γδT細胞體外抑制未成熟樹突狀細胞向破骨細胞轉(zhuǎn)分化
發(fā)布時間:2017-09-06 00:05
本文關(guān)鍵詞:γδT細胞體外抑制未成熟樹突狀細胞向破骨細胞轉(zhuǎn)分化
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【摘要】:目的:探討γδT細胞對人外周血來源未成熟樹突狀細胞(Immature dendritic cells,im DC)轉(zhuǎn)分化為破骨細胞(Osteoclasts,OC)過程的影響。方法:(1)采用唑來膦酸(Zoledronate,Zol)及重組人白細胞介素2(Interleukin-2,IL-2)體外激活擴增外周血γδT細胞,并采用粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子(Granulocyte macrophage colony-stimulating factor,GM-CSF)及重組人白細胞介素4(Interleukin-4,IL-4)誘導(dǎo)PBMNC(Peripheral blood mononuclear cell,PBMNC)分化為im DC,后者在細胞核因子кB受體活化因子配體(Receptor activator of nuclear factorкB ligand,RANKL)和巨噬細胞集落刺激因子(Macrophage colonystimulating factor,M-CSF)作用下繼續(xù)培養(yǎng)轉(zhuǎn)分化為OC,采用流式細胞術(shù)分別檢測γδT細胞擴增前后純度及PBMNC經(jīng)由imDC轉(zhuǎn)分化為OC過程中的細胞表型變化;(2)免疫磁珠分選法收集培養(yǎng)至第7天的γδT細胞,建立γδT細胞及im DC共培養(yǎng)(γδT細胞數(shù)量∶im DC數(shù)量=10∶1)體系,采用耐酒石酸酸性磷酸酶(Tartrate resistant acid phosphatase,TRAP)染色和甲苯胺藍染色分析γδT細胞對im DC轉(zhuǎn)分化為OC過程的影響;并收集各培養(yǎng)組培養(yǎng)上清,采用酶聯(lián)免疫吸附實驗檢測腫瘤壞死因子(Tumor necrosis factor-alpha,TNF-α)濃度。結(jié)果:(1)Zol及重組人IL-2可在體外培養(yǎng)條件下擴增MM患者外周血γδT細胞,擴增產(chǎn)率與健康志愿者無統(tǒng)計學(xué)差異(68.87%±20.94%vs 69.33%±16.84%,P0.05);(2)外周血誘導(dǎo)分化的im DC在RANKL和M-CSF作用下可轉(zhuǎn)分化為OC;(3)γδT細胞與im DC間接接觸共培養(yǎng)條件下,TRAP+多核細胞數(shù)和牙本質(zhì)骨吸收面積均顯著低于對照組(分別為5.67±0.58個vs 28.33±2.08個;4.97%±4.3%vs 28.47%±12.8%);(4)在γδT細胞與im DC間接共培養(yǎng)條件下,TNF-α分泌水平顯著增高。結(jié)論:激活的γδT細胞在體外培養(yǎng)條件下可能抑制im DC轉(zhuǎn)分化為OC過程,γδT細胞免疫治療有望成為骨髓瘤骨病治療的新手段。
【作者單位】: 福建醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院;
【關(guān)鍵詞】: γδT細胞 未成熟樹突狀細胞 破骨細胞 骨髓瘤骨病
【基金】:國家自然科學(xué)基金(No.81272628) 福建省自然科學(xué)基金(No.2011J05064)
【分類號】:R329.2
【正文快照】: 1本文為國家自然科學(xué)基金(No.81272628)和福建省自然科學(xué)基金(No.2011J05064)。多發(fā)性骨髓瘤(Multiple myeloma,MM)為血液系統(tǒng)漿細胞惡性腫瘤,多見于老年人。MM仍是一種無法治愈的疾病,雖然20年來由于干細胞移植的應(yīng)用和諸如硼替佐米、雷那度胺和沙利度胺等新藥的出現(xiàn),MM的生
【共引文獻】
中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條
1 曹靜;黃琨;徐敏;;硼替佐米聯(lián)合地塞米松治療多發(fā)性骨髓瘤20例臨床療效分析[J];癌癥進展;2013年06期
2 張芙蓉;楊林花;張睿娟;葛曉燕;張建華;康建民;;不同化療方案治療多發(fā)性骨髓瘤的臨床療效觀察[J];臨床血液學(xué)雜志;2013年06期
3 王q湘,
本文編號:800966
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