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人誘導(dǎo)多能干細(xì)胞體外擴(kuò)增生成紅系集落并構(gòu)建紅系祖細(xì)胞株的研究

發(fā)布時(shí)間:2017-08-13 01:21

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【摘要】:目的將人誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(hi PSCs)分化成為紅系祖細(xì)胞并構(gòu)建穩(wěn)定的紅系祖細(xì)胞株。方法采用與滋養(yǎng)層細(xì)胞共培養(yǎng)的方式,添加10 ng/m L的TPO、5 U/m L的EPO、25 ng/m L的SCF、5 ng/m L的Flt-3、20 ng/m L的IL-3的誘導(dǎo)因子,誘導(dǎo)hi PSCs分化成為紅系集落,構(gòu)建穩(wěn)定的紅系祖細(xì)胞株;倒置顯微鏡觀察獲得的細(xì)胞株形態(tài),瑞氏染色并計(jì)數(shù),MTT法檢測(cè)細(xì)胞活性,流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞表面標(biāo)志物。結(jié)果 hi PSCs誘導(dǎo)構(gòu)建的紅系祖細(xì)胞株遺傳性狀穩(wěn)定并可長(zhǎng)期傳代,細(xì)胞呈集落樣生長(zhǎng),外觀上與正常紅系祖細(xì)胞無差異。分類計(jì)數(shù)構(gòu)建的紅系祖細(xì)胞株比例(%):P0與P5代細(xì)胞為84.90±4.93 vs 72.20±6.24(P0.05);流式檢測(cè),hi PSCs誘導(dǎo)構(gòu)建的紅系祖細(xì)胞株細(xì)胞表面標(biāo)志物CD235a陽性率(%)表達(dá):P0與P5代細(xì)胞為3.02±0.75 vs 5.87±0.37(P0.05)。結(jié)論誘導(dǎo)hi PSCs生成的紅系祖細(xì)胞株在表面標(biāo)志繼承性和遺傳性狀方面都是穩(wěn)定的。
【作者單位】: 第三軍醫(yī)大學(xué)第一附屬醫(yī)院輸血科中國(guó)人民解放軍重慶血站;
【關(guān)鍵詞】人誘導(dǎo)多能干細(xì)胞 紅系集落 紅系祖細(xì)胞株 滋養(yǎng)層細(xì)胞共培養(yǎng) 體外擴(kuò)增 誘導(dǎo)因子
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金(81270649)
【分類號(hào)】:R329.2
【正文快照】: (1965.03-),男,教授,主任醫(yī)師,博士研究生導(dǎo)師,主要從事血液安全與臨床輸血研究,電話:023-68754270;Email:shumingzhao123@qq.com臍血和同源供體人造血干細(xì)胞(human hematopoieticstem cells,HSCs)等移植的運(yùn)用,極大地提高和改變了對(duì)以血液輸注為主要治療手段的一系列疾病的治

【參考文獻(xiàn)】

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1 雷慧芬;范婭涵;孟強(qiáng);尹智平;陸華;蔣天倫;趙樹銘;;體外構(gòu)建人巨核祖細(xì)胞/胃癌細(xì)胞融合體生成血小板的研究[J];中國(guó)輸血雜志;2011年04期

【共引文獻(xiàn)】

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1 王甜甜;王世春;林放;孟強(qiáng);陳藝心;趙樹銘;;構(gòu)建三維培養(yǎng)體系誘導(dǎo)臍血干細(xì)胞向血小板分化的體外實(shí)驗(yàn)研究[J];中國(guó)輸血雜志;2013年11期

2 孟強(qiáng);趙樹銘;;人誘導(dǎo)多能干細(xì)胞體外誘導(dǎo)產(chǎn)生紅細(xì)胞的研究進(jìn)展[J];中國(guó)輸血雜志;2015年02期

3 郁金鳳;孫文翠;路旭琳;邊國(guó)慧;潘旭;毛斌;黃淑;賴默溫;周涯;鄒慶;李晴;曾憲波;李玉佳;陳利民;周家喜;馬峰;;人胚胎干細(xì)胞高效誘導(dǎo)產(chǎn)生巨噬細(xì)胞方法的建立[J];中國(guó)輸血雜志;2015年05期

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5 HUANG Sha;FU XiaoBing;;Stem cell therapies and regenerative medicine in China[J];Science China(Life Sciences);2014年02期

6 蔡耘;張緒超;陳惠芹;黃紹良;;含人AGM區(qū)、胎肝及骨髓基質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)體系程序化誘導(dǎo)小鼠胚胎干細(xì)胞向造血干細(xì)胞的分化[J];中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù);2011年27期

7 毛斌;馬峰;;hESCs/hiPSCs體外誘導(dǎo)產(chǎn)生紅細(xì)胞的研究進(jìn)展及其臨床應(yīng)用的展望[J];中國(guó)細(xì)胞生物學(xué)學(xué)報(bào);2012年11期

