本文關(guān)鍵詞：OPN誘導(dǎo)小鼠MSCs向表皮細(xì)胞分化促進(jìn)創(chuàng)面愈合的研究

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【摘要】：目的以骨橋蛋白(osteopontin,OPN)基因敲除小鼠及野生型小鼠為研究對(duì)象,探討骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(mesenchymal stem cells,MSCs)分化為表皮細(xì)胞的潛能及骨橋蛋白在分化過程中的作用。方法體外實(shí)驗(yàn):將分離培養(yǎng)的野生型(WT)和基因敲除型(KO)新生鼠(鼠齡1 d)MSCs鑒定純度后分別設(shè)為WT組和KO組,取其第3代分別在表皮轉(zhuǎn)化培養(yǎng)體系中孵育,通過鏡下觀察、流式細(xì)胞術(shù)、免疫熒光染色、Western blot等方法,比較兩組表皮細(xì)胞標(biāo)志物(CK14)表達(dá)水平的差異。動(dòng)物實(shí)驗(yàn):實(shí)驗(yàn)分4組,WT組小鼠創(chuàng)周注射GFP-MSCs(WT/MSCs)組,WT小鼠創(chuàng)周注射PBS(WT/PBS)組,KO小鼠創(chuàng)周注射GFP-MSCs(KO/MSCs)組,KO小鼠創(chuàng)周注射PBS(KO/PBS)組,每組各8只雄鼠,鼠齡6~8周,體質(zhì)量20~25 g,按分組將分離培養(yǎng)的GFP-MSCs和PBS注射到創(chuàng)周,觀察創(chuàng)面愈合及GFP-MSCs向表皮細(xì)胞分化的情況。結(jié)果分離培養(yǎng)的MSCs呈梭形或成纖維細(xì)胞樣生長(zhǎng),流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)MSCs的純度超過91%;誘導(dǎo)分化第12、17天的兩組細(xì)胞檢測(cè)發(fā)現(xiàn),WT組和KO組的細(xì)胞均表達(dá)CK14;第17天免疫熒光結(jié)果示W(wǎng)T組CK14的表達(dá)陽(yáng)性率(0.936 3±0.009 5)明顯高于KO組(0.647 5±0.023 1),(P0.01);Western blot檢測(cè)結(jié)果也顯示KO組的CK14表達(dá)量(0.389 4±0.016 8)明顯低于WT組(0.614 6±0.015 3),(P0.01)。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)WT/PBS組創(chuàng)面愈合速度快于KO/PBS組(P0.05),WT/MSCs組的創(chuàng)面愈合速度快于WT/PBS組(P0.05),注射的GFP-MSCs向表皮細(xì)胞分化的能力WT/MSCs組強(qiáng)于KO/MSCs組(P0.05)。結(jié)論 OPN在體內(nèi)、體外均可誘導(dǎo)MSCs分化為表皮細(xì)胞,進(jìn)而促進(jìn)創(chuàng)面愈合。
【作者單位】： 第三軍醫(yī)大學(xué)西南醫(yī)院整形美容外科;蚌埠醫(yī)學(xué)院燒傷整形科;
【關(guān)鍵詞】： 愈合 間充質(zhì)干細(xì)胞(MSCs) 骨橋蛋白(OPN) 表皮 分化
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目(81071563,81272102) 重慶市應(yīng)用開發(fā)項(xiàng)目(2014yykf A0158)~~
【分類號(hào)】：R329.2
【正文快照】： 徽蚌埠,蚌埠醫(yī)學(xué)院燒傷整形科2)皮膚的損傷修復(fù)需要表皮細(xì)胞不斷增殖遷移以維持皮膚表面完整性。而間充質(zhì)干細(xì)胞(mesenchymalstem cells,MSCs)具有高度自我更新能力和多向分化潛能,能向多種細(xì)胞及組織分化以修復(fù)缺損,尤其向表皮細(xì)胞的轉(zhuǎn)化已被應(yīng)用于創(chuàng)面組織的修復(fù)[1-4]。研究

【相似文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：879773