H9C2細(xì)胞培養(yǎng)液誘導(dǎo)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分化為心肌樣細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)研究
發(fā)布時(shí)間:2017-09-06 00:21
本文關(guān)鍵詞:H9C2細(xì)胞培養(yǎng)液誘導(dǎo)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分化為心肌樣細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)研究
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【摘要】:目的:探討H9C2細(xì)胞培養(yǎng)液對(duì)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(mesenchymalstem cells,MSCs)分化為心肌樣細(xì)胞的誘導(dǎo)作用。 方法:運(yùn)用全骨髓貼壁篩選法分離培養(yǎng)大鼠MSCs,制備H9C2細(xì)胞培養(yǎng)液作為誘導(dǎo)培養(yǎng)液,將MSCs誘導(dǎo)培養(yǎng)1、3、5、7天。以表達(dá)心肌特異性標(biāo)志物的H9C2細(xì)胞為陽(yáng)性對(duì)照組,以H9C2細(xì)胞培養(yǎng)液誘導(dǎo)得MSCs為分化實(shí)驗(yàn)組,以未處理的MSCs為陰性對(duì)照組;對(duì)各組細(xì)胞及MSCs增殖分化細(xì)胞進(jìn)行心肌細(xì)胞特性檢測(cè),即用免疫熒光法和western-blot檢測(cè)其肌鈣蛋白T(cTnT)、心肌細(xì)胞結(jié)蛋白(desmin)的表達(dá),用實(shí)時(shí)熒光定量PCR(RT-PCR)檢測(cè)其心肌細(xì)胞特征性基因α-心肌肌球蛋白重鏈(a-MHC)和β-心肌肌球蛋白重鏈(β-MHC)mRNA的表達(dá)。 結(jié)果:1H9C2細(xì)胞培養(yǎng)液誘導(dǎo)MSCs培養(yǎng)7天,免疫熒光技術(shù)檢測(cè)各組細(xì)胞中肌鈣蛋白T的表達(dá),MSCs增殖分化細(xì)胞中cTnT陽(yáng)性細(xì)胞達(dá)0.179±0.011,顯著高于對(duì)照組(P<0.05)。 2H9C2細(xì)胞培養(yǎng)液誘導(dǎo)MSCs培養(yǎng)7天,western-blot檢測(cè)各組細(xì)胞中肌鈣蛋白T、desmin的表達(dá),western-blot檢測(cè)誘導(dǎo)培養(yǎng)MSCs后分化細(xì)胞cTnT蛋白表達(dá)明顯上調(diào)(P<0.05),desmin表達(dá)明顯上調(diào)(P<0.05)。 3H9C2細(xì)胞培養(yǎng)液誘導(dǎo)MSCs培養(yǎng)7天,RT-PCR檢測(cè)各組細(xì)胞中a-MHC與β-MHC mRNA表達(dá),RT-PCR檢測(cè)分化細(xì)胞a-MHC與β-MHC mRNA表達(dá)均上調(diào)(P<0.05)。 結(jié)論:H9C2細(xì)胞培養(yǎng)液能誘導(dǎo)MSCs向心肌樣細(xì)胞分化。
【關(guān)鍵詞】:骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 H9C2 心肌樣細(xì)胞
【學(xué)位授予單位】:重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2014
【分類號(hào)】:R329.2
【目錄】:
- 英漢縮略語(yǔ)名詞對(duì)照5-6
- 摘要6-8
- ABSTRACT8-10
- 前言10
- 1 材料和方法10-17
- 2 結(jié)果17-19
- 3 討論19-21
- 全文小結(jié)21-22
- 參考文獻(xiàn)22-24
- 文獻(xiàn)綜述:骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向心肌細(xì)胞分化及其機(jī)制24-30
- 參考文獻(xiàn)27-30
- 致謝30-31
- 碩士期間發(fā)表的論文31-32
【參考文獻(xiàn)】
中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前3條
1 牛萍;趙月強(qiáng);黃星原;;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞體外增殖及分化過程中Notch信號(hào)的表達(dá)變化[J];基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床;2011年11期
2 郭軍,賈光宏,林國(guó)生,鮑翠玉,汪蕾,楊波,劉維新;體外模擬心肌微環(huán)境下骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向心肌樣細(xì)胞分化的實(shí)驗(yàn)研究[J];心臟雜志;2004年06期
3 袁巖,陳連鳳,張抒揚(yáng),吳煒,陳浩,嚴(yán)曉偉;心肌細(xì)胞裂解液對(duì)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向心肌細(xì)胞分化誘導(dǎo)作用的研究[J];中華心血管病雜志;2005年02期
,本文編號(hào):801071
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