8 駱玉梅;范勇;陳欣潔;岳磊;黎青;余波瀾;何文智;馬曉燕;孫筱放;;以4種基因誘導(dǎo)產(chǎn)前診斷絨毛細(xì)胞建立誘導(dǎo)性多能干細(xì)胞[J];中國(guó)組織工程研究;2013年01期

9 Jing ZHAO;Wen-jie JIANG;Chen SUN;Cong-zhe HOU;Xiao-mei YANG;Jian-gang GAO;;Induced pluripotent stem cells:origins, applications, and future perspectives[J];Journal of Zhejiang University-Science B(Biomedicine & Biotechnology);2013年12期

10 鄧君;陳曉;晏穎;周和政;;誘導(dǎo)多功能干細(xì)胞在視網(wǎng)膜疾病中的應(yīng)用[J];中國(guó)組織工程研究;2013年36期

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前5條

1 王穎佳;WAS綜合征特異性無整合誘導(dǎo)性多能干細(xì)胞體外造血分化及基因靶向編輯研究[D];浙江大學(xué);2013年

2 紀(jì)光臻;豬誘導(dǎo)多能性干細(xì)胞及端粒重編程研究[D];南開大學(xué);2013年

3 葛磊;IGF-1R磷酸化調(diào)控Sox2表達(dá)影響胃癌干性功能及預(yù)后研究[D];新疆醫(yī)科大學(xué);2013年

4 古彥錚;人類胚胎干細(xì)胞/誘導(dǎo)性多能干細(xì)胞向成熟的嗜堿性粒細(xì)胞誘導(dǎo)分化及其生物學(xué)特性的研究[D];蘇州大學(xué);2012年

5 朱明欣;人腦脊液對(duì)人類脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞及胎兒神經(jīng)前體細(xì)胞增殖、凋亡及遷移特性的影響[D];華中科技大學(xué);2014年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前5條

1 王慧緯;乙肝肝硬化患者血清對(duì)巨核細(xì)胞增殖、分化的影響[D];山西醫(yī)科大學(xué);2013年

2 王甜甜;構(gòu)建三維培養(yǎng)體系誘導(dǎo)臍血干細(xì)胞向血小板分化的實(shí)驗(yàn)研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2013年

3 劉坤坤;間充質(zhì)干細(xì)胞與汗腺細(xì)胞融合實(shí)現(xiàn)汗腺再生的研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2014年

4 鄧君;不同方法將骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植到大鼠視網(wǎng)膜下的比較[D];南方醫(yī)科大學(xué);2014年

5 于昊澤;基于慢病毒載體和轉(zhuǎn)錄因子的人角膜基質(zhì)細(xì)胞重編程研究[D];中國(guó)海洋大學(xué);2014年

【二級(jí)參考文獻(xiàn)】

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2 孟慶寶;魏亞明;張印則;;不同細(xì)胞因子組合對(duì)臍血造血干細(xì)胞體外擴(kuò)增效果分析[J];中國(guó)輸血雜志;2009年06期

3 史蓉華;王昕;趙樹銘;;DC瘤苗激活的T淋巴細(xì)胞對(duì)胃癌細(xì)胞的殺傷效應(yīng)研究[J];中國(guó)輸血雜志;2010年02期

4 劉劍剛;馬魯波;錢民全;;體外血栓形成后血液的流變性變化及體外血栓形成試驗(yàn)的規(guī)范化操作[J];微循環(huán)學(xué)雜志;2008年04期

5 李昕;陳方平;劉競(jìng);吳新華;蔣鐵斌;唐雪元;;臍血CD34~+細(xì)胞體外誘導(dǎo)分化為成熟巨核細(xì)胞及產(chǎn)出血小板(英文)[J];中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù);2009年10期

6 王昕;史蓉華;李靜;劉鳳君;陳寒梅;趙樹銘;;改良血小板添加液低溫液態(tài)保存血小板的形態(tài)及功能研究[J];中國(guó)實(shí)驗(yàn)血液學(xué)雜志;2009年03期

7 陳輝;楊立業(yè);;細(xì)胞融合和非整倍體的產(chǎn)生[J];醫(yī)學(xué)綜述;2008年17期

8 方建培;夏婷;陳國(guó)華;吳燕峰;徐宏貴;魏菁;黃紹良;;臍血和外周血來源的巨核細(xì)胞體外擴(kuò)增差異的研究[J];中華兒科雜志;2006年11期

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 劉文君;陳艾;陳紅英;冉伶;郭渠蓮;;經(jīng)人巨細(xì)胞病毒感染人臍血造血干細(xì)胞向粒-巨噬系和紅系祖細(xì)胞增殖過程中HOXB6-mRNA及其基因表達(dá)(英文)[J];中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù);2008年21期

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中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 冉伶;劉文君;;人類巨細(xì)胞病毒感染對(duì)臍血紅系祖細(xì)胞HOXB6基因表達(dá)的影響[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十四次全國(guó)兒科學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2006年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 王金明;誘導(dǎo)臍血造血干/祖細(xì)胞分化為紅系祖細(xì)胞及其規(guī);瘮U(kuò)增[D];中南大學(xué);2013年

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本文編號(hào):664672

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