本文關(guān)鍵詞：�；疓hrelin在體外拮抗巨噬細(xì)胞介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)對(duì)胰島β細(xì)胞功能影響的研究

  更多相關(guān)文章： Ghrelin 共同培養(yǎng)技術(shù) 胰島細(xì)胞 巨噬細(xì)胞

【摘要】：目的采用Transwell小室構(gòu)建的小鼠胰島細(xì)胞株MIN6和巨噬細(xì)胞株RAW264.7共培養(yǎng)系統(tǒng),探討酰基化Ghrelin能否保護(hù)胰島!細(xì)胞免遭巨噬細(xì)胞介導(dǎo)的炎癥損傷。方法實(shí)驗(yàn)分為單獨(dú)RAW264.7巨噬細(xì)胞組、單獨(dú)MIN6胰島細(xì)胞組、共培養(yǎng)組和Ghrelin干預(yù)組。RT-PCR和Western blot檢測巨噬細(xì)胞上Toll樣受體4(TLR4)和脂肪酸結(jié)合蛋白(A-FABP)的表達(dá);ELISA檢測細(xì)胞上清液IL-1β、TNF-α的濃度,以及葡萄糖刺激后MIN6細(xì)胞上清液的胰島素濃度。結(jié)果 (1)共培養(yǎng)系統(tǒng)中,巨噬細(xì)胞TLR4[mRNA及蛋白水平分別為(1.35±0.13),(0.93±0.03)],A-FABP[(1.99±0.10)vs(0.91±0.01)]的表達(dá)],細(xì)胞上清液IL-1β[(10.47±1.11)pg/ml]、TNF-α[(917.54±9.09)pg/ml]蛋白水平較單獨(dú)RAW264.7巨噬細(xì)胞組高(P0.05);(2)高糖刺激下,共培養(yǎng)系統(tǒng)中胰島β細(xì)胞的胰島素分泌水平較單獨(dú)MIN6胰島細(xì)胞組低(P0.05);(3)與共培養(yǎng)組比較,酰基化Ghrelin干預(yù)后共培養(yǎng),巨噬細(xì)胞TLR4表達(dá)水平和TNF-α均降低(P0.05),且呈劑量依賴性,但胰島β細(xì)胞的胰島素分泌水平與共培養(yǎng)組比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論巨噬細(xì)胞與胰島β細(xì)胞共培養(yǎng)后,炎癥通路活化,炎癥因子釋放,胰島β細(xì)胞的胰島素分泌功能受損;�；疓hrelin可劑量依賴性削弱巨噬細(xì)胞和胰島β細(xì)胞共培養(yǎng)后炎癥通路的活化和炎癥因子的釋放,但不能完全阻止胰島β細(xì)胞胰島素分泌功能的降低。
【作者單位】： 中南大學(xué)湘雅二醫(yī)院內(nèi)分泌科;中南大學(xué)糖尿病中心 糖尿病免疫學(xué)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】： Ghrelin 共同培養(yǎng)技術(shù) 胰島細(xì)胞 巨噬細(xì)胞
【基金】：湖南省科技計(jì)劃項(xiàng)目(2014SK3079) 中華醫(yī)學(xué)會(huì)(13040500435)
【分類號(hào)】：R363
【正文快照】： T2DM存在以巨噬細(xì)胞浸潤增加為主要特征的胰島炎癥,而胰島炎癥在胰島β細(xì)胞功能障礙的發(fā)生發(fā)展中起重要作用[1]。TLR4是天然模式識(shí)別受體-Toll樣受體(TLRs)中的重要成員,是炎癥的門戶蛋白,主要表達(dá)在淋巴樣組織,如脾臟、外周血白細(xì)胞(單核巨噬細(xì)胞)等多種免疫炎癥反應(yīng)相關(guān)的細(xì)

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