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線粒體DNA編碼蛋白質(zhì)在炎癥反應(yīng)中作用的初步探討

發(fā)布時間:2017-08-18 11:29

  本文關(guān)鍵詞:線粒體DNA編碼蛋白質(zhì)在炎癥反應(yīng)中作用的初步探討


  更多相關(guān)文章: 細胞色素b 炎癥反應(yīng) 巨噬細胞 關(guān)節(jié)炎


【摘要】:目的創(chuàng)傷導致機體出現(xiàn)全身炎癥反應(yīng)綜合征,甚至發(fā)生多器官功能衰竭。目前認為創(chuàng)傷后大量線粒體破裂,線粒體內(nèi)由其自身DNA編碼合成的蛋白質(zhì)釋放入血,是導致無菌性炎癥的重要因素。細胞色素b是由線粒體DNA編碼合成的一種蛋白質(zhì)。本文通過動物實驗分析細胞色素b和炎癥反應(yīng)相關(guān)性、體內(nèi)實驗細胞色素b活化巨噬細胞釋放炎癥因子的檢測、體外實驗大鼠膝關(guān)節(jié)腔內(nèi)注射細胞色素b誘導關(guān)節(jié)炎發(fā)生三部分,,初步探討細胞色素b在無菌性炎癥反應(yīng)中所起的作用,為嚴重創(chuàng)傷后SIRS的發(fā)生、多器官損傷及相關(guān)并發(fā)癥的研究提供新思路。 方法第一部分動物實驗:制備大鼠雙側(cè)股骨干骨折模型,分別在創(chuàng)傷后第1小時、2小時、4小時、6小時、8小時、10小時、12小時、24小時、36小時用酶聯(lián)免疫吸附試驗法(ELISA)觀測外周血中Cyt-b、TNF-α、IL-1、IL-6的表達;第二部分體外實驗:將大鼠腹腔巨噬細胞分為培養(yǎng)基對照組、mtDNA(10ug/ml)組;Cyt-b(0.1ug/ml)組、Cyt-b(1ug/ml)組、Cyt-b(10ug/ml)組共5組進行刺激,分別在0小時、2小時、4小時、8小時、12小時、24小時和36小時,用酶聯(lián)免疫吸附試驗法(ELISA)觀測培養(yǎng)液中TNF-α、IL-1、IL-6、的表達水平;第三部分動物實驗將大鼠分為空白對照(緩沖液)組、mtDNA(10ug/ml)組、Cyt-b(10ug/ml)組,分別進行膝關(guān)節(jié)內(nèi)注射,5天后用HE染色觀察膝關(guān)節(jié)病理學變化。實驗資料采用均數(shù)±標準誤(x±s)表示。所有數(shù)據(jù)運用SPSS17.0統(tǒng)計軟件采用組內(nèi)t檢驗、組間F檢驗及相關(guān)回歸分析進行差統(tǒng)計學處理,p0.05表示差異有顯著統(tǒng)計學意義。 結(jié)果1.創(chuàng)傷后大鼠外周血中細胞色素b含量在4小時達到高峰,后逐漸下降,TNF-α在6小時達到高峰,IL-10、IL-6于10小時達到高峰,后逐漸下降;細胞色素b與炎癥反應(yīng)呈正相關(guān)性。2.對照組和低、中濃度Cyt-b組三種炎癥因子TNF-α,IL-1,IL-6表達沒有明顯變化趨勢,高濃度Cyt-b組和mtDNA組炎癥因子表達隨時間變化增加。高濃度Cyt-b可活化大鼠巨噬細胞釋放炎癥因子TNF-α,IL-1,IL-6。3.關(guān)節(jié)內(nèi)注射高濃度Cyt-b和mtDNA組的大鼠膝關(guān)節(jié)病理學表現(xiàn)為明顯炎癥細胞浸潤、滑膜增厚,關(guān)節(jié)炎發(fā)生率和嚴重程度均高于對照組。 結(jié)論Cyt-b和創(chuàng)傷后炎癥反應(yīng)呈正相關(guān),高濃度Cyt-b和mtDNA均能通過刺激巨噬細胞產(chǎn)生炎癥因子,并在體外導致炎癥反應(yīng)的發(fā)生。
【關(guān)鍵詞】:細胞色素b 炎癥反應(yīng) 巨噬細胞 關(guān)節(jié)炎
【學位授予單位】:中國人民解放軍醫(yī)學院
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2013
【分類號】:R3411
【目錄】:
  • 英文縮寫詞一覽表6-7
  • 中文摘要7-9
  • Abstract9-11
  • 前言11-14
  • 第一部分 創(chuàng)傷后大鼠體內(nèi)細胞色素B與炎癥反應(yīng)相關(guān)性的研究14-24
  • 中文摘要14-15
  • Abstract15-17
  • 1 實驗材料17-18
  • 2 實驗方法和分組18-19
  • 3 結(jié)果19-21
  • 討論21-22
  • 結(jié)論22
  • 參考文獻22-24
  • 第二部分 細胞色素 B 活化巨噬細胞的體外實驗研究24-39
  • 中文摘要24-25
  • Abstract25-26
  • 1 材料與方法26-29
  • 2 結(jié)果29-34
  • 3 討論34-35
  • 4 結(jié)論35-36
  • 參考文獻36-39
  • 第三部分 細胞色素 B 體內(nèi)誘導炎癥反應(yīng)的實驗研究39-52
  • 中文摘要39-40
  • Abstract40-42
  • 1 材料與方法42-44
  • 2 實驗方法44-46
  • 3 結(jié)果46-47
  • 4 討論47-48
  • 5 結(jié)論48-49
  • 參考文獻49-52
  • 文獻綜述52-59
  • 參考文獻55-59
  • 攻讀學位期間發(fā)表文章情況59-60
  • 致謝60-61

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前8條

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本文編號:694340

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