(dòng)圖檢查。測(cè)量心室腔內(nèi)徑及室壁厚度，評(píng)估心功能。 4.血流動(dòng)力學(xué)檢查，分別于觀察期結(jié)束后各時(shí)間點(diǎn)行左心室血流動(dòng)力學(xué)檢查，評(píng)估左心室功能。 5．心肌間質(zhì)膠原纖維含量檢測(cè)，分別于各時(shí)間點(diǎn)結(jié)束后取出心臟保存于-80℃冰箱中，取100mg心肌組織并勻漿用Elisa試劑盒檢測(cè)Ⅰ、Ⅲ膠原含量。 6.組織病理學(xué)觀察，各組大鼠在血流動(dòng)力學(xué)檢查結(jié)束后取出心臟，石蠟固定后行HE染色及天狼星紅—苦味酸染色，觀察心肌細(xì)胞形態(tài)及纖維化程度。 結(jié)果 1.在非人工通氣下成功建立了大鼠升主動(dòng)脈縮窄—松解模型，各組大鼠總死亡率為11.7%。 2.與假手術(shù)組相比，術(shù)后3周，縮窄組大鼠左室后壁厚度、室間隔厚度顯著增加(p0.05)，說(shuō)明左心室出現(xiàn)向心性肥厚，且上述指標(biāo)在術(shù)后第6、9周呈進(jìn)一步上升趨勢(shì)。術(shù)后15周，縮窄組大鼠收縮末左心室內(nèi)徑、舒張末左心室內(nèi)徑明顯增加，左心室射血分?jǐn)?shù)明顯降低（p0.05），大鼠出現(xiàn)心力衰竭現(xiàn)象。去除縮窄后6周內(nèi)，上述指標(biāo)均有所改善。但早期去縮窄組（AB3W+DB6W）較晚期去縮窄組（AB9W+DB6W）改善更明顯，早期去縮窄組在去除縮窄3周后左室后壁厚度、室間隔厚度明顯下降和假手術(shù)組相比無(wú)差異，左室收縮末內(nèi)徑、左室舒張末內(nèi)徑在DB6W后下降到初始水平。晚期去縮窄組上述指標(biāo)雖也有所改善但不能恢復(fù)到初始水平，提示心室肥厚持續(xù)存在。 3.與假手術(shù)組相比，升主動(dòng)脈縮窄術(shù)后，各組左心室收縮壓、舒張壓均增高，第15周左心室舒張壓明顯增高，提示出現(xiàn)了左心功能衰竭。各組去除縮窄后，左心室收縮壓恢復(fù)明顯，但-dp/dt max變化均不明顯。 4.與假手術(shù)組相比，升主動(dòng)脈縮窄各組膠原纖維含量均增加（p0.05），且縮窄時(shí)間越長(zhǎng)，膠原含量越高。AB15WⅠ、Ⅲ型膠原明顯高于對(duì)照組（p0.01）。AB3W+DB6W組心肌間質(zhì)膠原含量和假手術(shù)組相比無(wú)差異，AB9W+DB6W組仍高于假手術(shù)組（p0.05）。AB3W+DB6W組和AB9W+DB6W組之間也有差異。 5.左心室切片HE染色見：假手術(shù)組心肌纖維排列整齊，心肌細(xì)胞無(wú)明顯肥大；縮窄組心肌纖維走形混亂，心肌細(xì)胞肥大，基質(zhì)增生明顯。天狼星紅-苦味酸染色見膠原纖維含量明顯增加，且縮窄時(shí)間越長(zhǎng)增加越明顯。去除縮窄后早期去縮窄組左心室肥厚部分改善，提示心室肥厚逆轉(zhuǎn)與壓力超負(fù)荷持續(xù)時(shí)間有關(guān)。 結(jié)論 ①通過(guò)胸骨上小切口，在非人工通氣下可成功建立大鼠升主動(dòng)脈縮窄—去縮窄模型。 ②升主動(dòng)脈縮窄模型左心室肥厚出現(xiàn)較早；去縮窄后左心室肥厚及心肌間質(zhì)膠原纖維含量可以發(fā)生逆轉(zhuǎn)，逆轉(zhuǎn)程度與壓力超負(fù)荷持續(xù)時(shí)間、去縮窄時(shí)間有關(guān)。 ③該模型具有創(chuàng)傷小，操作簡(jiǎn)單，可重復(fù)性好的優(yōu)點(diǎn)。 本研究可為進(jìn)一步研究壓力超負(fù)荷-去負(fù)荷過(guò)程中心室肥厚及其逆轉(zhuǎn)的分子機(jī)制提供了良好的動(dòng)物模型。
【關(guān)鍵詞】：左心室肥厚 逆轉(zhuǎn) 動(dòng)物模型 升主動(dòng)脈縮窄 微創(chuàng)
【學(xué)位授予單位】：第三軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R654.2;R-332
【目錄】：

• 英文縮寫一覽表4-5
• Abstract5-8
• 中文摘要8-11
• 第一章 前言11-15
• 1.1 選題緣由11-12
• 1.2 研究背景12-13
• 1.3 研究意義13
• 1.4 研究?jī)?nèi)容13
• 1.5 研究方法13-15
• 第二章 大鼠左心室肥厚模型的建立及研究15-37
• 2.1 實(shí)驗(yàn)材料及試劑配制15-18
• 2.2 實(shí)驗(yàn)方法18-25
• 2.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果25-33
• 2.4 討論33-36
• 2.5 結(jié)論36-37
• 第三章 大鼠左心室肥厚逆轉(zhuǎn)模型的建立和研究37-56
• 3.1 材料與方法37-45
• 3.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果45-53
• 3.3 討論53-55
• 3.4 結(jié)論55-56
• 全文結(jié)論56-57
• 參考文獻(xiàn)57-61
• 文獻(xiàn)綜述 心室肥厚動(dòng)物模型建模常用方法61-71
• 參考文獻(xiàn)67-71
• 攻讀學(xué)位期間的科研成果71-72
• 致謝72

【共引文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前5條

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本文編號(hào)：973473