線粒體DNA編碼蛋白質(zhì)在炎癥反應(yīng)中作用的初步探討
本文關(guān)鍵詞:線粒體DNA編碼蛋白質(zhì)在炎癥反應(yīng)中作用的初步探討
更多相關(guān)文章: 細(xì)胞色素b 炎癥反應(yīng) 巨噬細(xì)胞 關(guān)節(jié)炎
【摘要】:目的創(chuàng)傷導(dǎo)致機(jī)體出現(xiàn)全身炎癥反應(yīng)綜合征,甚至發(fā)生多器官功能衰竭。目前認(rèn)為創(chuàng)傷后大量線粒體破裂,線粒體內(nèi)由其自身DNA編碼合成的蛋白質(zhì)釋放入血,是導(dǎo)致無(wú)菌性炎癥的重要因素。細(xì)胞色素b是由線粒體DNA編碼合成的一種蛋白質(zhì)。本文通過動(dòng)物實(shí)驗(yàn)分析細(xì)胞色素b和炎癥反應(yīng)相關(guān)性、體內(nèi)實(shí)驗(yàn)細(xì)胞色素b活化巨噬細(xì)胞釋放炎癥因子的檢測(cè)、體外實(shí)驗(yàn)大鼠膝關(guān)節(jié)腔內(nèi)注射細(xì)胞色素b誘導(dǎo)關(guān)節(jié)炎發(fā)生三部分,,初步探討細(xì)胞色素b在無(wú)菌性炎癥反應(yīng)中所起的作用,為嚴(yán)重創(chuàng)傷后SIRS的發(fā)生、多器官損傷及相關(guān)并發(fā)癥的研究提供新思路。 方法第一部分動(dòng)物實(shí)驗(yàn):制備大鼠雙側(cè)股骨干骨折模型,分別在創(chuàng)傷后第1小時(shí)、2小時(shí)、4小時(shí)、6小時(shí)、8小時(shí)、10小時(shí)、12小時(shí)、24小時(shí)、36小時(shí)用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法(ELISA)觀測(cè)外周血中Cyt-b、TNF-α、IL-1、IL-6的表達(dá);第二部分體外實(shí)驗(yàn):將大鼠腹腔巨噬細(xì)胞分為培養(yǎng)基對(duì)照組、mtDNA(10ug/ml)組;Cyt-b(0.1ug/ml)組、Cyt-b(1ug/ml)組、Cyt-b(10ug/ml)組共5組進(jìn)行刺激,分別在0小時(shí)、2小時(shí)、4小時(shí)、8小時(shí)、12小時(shí)、24小時(shí)和36小時(shí),用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法(ELISA)觀測(cè)培養(yǎng)液中TNF-α、IL-1、IL-6、的表達(dá)水平;第三部分動(dòng)物實(shí)驗(yàn)將大鼠分為空白對(duì)照(緩沖液)組、mtDNA(10ug/ml)組、Cyt-b(10ug/ml)組,分別進(jìn)行膝關(guān)節(jié)內(nèi)注射,5天后用HE染色觀察膝關(guān)節(jié)病理學(xué)變化。實(shí)驗(yàn)資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)誤(x±s)表示。所有數(shù)據(jù)運(yùn)用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件采用組內(nèi)t檢驗(yàn)、組間F檢驗(yàn)及相關(guān)回歸分析進(jìn)行差統(tǒng)計(jì)學(xué)處理,p0.05表示差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)果1.創(chuàng)傷后大鼠外周血中細(xì)胞色素b含量在4小時(shí)達(dá)到高峰,后逐漸下降,TNF-α在6小時(shí)達(dá)到高峰,IL-10、IL-6于10小時(shí)達(dá)到高峰,后逐漸下降;細(xì)胞色素b與炎癥反應(yīng)呈正相關(guān)性。2.對(duì)照組和低、中濃度Cyt-b組三種炎癥因子TNF-α,IL-1,IL-6表達(dá)沒有明顯變化趨勢(shì),高濃度Cyt-b組和mtDNA組炎癥因子表達(dá)隨時(shí)間變化增加。高濃度Cyt-b可活化大鼠巨噬細(xì)胞釋放炎癥因子TNF-α,IL-1,IL-6。3.關(guān)節(jié)內(nèi)注射高濃度Cyt-b和mtDNA組的大鼠膝關(guān)節(jié)病理學(xué)表現(xiàn)為明顯炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)、滑膜增厚,關(guān)節(jié)炎發(fā)生率和嚴(yán)重程度均高于對(duì)照組。 結(jié)論Cyt-b和創(chuàng)傷后炎癥反應(yīng)呈正相關(guān),高濃度Cyt-b和mtDNA均能通過刺激巨噬細(xì)胞產(chǎn)生炎癥因子,并在體外導(dǎo)致炎癥反應(yīng)的發(fā)生。
【關(guān)鍵詞】:細(xì)胞色素b 炎癥反應(yīng) 巨噬細(xì)胞 關(guān)節(jié)炎
【學(xué)位授予單位】:中國(guó)人民解放軍醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2013
【分類號(hào)】:R3411
【目錄】:
- 英文縮寫詞一覽表6-7
- 中文摘要7-9
- Abstract9-11
- 前言11-14
- 第一部分 創(chuàng)傷后大鼠體內(nèi)細(xì)胞色素B與炎癥反應(yīng)相關(guān)性的研究14-24
- 中文摘要14-15
- Abstract15-17
- 1 實(shí)驗(yàn)材料17-18
- 2 實(shí)驗(yàn)方法和分組18-19
- 3 結(jié)果19-21
- 討論21-22
- 結(jié)論22
- 參考文獻(xiàn)22-24
- 第二部分 細(xì)胞色素 B 活化巨噬細(xì)胞的體外實(shí)驗(yàn)研究24-39
- 中文摘要24-25
- Abstract25-26
- 1 材料與方法26-29
- 2 結(jié)果29-34
- 3 討論34-35
- 4 結(jié)論35-36
- 參考文獻(xiàn)36-39
- 第三部分 細(xì)胞色素 B 體內(nèi)誘導(dǎo)炎癥反應(yīng)的實(shí)驗(yàn)研究39-52
- 中文摘要39-40
- Abstract40-42
- 1 材料與方法42-44
- 2 實(shí)驗(yàn)方法44-46
- 3 結(jié)果46-47
- 4 討論47-48
- 5 結(jié)論48-49
- 參考文獻(xiàn)49-52
- 文獻(xiàn)綜述52-59
- 參考文獻(xiàn)55-59
- 攻讀學(xué)位期間發(fā)表文章情況59-60
- 致謝60-61
【參考文獻(xiàn)】
中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前8條
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本文編號(hào):694340
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