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PEI與脂質(zhì)體介導(dǎo)基因轉(zhuǎn)染的比較研究

發(fā)布時間:2017-08-17 10:34

  本文關(guān)鍵詞:PEI與脂質(zhì)體介導(dǎo)基因轉(zhuǎn)染的比較研究


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【摘要】:目的比較新型轉(zhuǎn)染試劑陽離子聚合物聚乙烯亞胺(PEI)與脂質(zhì)體2000介導(dǎo)的血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子VEGF165基因轉(zhuǎn)染人胚腎細(xì)胞293T的轉(zhuǎn)染效率,為基因轉(zhuǎn)染提供新的方法。方法分別采用脂質(zhì)體和不同N/P比值的PEI將合成的含有綠色熒光蛋白(GFP)和VEGF165的質(zhì)粒轉(zhuǎn)入293T細(xì)胞。轉(zhuǎn)染24h后,采用CCK-8試劑盒檢測細(xì)胞活性;轉(zhuǎn)染48h后在熒光顯微鏡下觀察比較兩種轉(zhuǎn)染方法的轉(zhuǎn)染效率,并通過ELISA方法檢測細(xì)胞上清液中VEGF165濃度,比較兩種方法的轉(zhuǎn)染效果。結(jié)果當(dāng)N/P=9時,PEI轉(zhuǎn)染的細(xì)胞活性與脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染相近,對細(xì)胞的毒性較小;此時,PEI轉(zhuǎn)染效率與脂質(zhì)體也相似,均可達(dá)到約70%;同樣,轉(zhuǎn)染后細(xì)胞上清中VEGF165濃度較未轉(zhuǎn)染組提高(P0.05),但兩種方法轉(zhuǎn)染組間比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論 PEI作為一種新型的轉(zhuǎn)染試劑,與脂質(zhì)體相比,在一定比例范圍內(nèi),具有轉(zhuǎn)染效率高,對細(xì)胞毒性小且價(jià)格低廉的優(yōu)勢,有望成為基因轉(zhuǎn)染的有效載體。
【作者單位】: 江蘇省中醫(yī)院;南京中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科;
【關(guān)鍵詞】聚乙烯亞胺 脂質(zhì)體 基因轉(zhuǎn)染 轉(zhuǎn)染效率
【分類號】:R346
【正文快照】: 基因轉(zhuǎn)染需要一定的轉(zhuǎn)染試劑將帶有目的基因的載體運(yùn)送至細(xì)胞內(nèi)。目前,應(yīng)用最廣泛的轉(zhuǎn)染試劑是陽離子脂質(zhì)體和陽離子聚合物,它們?nèi)菀淄ㄟ^細(xì)胞膜,在通過細(xì)胞屏障方面跟病毒有很相似的特征。陽離子脂質(zhì)體在體外基因轉(zhuǎn)染中有很高的效率,應(yīng)用也最為廣泛。然而在體內(nèi),它會被迅速清

【參考文獻(xiàn)】

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【共引文獻(xiàn)】

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4 楊惠祥;喬寶民;王廣有;李勝芝;張s,

本文編號:688550


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