本文關(guān)鍵詞：芪葵顆粒對糖尿病腎病模型及人系膜細(xì)胞MCP-1表達(dá)的影響

  更多相關(guān)文章： 芪葵顆粒 糖尿病腎病 糖尿病大鼠 人腎小球系膜細(xì)胞 MCP-1

【摘要】：目的：觀察芪葵顆粒對糖尿病腎病大鼠尿蛋白及腎組織單核細(xì)胞趨化因子-1(MCP-1)表達(dá)的影響,以及芪葵顆粒對高糖培養(yǎng)下人腎小球系膜細(xì)胞MCP-1表達(dá)的影響,探討芪葵顆粒防治糖尿病腎病的療效及可能機(jī)制。 方法：體內(nèi)試驗(yàn)：通過高糖高脂飲食加腹腔注射小劑量鏈脲佐菌素(streptozocin, STZ)建立2型糖尿病模型。將雄性SD大鼠隨機(jī)分為正常對照組、模型組、中藥組及厄貝沙坦組。每兩周測量體重1次,剪尾端取血測血糖1次；大鼠處死前,用代謝籠收集24h尿,用于測定24h尿蛋白(UTP)、尿微量白蛋白/肌酐比值(mAlb/Cr);頸動(dòng)脈取血,用于測定血糖(Glu)、總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、尿素氮(BUN)和肌酐(Scr)；處死后取雙腎,稱量腎重,將腎組織進(jìn)行HE染色觀察腎組織結(jié)構(gòu)變化,并通過免疫組織化學(xué)法定位并定量MCP-1的表達(dá)。 體外實(shí)驗(yàn)：對數(shù)生長期的HRMC分為3大組：A大組、B1大組及B2大組。A大組分為以下6組：NG(正常對照組,5mmol/L葡萄糖),Man(甘露醇滲透壓對照組,5mmol/L葡萄糖+25mmol/L甘露醇),HG(高糖組,30mmol/L葡萄糖),S2(2mg生藥組,30mmol/L葡萄糖+2mg/mL生藥),S1(1mg生藥組,30mmol/L葡萄糖+1mg/mL生藥),S0.5(0.5mg生藥組,30mmol/L葡萄糖+0.5mg/mL生藥)(生藥濃度由MTT篩選得到)。B1大組組分為以下6組：NLG1(10%正常血清低糖,5mmol/L葡萄糖)、NHG1(10%N常血清高糖組,30mmol/L葡萄糖)、LLG1(10%低劑量血清低糖組,5mmol/L葡萄糖)、LHG1(10%低劑量血清高糖組,30mmol/L葡萄糖)、HLG1(10%高劑量血清低糖組,5mmol/L葡萄糖)、HHG1(10%高劑量血清高糖組,30mmol/L葡萄糖)。B2大組分為以下6組：NLG2(20%正常血清低糖組,5mmol/L葡萄糖)、NHG2(20%正常血清高糖組,30mmol/L葡萄糖)、LLG2(20%低劑量血清低糖組,5mmol/L葡萄糖)、LHG2(20%低劑量血清高糖組,30mmol/L葡萄糖)、HLG2(20%高劑量血清低糖組,5mmol/L葡萄糖)、HHG2(20%高劑量血清高糖組,30mmol/L葡萄糖)。采用RealTime-RT-PCR檢測培養(yǎng)24h后MCP-1mRNA的表達(dá),western blot法檢測MCP-1蛋白的表達(dá),ELISA法檢測培養(yǎng)上清液MCP-1蛋白的分泌。 結(jié)果：體內(nèi)實(shí)驗(yàn)：中藥組大鼠和模型組大鼠相比,體重明顯增加(P0.01),腎重及腎重/體重比值明顯下降(P0.01),血糖降低(P0.05),總膽固醇降低(P0.01),尿素氮明顯低于模型組(P0.05),24h尿蛋白明顯降低(P0.01)。模型組大鼠腎小球增生明顯,腎小球毛細(xì)血管叢有明顯玻璃樣變、硬化,系膜基質(zhì)增多,基膜坍塌,腎小球毛細(xì)血管管腔閉塞,中藥組腎臟病理改變較上述明顯減輕。腎臟免疫組化示：中藥組腎小球及腎小管間質(zhì)MCP-1表達(dá)量較模型組明顯減少。 體外實(shí)驗(yàn)：在A大組：S2較HGMCP-1蛋白分泌減少(P0.05)。B1大組：HHG1MCP-1蛋白表達(dá)水平較NHG1明顯降低(P0.05); HLG1MCP-1蛋白分泌較NLG1明顯減少(P0.05)。B2大組：HLG2MCP-1蛋白分泌較NLG2明顯減少(P0.05)；與NHG2相比,HHG2mRNA表達(dá)、蛋白表達(dá)及分泌水平均明顯降低(P0.05)。 結(jié)論：芪葵顆粒可以降低糖尿病腎病大鼠尿蛋白、血尿素氮、血糖、血脂水平,降低腎臟MCP-1表達(dá),改善糖尿病腎病大鼠腎臟病變；可以減少高糖培養(yǎng)下人腎系膜細(xì)胞MCP-1的mRNA和蛋白質(zhì)的表達(dá)。推測芪葵顆�？赡芡ㄟ^改善腎臟炎癥,從而達(dá)到延緩糖尿病腎病的腎臟保護(hù)作用。
【關(guān)鍵詞】：芪葵顆粒 糖尿病腎病 糖尿病大鼠 人腎小球系膜細(xì)胞 MCP-1
【學(xué)位授予單位】：南京中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：R259;R277.5;R-332
【目錄】：

