本文關(guān)鍵詞：黃褐斑肝氣郁證小鼠模型的建立及消斑靈干預(yù)

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【摘要】：目的：1.檢測小鼠皮膚、肝臟組織中SOD活度、MDA含量，觀察小鼠體質(zhì)量、行為學(xué)及皮膚黑色素細胞病理形態(tài)學(xué)變化，初步建立系統(tǒng)、科學(xué)的黃褐斑肝氣郁證小鼠模型的評價規(guī)范；2.消斑靈干預(yù)模型，探討消斑靈對黃褐斑肝氣郁證小鼠模型的療效，初步闡釋本藥物治療黃褐斑的可能機制，為藥物進入臨床研究提供數(shù)據(jù)支撐。 方法：1.通過曠場實驗、懸尾實驗篩選健康雌性昆明種小鼠進入實驗，采用局部紫外線照射+黃體酮全身攻擊的同時進行束縛的方法進行模型的制備，以體質(zhì)量、行為學(xué)等宏觀指標(biāo)，皮膚、肝臟組織中SOD活度、MDA含量以及皮膚黑色素細胞病理形態(tài)學(xué)等指標(biāo)的變化評價模型。2.按照上述方法篩選合適小鼠進入實驗，分為正常組、模型組、消斑靈高劑量組、消斑靈中劑量組、消斑靈低劑量組、陽性藥對照組，造模期結(jié)束后給予藥物干預(yù)28d，觀察上述各項指標(biāo)的變化。 結(jié)果：1.造模28d后，與正常組小鼠比較，模型組小鼠的體質(zhì)量和曠場實驗總得分顯著減少，懸尾實驗不動時間顯著增加（P0.01）；模型組小鼠皮膚和肝臟組織中SOD活度顯著降低（P0.05，P0.01），MDA含量顯著升高（P0.01，P0.001）；在皮膚黑色素細胞免疫組化實驗檢測結(jié)果中，正常組小鼠皮膚中未見黑色素細胞，幾乎無陽性表達，而模型組小鼠皮膚黑色素細胞明顯增多，聚集成簇分布或散在于基底細胞和棘細胞層，呈強陽性表達，黑色素細胞的個數(shù)、平均光密度、數(shù)密度均有顯著性增高（P0.001）。2.藥物干預(yù)模型后，與模型組相比較，消斑靈高、中、低劑量組、陽性藥對照組對小鼠宏觀指標(biāo)結(jié)果有顯著性改善（P0.05，P0.01，P0.001）；消斑靈高劑量組小鼠皮膚、肝臟組織中SOD活度均有顯著性升高（P0.05），消斑靈中劑量組小鼠皮膚、肝臟中MDA含量均有顯著降低（P0.01）；藥物干預(yù)后，各給藥組小鼠棘細胞層和基底細胞層中黑色素細胞顯著減少，黑色素陽性表達有顯著減弱。 結(jié)論：局部紫外線照射+黃體酮全身攻擊的同時進行束縛的方法成功建立了黃褐斑肝氣郁證小鼠模型；消斑靈對黃褐斑肝氣郁證小鼠模型具有良好的治療作用，機制可能與提高機體抗氧化性、抑制酪氨酸酶活性、改善血液流變學(xué)、增強機體疏肝解郁功能等有關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：黃褐斑 肝氣郁證 消斑靈 小鼠模型
【學(xué)位授予單位】：山東中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：R-332;R285.5
【目錄】：

