本文關(guān)鍵詞：幽門(mén)螺桿菌單克隆抗體的制備及其檢測(cè)應(yīng)用

  更多相關(guān)文章： 幽門(mén)螺桿菌 抗原 單克隆抗體 膠體金免疫層析

【摘要】：幽門(mén)螺桿菌(Helicobacter pylori,Hp)是一種定居于人胃部及十二指腸的微需氧革蘭氏陰性菌,其長(zhǎng)期感染導(dǎo)致胃炎、胃及十二指腸潰瘍與胃癌。幽門(mén)螺桿菌感染主要始于兒童期,其自發(fā)性清除非常少見(jiàn),及早通過(guò)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)并加以抗生素治療可有效降低成人感染率。本文通過(guò)體外培養(yǎng)Hp標(biāo)準(zhǔn)菌株ATCC43504,將其裂解液作為抗原免疫Balb/c小鼠,通過(guò)常規(guī)技術(shù)路線制備雜交瘤細(xì)胞。經(jīng)間接ELISA法篩選和多次有限稀釋法亞克隆得到21株穩(wěn)定分泌抗Hp抗原的雜交瘤細(xì)胞株,制備腹水并用辛酸硫酸銨聯(lián)合沉淀法純化單克隆抗體。將得到的單克隆抗體在膠體金免疫層析平臺(tái)上進(jìn)行配對(duì)和樣品檢測(cè),獲得多組靈敏度和特異性相對(duì)較高的單克隆抗體組合,其中以2-18E1作為包被抗體,2-9H5或2-17E9作為標(biāo)記抗體檢測(cè)細(xì)菌培養(yǎng)裂解物的最低限為25 ng/m L,為Hp抗原檢測(cè)試劑的研發(fā)提供了基礎(chǔ)。
【作者單位】： 華南理工大學(xué)生物科學(xué)與工程學(xué)院;華南理工大學(xué)輕工與食品學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】： 幽門(mén)螺桿菌 抗原 單克隆抗體 膠體金免疫層析
【基金】：衛(wèi)生部重大新藥創(chuàng)制(2011ZX09506-001) 廣東省戰(zhàn)略性新興產(chǎn)業(yè)核心技術(shù)攻關(guān)項(xiàng)目(2012A080800007) 中國(guó)博士后科學(xué)基金(2012M521593;2013T60796)
【分類(lèi)號(hào)】：R392-33
【正文快照】： 幽門(mén)螺桿菌(Helicobacter pylori,Hp)是一種單極、多鞭毛、末端鈍圓、螺旋形彎曲的革蘭氏陰性細(xì)菌。Hp的持續(xù)感染是慢性活動(dòng)性胃炎、消化性潰瘍、胃黏膜相關(guān)淋巴組織淋巴瘤以及胃癌的主要致病因素,世界衛(wèi)生組織(WHO)已將其列為I級(jí)致癌物質(zhì)[1]。全世界約有半數(shù)以上的人口感染Hp

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