• 摘要7-9
• Abstract9-11
• 前言11-12
• 第一部分 理論研究12-33
• 1. 中醫(yī)對糖尿病腎病的研究進(jìn)展12-17
• 1.1. 病名12-13
• 1.2 病因13
• 1.3 病機(jī)13-15
• 1.4 糖尿病腎病中醫(yī)治療的研究15-17
• 2. 現(xiàn)代醫(yī)學(xué)對糖尿病腎病的研究進(jìn)展17-29
• 2.1 糖尿病腎病的發(fā)病機(jī)制17-24
• 2.2 糖尿病腎病的流行病學(xué)24-26
• 2.3 糖尿病腎病的診斷與篩查26-27
• 2.4 糖尿病腎病的治療27-29
• 3. 芪葵顆粒方藥分析及現(xiàn)代藥理學(xué)研究29-31
• 3.1 芪葵顆粒處方來源、組方及功用29-30
• 3.2 芪葵顆料藥物的現(xiàn)代藥理研究30-31
• 4. 單核細(xì)胞趨化蛋白131-33
• 第二部分 實(shí)驗(yàn)研究33-55
• 1. 實(shí)驗(yàn)材料33-37
• 1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物33
• 1.2 細(xì)胞系33
• 1.3 實(shí)驗(yàn)藥物33
• 1.4 主要試劑33-35
• 1.5 主要儀器設(shè)備35-36
• 1.6 主要溶液配制36-37
• 2. 試驗(yàn)方法37-42
• 2.1 體內(nèi)試驗(yàn)37-39
• 2.2 體外試驗(yàn)39-42
• 2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法42
• 3. 實(shí)驗(yàn)結(jié)果42-52
• 3.1 體內(nèi)試驗(yàn)42-48
• 3.2 體外實(shí)驗(yàn)48-52
• 4. 討論52-55
• 結(jié)語55-56
• 參考文獻(xiàn)56-60
• 附錄60-61
• 攻讀碩士學(xué)位期間取得的學(xué)術(shù)成果61-62
• 致謝62

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前4條

1 諶潔;呂仁和對糖尿病腎病分期辨證用膳的經(jīng)驗(yàn)[J];北京中醫(yī);2004年04期

2 何澤;南征;樸春麗;韓輔;張睿;包揚(yáng);米佳;李金博;陳曦;;糖尿病腎病中醫(yī)規(guī)范化治療方案研究[J];長春中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào);2010年03期

3 左愛欣;;糖尿病腎病的中醫(yī)臨床辨證用藥[J];中國醫(yī)藥導(dǎo)刊;2008年05期

4 許友明;林揚(yáng)芳;李悅s，

本文編號：589947