• 提要4-5
• Abstract5-10
• 引言10-12
• 實驗一：黃褐斑肝氣郁證小鼠模型的建立12-25
• 1 實驗材料12-14
• 1.1 實驗動物12
• 1.2 藥品及試劑12
• 1.2.1 模型制備主要藥品與試劑12
• 1.2.2 免疫組化實驗主要藥品與試劑12
• 1.3 主要儀器及器材12-13
• 1.4 相關(guān)溶液配制13-14
• 2.方法14-19
• 2.1 實驗小鼠的篩選及分組14-15
• 2.1.1 曠場實驗（open field test，OFT）14-15
• 2.1.2 懸尾實驗（tail suspension test，TST）15
• 2.2 動物模型制備方法15
• 2.3 小鼠皮膚、肝臟組織取材及指標(biāo)測定方法15-16
• 2.4 小鼠皮膚黑色素細胞病理形態(tài)學(xué)觀察16-19
• 2.4.1 皮膚組織石蠟切片制備16-17
• 2.4.2 免疫組織化學(xué)實驗方法17-19
• 2.4.3 免疫組化切片檢測及數(shù)據(jù)分析19
• 2.5 統(tǒng)計方法19
• 3.實驗結(jié)果19-25
• 3.1 小鼠宏觀指標(biāo)結(jié)果19-21
• 3.1.1 兩組小鼠體質(zhì)量比較19-20
• 3.1.2 兩組小鼠曠場實驗總得分比較20
• 3.1.3 兩組小鼠懸尾實驗結(jié)果比較20-21
• 3.2 組織中 SOD 活度檢測結(jié)果21
• 3.3 組織中 MDA 含量檢測結(jié)果21-22
• 3.4 皮膚黑色素細胞免疫組化實驗檢測結(jié)果22-23
• 3.4.1 正常組22
• 3.4.2 模型組22-23
• 3.5 皮膚黑色素陽性細胞的病理圖像分析結(jié)果23-25
• 3.5.1 兩組小鼠皮膚黑色素細胞的個數(shù)比較23
• 3.5.2 兩組小鼠皮膚黑色素細胞的平均光密度、數(shù)密度比較23-25
• 實驗二：消斑靈干預(yù)黃褐斑肝氣郁證小鼠模型25-36
• 1 實驗材料與方法25-26
• 1.1 實驗小鼠的篩選及分組25
• 1.2 給藥方法及劑量25
• 1.3 小鼠組織取材以及指標(biāo)檢測25-26
• 2.實驗結(jié)果26-36
• 2.1 小鼠宏觀指標(biāo)結(jié)果26-29
• 2.1.1 各組小鼠體質(zhì)量增加比較26-27
• 2.1.2 各組小鼠曠場實驗總得分比較27-28
• 2.1.3 各組小鼠懸尾實驗結(jié)果比較28-29
• 2.2 組織中 SOD 活度檢測結(jié)果29-30
• 2.3 組織中 MDA 含量檢測結(jié)果30
• 2.4 皮膚黑色素細胞免疫組化實驗檢測結(jié)果30-34
• 2.4.1 正常組30-31
• 2.4.2 模型組31
• 2.4.3 消斑靈高劑量組31
• 2.4.4 消斑靈中劑量組31
• 2.4.5 消斑靈低劑量組31
• 2.4.6 陽性藥對照組31-34
• 2.5 皮膚黑色素陽性細胞的病理圖像分析結(jié)果34-36
• 2.5.1 各組小鼠皮膚黑色素細胞的個數(shù)比較34
• 2.5.2 各組小鼠皮膚黑色素細胞的平均光密度、數(shù)密度比較34-36
• 討論36-44
• 1 黃褐斑概述36
• 2 黃褐斑肝氣郁證小鼠模型的制備與評價36-40
• 2.1 黃褐斑肝氣郁證小鼠模型的制備36-37
• 2.2 黃褐斑肝氣郁證小鼠模型的評價37-40
• 2.2.1 對黃褐斑小鼠模型的評價37-39
• 2.2.1.1 組織中 SOD 活度檢測38
• 2.2.1.2 組織中 MDA 含量檢測38
• 2.2.1.3 皮膚黑色素細胞免疫組化實驗38-39
• 2.2.2 對肝氣郁證小鼠模型的評價39-40
• 2.2.2.1 肝氣郁證與體質(zhì)量39
• 2.2.2.2 肝氣郁證與曠場實驗（open field test，OFT）39-40
• 2.2.2.3 肝氣郁證與懸尾實驗（tail suspension test，，TST）40
• 3 消斑靈組方依據(jù)及其可能作用機制40-42
• 3.1 烏梅40
• 3.2 五味子40-41
• 3.3 焦山楂41
• 3.4 山茱萸41
• 3.5 川芎41-42
• 3.6 醋香附42
• 3.7 丹參42
• 4 問題與展望42-44
• 結(jié)語44-45
• 參考文獻45-51
• 綜述51-57
• 參考文獻55-57
• 致謝57-58
• 附錄：縮略詞表58-59
• 論文著作59-60
• 詳細摘要60-64

【參考文獻】

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本文編號：592253