PEI與脂質體介導基因轉染的比較研究
發(fā)布時間:2017-08-17 10:34
本文關鍵詞:PEI與脂質體介導基因轉染的比較研究
【摘要】:目的比較新型轉染試劑陽離子聚合物聚乙烯亞胺(PEI)與脂質體2000介導的血管內皮細胞生長因子VEGF165基因轉染人胚腎細胞293T的轉染效率,為基因轉染提供新的方法。方法分別采用脂質體和不同N/P比值的PEI將合成的含有綠色熒光蛋白(GFP)和VEGF165的質粒轉入293T細胞。轉染24h后,采用CCK-8試劑盒檢測細胞活性;轉染48h后在熒光顯微鏡下觀察比較兩種轉染方法的轉染效率,并通過ELISA方法檢測細胞上清液中VEGF165濃度,比較兩種方法的轉染效果。結果當N/P=9時,PEI轉染的細胞活性與脂質體轉染相近,對細胞的毒性較小;此時,PEI轉染效率與脂質體也相似,均可達到約70%;同樣,轉染后細胞上清中VEGF165濃度較未轉染組提高(P0.05),但兩種方法轉染組間比較差異無統計學意義(P0.05)。結論 PEI作為一種新型的轉染試劑,與脂質體相比,在一定比例范圍內,具有轉染效率高,對細胞毒性小且價格低廉的優(yōu)勢,有望成為基因轉染的有效載體。
【作者單位】: 江蘇省中醫(yī)院;南京中醫(yī)藥大學附屬醫(yī)院檢驗科;
【關鍵詞】: 聚乙烯亞胺 脂質體 基因轉染 轉染效率
【分類號】:R346
【正文快照】: 基因轉染需要一定的轉染試劑將帶有目的基因的載體運送至細胞內。目前,應用最廣泛的轉染試劑是陽離子脂質體和陽離子聚合物,它們容易通過細胞膜,在通過細胞屏障方面跟病毒有很相似的特征。陽離子脂質體在體外基因轉染中有很高的效率,應用也最為廣泛。然而在體內,它會被迅速清
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本文編號:688550
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