發(fā)布時間：2017-08-08 19:32

  本文關(guān)鍵詞：體外器官培養(yǎng)建立軟骨退變模型

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【摘要】：[目的]體外培養(yǎng)大鼠的股骨頭并誘導(dǎo)其快速退變,為藥物篩選和治療提供可靠的軟骨退變模型。[方法]取2周齡SD幼鼠的股骨頭,每只左右股骨頭對應(yīng)為對照組和實驗組,分別培養(yǎng)于正常培養(yǎng)基和誘導(dǎo)培養(yǎng)基中(含50ng/ml的TNFa),每隔48 h換一次培養(yǎng)液,至第5 d,取出股骨頭,固定于4%多聚甲醛,經(jīng)過脫鈣和脫水,石蠟包埋,切片后經(jīng)甲苯胺藍和臧紅-固綠染色及細胞免疫熒光檢測Ⅱ型膠原、MMP13、Sox9、ADAMTS5等基因的表達。[結(jié)果]在誘導(dǎo)培養(yǎng)基中培養(yǎng)5 d的股骨頭外緣,相對于正常培養(yǎng)基中培養(yǎng)的股骨頭外緣,甲苯胺藍和臧紅染色明顯淡染,固綠深染,提示軟骨退變。進一步免疫熒光檢測軟骨標(biāo)志基因Ⅱ型膠原和Sox9表達減弱,促軟骨退變基因MMP13和ADAMTS5表達增強。且經(jīng)過誘導(dǎo)培養(yǎng)的股骨頭的整體大小明顯小于正常培養(yǎng)的股骨頭。[結(jié)論]體外培養(yǎng)大鼠股骨頭快速誘導(dǎo)其退變,建立軟骨退變的體外模型。
【作者單位】： 上海中醫(yī)藥大學(xué)附屬曙光醫(yī)院石氏傷科醫(yī)學(xué)中心;上海市中醫(yī)藥研究院骨傷科研究所;
【關(guān)鍵詞】： 股骨頭 染色 蛋白表達 誘導(dǎo) 軟骨退變
【基金】：國家自然科學(xué)基金項目(編號:81073114,81072830,81373665) 上海市教委創(chuàng)新項目(編號:11YZ64) 上海市高校青年教師培養(yǎng)資助計劃項目(編號:ZZszy12017)
【分類號】：R-332;R681.3
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本文編號：641725