利用PCR技術(shù)擴(kuò)增日本血吸蟲(chóng)Sj CHGC06822 ORF全長(zhǎng)序列,以p ET28a(+)為載體構(gòu)建重組質(zhì)粒,大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)進(jìn)行表達(dá),His-Ni柱層析純化r Sj CHGC06822/His蛋白后,生物信息學(xué)分析其可能結(jié)構(gòu),Western blot分析其抗原性。利用重組蛋白免疫BALB/c小鼠評(píng)估其免疫效果,ELISA分析血清抗體亞型變化。結(jié)果顯示,獲得日本血吸蟲(chóng)Sj CHGC06822的完整ORF序列591 bp,編碼192個(gè)氨基酸,序列aa37^aa72含一個(gè)EF-hand手性域結(jié)構(gòu),無(wú)信號(hào)肽及跨膜結(jié)構(gòu)。獲得的Sj CHGC06822/His重組蛋白具有較好的抗原性,在2次獨(dú)立BALB/c小鼠實(shí)驗(yàn)中,與PBS對(duì)照組相比,Sj CHGC06822/His蛋白免疫組誘導(dǎo)小鼠獲得30.36%、40.26%減蟲(chóng)率和30.14%、12.28%肝臟減卵率,血清Ig G抗體免疫及感染后持續(xù)增高,Ig G2a和Ig G1水平隨免疫次數(shù)增高,感染后出現(xiàn)下降,但I(xiàn)g G2a/Ig G1(<1)水平持續(xù)增加。本研究成功克隆了Sj CHGC06822基因,并成功表達(dá)純化了r...

【文章頁(yè)數(shù)】：8 頁(yè)

【文章目錄】：
1 材料方法
2 結(jié)果
3 討論



本文編號(hào)：4000361