發(fā)布時間：2024-07-05 03:54

　　目的:研究組成黃原膠的單糖組分對細胞因子誘導殺傷細胞(CIK)體外擴增的影響。方法:采用正交實驗確定最優(yōu)的單糖組合和添加劑量,并在無血清培養(yǎng)體系中采用細胞培養(yǎng)袋靜態(tài)培養(yǎng)驗證所獲得的最優(yōu)單糖組合對CIK細胞體外擴增的影響。采用流式細胞術檢測培養(yǎng)物中各類效應細胞的比例以及效應細胞中表達顆粒酶B和穿孔素的細胞比例;采用CCK-8法檢測CIK細胞對K562細胞的殺傷活性。結果:采用添加2.20 mmol/L甘露糖和0.10 mmol/L葡萄糖醛酸的無血清培養(yǎng)基培養(yǎng)單個核細胞時,第14天的總細胞擴增倍數(shù)為29.38±5.20,顯著高于對照組的18.36±4.03(P<0.05),且效應細胞CD3⁺、CD3⁺CD56⁺、CD3⁺CD8⁺細胞的擴增倍數(shù)以及CIK細胞中表達顆粒酶B和穿孔素的細胞比例均顯著增加(P<0.05),同時擴增后CIK細胞對K562細胞的殺傷活性從(17.93±2.65)%增至(29.03±4.34)%(P<0.05)。結論:甘露糖和葡萄糖醛酸的組合應...

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圖1三因子四水平正交實驗的均值主效應圖(n=3)Fig．1Maineffectmapofmeanofthree-factorfour-level

軟件選取L16(45)安排實驗，不考慮交互作用，總共設計16個正交實驗組，每組實驗重復3次。對16組實驗數(shù)據(jù)分別進行直觀分析，結果如表2和圖1所示。首先將表2中3次實驗中第14天的總細胞擴增倍數(shù)X1～X3求和得到Y值，進一步求出各因子對應于不同水平的Y值的平均值，即K1～K4，從....

圖2三因子三水平正交實驗的均值主效應圖(n=3)Fig．2Maineffectmapofmeanofthree-factorthree-level

養(yǎng)14d后的總細胞擴增倍數(shù)的直觀分析Tab．5Visualanalysisofexpansionfoldoftotalcellsfor14dcellcultureinthree-factorthree-levelorthog-onaltestGroupsABCExpansionf....

圖3甘露糖和葡萄糖醛酸組合應用對總細胞擴增的影響Fig．3Effectofcombinedapplicationofmannoseandglu-

ectmapofmeanofthree-factorthree-levelorthogonaltest(n=3)無血清培養(yǎng)基作為空白對照組，將新鮮分離的PBMCs以1×106cells/ml的細胞密度接種于裝有20ml添加甘露糖和葡萄糖醛酸的無血清培養(yǎng)基的T75方瓶中，并按1.2....

圖4甘露糖和葡萄糖醛酸組合應用對各類效應細胞擴增倍數(shù)的影響(n=3)

圖4甘露糖和葡萄糖醛酸組合應用對各類效應細胞擴增倍數(shù)的影響(n=3)Fig．4Effectofcombinedapplicationofmannoseandglu-curonicacidonexpansionfoldofeffectorcells(n=3)Note:Compare....

本文編號：4000998