H9C2細胞培養(yǎng)液誘導大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞分化為心肌樣細胞的實驗研究
發(fā)布時間:2017-09-06 00:21
本文關鍵詞:H9C2細胞培養(yǎng)液誘導大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞分化為心肌樣細胞的實驗研究
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【摘要】:目的:探討H9C2細胞培養(yǎng)液對骨髓間充質(zhì)干細胞(mesenchymalstem cells,MSCs)分化為心肌樣細胞的誘導作用。 方法:運用全骨髓貼壁篩選法分離培養(yǎng)大鼠MSCs,制備H9C2細胞培養(yǎng)液作為誘導培養(yǎng)液,將MSCs誘導培養(yǎng)1、3、5、7天。以表達心肌特異性標志物的H9C2細胞為陽性對照組,以H9C2細胞培養(yǎng)液誘導得MSCs為分化實驗組,以未處理的MSCs為陰性對照組;對各組細胞及MSCs增殖分化細胞進行心肌細胞特性檢測,即用免疫熒光法和western-blot檢測其肌鈣蛋白T(cTnT)、心肌細胞結(jié)蛋白(desmin)的表達,用實時熒光定量PCR(RT-PCR)檢測其心肌細胞特征性基因α-心肌肌球蛋白重鏈(a-MHC)和β-心肌肌球蛋白重鏈(β-MHC)mRNA的表達。 結(jié)果:1H9C2細胞培養(yǎng)液誘導MSCs培養(yǎng)7天,免疫熒光技術檢測各組細胞中肌鈣蛋白T的表達,MSCs增殖分化細胞中cTnT陽性細胞達0.179±0.011,顯著高于對照組(P<0.05)。 2H9C2細胞培養(yǎng)液誘導MSCs培養(yǎng)7天,western-blot檢測各組細胞中肌鈣蛋白T、desmin的表達,western-blot檢測誘導培養(yǎng)MSCs后分化細胞cTnT蛋白表達明顯上調(diào)(P<0.05),desmin表達明顯上調(diào)(P<0.05)。 3H9C2細胞培養(yǎng)液誘導MSCs培養(yǎng)7天,RT-PCR檢測各組細胞中a-MHC與β-MHC mRNA表達,RT-PCR檢測分化細胞a-MHC與β-MHC mRNA表達均上調(diào)(P<0.05)。 結(jié)論:H9C2細胞培養(yǎng)液能誘導MSCs向心肌樣細胞分化。
【關鍵詞】:骨髓間充質(zhì)干細胞 H9C2 心肌樣細胞
【學位授予單位】:重慶醫(yī)科大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2014
【分類號】:R329.2
【目錄】:
- 英漢縮略語名詞對照5-6
- 摘要6-8
- ABSTRACT8-10
- 前言10
- 1 材料和方法10-17
- 2 結(jié)果17-19
- 3 討論19-21
- 全文小結(jié)21-22
- 參考文獻22-24
- 文獻綜述:骨髓間充質(zhì)干細胞向心肌細胞分化及其機制24-30
- 參考文獻27-30
- 致謝30-31
- 碩士期間發(fā)表的論文31-32
【參考文獻】
中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前3條
1 牛萍;趙月強;黃星原;;骨髓間充質(zhì)干細胞體外增殖及分化過程中Notch信號的表達變化[J];基礎醫(yī)學與臨床;2011年11期
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,本文編號:801071
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