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基于膠體金免疫層析技術(shù)的肺炎支原體檢測試紙條的研制及其應(yīng)用

發(fā)布時間:2017-09-22 07:03

  本文關(guān)鍵詞:基于膠體金免疫層析技術(shù)的肺炎支原體檢測試紙條的研制及其應(yīng)用


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【摘要】:金納米顆粒由于其獨(dú)特的光學(xué)、電學(xué)性質(zhì)、高的消光系數(shù)等,經(jīng)常被用作標(biāo)記基質(zhì)并廣泛的應(yīng)用在食品檢測、離子檢測等領(lǐng)域,以提高傳感器的檢測靈敏度。而金納米顆粒獨(dú)有的性質(zhì)與其單分散-聚集狀態(tài)有關(guān)系。 基于膠體金的免疫層析技術(shù)具有方便、便宜、適合現(xiàn)場檢測等優(yōu)點(diǎn),已經(jīng)在不同的檢測方面和診斷領(lǐng)域得到了應(yīng)用。 本論文基于膠體金納米顆粒的性質(zhì)及免疫學(xué)原理,發(fā)展并研制了一種能夠快速診斷肺炎支原體的特異性IgG抗體和IgM抗體的膠體金免疫層析試紙條。在硝酸纖維素膜上同時包被四條線,其中三條為測試線,一條為控制線。三條檢測線分別為T1線即為抗人IgG的抗體,T2線即為抗人IgM的抗體,T3線即為肺炎支原體抗原;C線即為與抗原相應(yīng)的抗體。通過優(yōu)化各種影響條件,最終發(fā)展了一種基于捕獲法和雙抗原夾心法原理的膠體金檢測試紙條,達(dá)到能夠分別同時檢測肺炎支原體特異性的IgG抗體和IgM抗體目的。 在研究過程中,通過優(yōu)化各種條件,包括抗原標(biāo)記膠體金的濃度、標(biāo)記時的pH值、所要包被抗體抗原的濃度以及包被時所使用緩沖溶液的離子強(qiáng)度和pH值等參數(shù),最終選擇出了最佳的條件。 根據(jù)以上優(yōu)化的條件,,進(jìn)行金標(biāo)結(jié)合物墊的組裝,最終制備出了肺炎支原體的膠體金試紙條,并對臨床已經(jīng)確診的實際陽性血清和陰性血清樣品進(jìn)行了檢測,結(jié)果表明該試紙條具有一定的臨床使用價值。
【關(guān)鍵詞】:膠體金顆粒 試紙條 肺炎支原體 IgG和IgM抗體檢測
【學(xué)位授予單位】:魯東大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2013
【分類號】:R392
【目錄】:
  • 摘要5-6
  • Abstract6-9
  • 第一章 前言9-23
  • 1.1 納米材料的基本效應(yīng)9-10
  • 1.2 金納米顆粒的制備及其性質(zhì)10-12
  • 1.3 金納米顆粒的表面修飾12-13
  • 1.4 膠體金免疫層析技術(shù)13-14
  • 1.5 膠體金免疫檢測技術(shù)的分類14-16
  • 1.5.1 免疫夾心法14-15
  • 1.5.2 免疫競爭法15-16
  • 1.5.3 免疫捕獲法16
  • 1.6 金納米顆粒及其免疫層析技術(shù)的應(yīng)用16-21
  • 1.6.1 在環(huán)境檢測領(lǐng)域的應(yīng)用16-18
  • 1.6.2 在疾病診斷方面的應(yīng)用18-20
  • 1.6.3 在食品檢測方面的應(yīng)用20-21
  • 1.7 本論文研究意義21-23
  • 第二章 膠體金試紙條的研制23-44
  • 2.1 實驗試劑及儀器23-24
  • 2.1.1 實驗試劑23-24
  • 2.1.2 實驗儀器24
  • 2.2 實驗設(shè)計24-28
  • 2.3 理論分析28-32
  • 2.4 材料制備32-43
  • 2.4.1 抗體的制備32-33
  • 2.4.2 金納米顆粒的制備33-34
  • 2.4.3 金標(biāo)抗原結(jié)合物的制備34-36
  • 2.4.4 條件優(yōu)化36-43
  • 2.5 金標(biāo)試紙條的組裝43-44
  • 第三章 對實際樣品的檢測44-51
  • 3.1 對不同實際血清的檢測44-49
  • 3.1.1 IgM 陽性血清的檢測44-45
  • 3.1.2 IgG 陽性血清的檢測45-46
  • 3.1.3 IgM 和 IgG 陽性血清的檢測46-48
  • 3.1.4 陰性血清的檢測48-49
  • 3.2 對操作過程的進(jìn)一步說明49-51
  • 第四章 結(jié)論與展望51-53
  • 4.1 結(jié)論51
  • 4.2 展望51-53
  • 參考文獻(xiàn)53-62
  • 致謝62-63
  • 攻讀碩士學(xué)位期間取得的科研成果63

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前8條

1 高云濤,吳立生;膠體金-SPA復(fù)合物的制備[J];黃金;2003年07期

2 王世香;李德倫;;運(yùn)動與免疫球蛋白[J];遼寧體育科技;2007年01期

3 魏春萍;陳中芹;許小華;;金納米粒子的制備及其在生化分析中的應(yīng)用[J];內(nèi)蒙古石油化工;2008年12期

4 趙海鋒;甘一如;;膠體金免疫層析法檢測小分子物質(zhì)[J];農(nóng)藥;2007年07期

5 吳剛;姜瞻梅;霍貴成;田波;;膠體金免疫層析技術(shù)在食品檢測中的應(yīng)用[J];食品工業(yè)科技;2007年12期

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7 孫紅妹;;肺炎支原體感染的實驗室診斷[J];實用兒科臨床雜志;2007年04期

8 林美玲;陳美蓮;陳忠城;;小兒呼吸道肺炎支原體感染流行病學(xué)分析[J];實用醫(yī)技雜志;2006年16期

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 李雪輝;肺炎支原體及流感病毒快速檢測方法的評估應(yīng)用及探索研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2011年



本文編號:899404

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