本文關(guān)鍵詞：miR-30a影響MSCs的細(xì)胞周期及其對(duì)DCs的抑制作用

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【摘要】：目的:間充質(zhì)干細(xì)胞(MSCs)是一群具有自我更新能力和多向分化潛能的多功能干細(xì)胞。已經(jīng)有研究表明,miR-30a在一些免疫相關(guān)疾病的MSCs中的表達(dá)發(fā)生變化。但對(duì)于miR-30a如何調(diào)控MSCs影響其免疫調(diào)節(jié)功能還未有報(bào)道。本研究探究了miR-30a對(duì)MSCs的表型、活力、凋亡、周期和免疫調(diào)節(jié)功能的影響。方法:用混合酶法分離人臍帶來源的間充質(zhì)干細(xì)胞;用流式細(xì)胞儀分析了高表達(dá)miR-30a對(duì)MSCs表型的影響;用CCK-8法檢測(cè)了miR-30a對(duì)MSCs的活力的影響;用Annexin V/PI雙染法檢測(cè)了高表達(dá)miR-30a后細(xì)胞凋亡的情況;用Q-PCR和蛋白質(zhì)免疫印跡的方法檢測(cè)了miR-30a對(duì)周期蛋白Cyclin E2(CCNE2)的影響;通過Targetscan預(yù)測(cè)軟件分析miR-30a與CCNE2的靶向關(guān)系,并通過熒光素酶檢測(cè)試驗(yàn)進(jìn)行驗(yàn)證;另外通過MSCs與樹突狀細(xì)胞(DCs)共培養(yǎng)探討了高表達(dá)miR-30a的MSCs對(duì)DCs的成熟的影響。結(jié)果:高表達(dá)miR-30a不影響MSCs的表型、活力和凋亡,但能抑制CCNE2的表達(dá),使細(xì)胞周期阻滯在G0/G1期;進(jìn)一步通過檢測(cè)DCs的CD40和CD86表達(dá)發(fā)現(xiàn),與普通MSCs相比,高表達(dá)miR-30a的MSCs能明顯抑制DCs的成熟。結(jié)論:miR-30a可能通過抑制CCNE2表達(dá)影響MSCs的細(xì)胞周期,且miR-30a能增強(qiáng)MSCs對(duì)DCs的免疫抑制作用。
【作者單位】： 南京大學(xué)醫(yī)學(xué)院和生物醫(yī)藥技術(shù)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】： miR-a 間充質(zhì)干細(xì)胞 細(xì)胞周期 樹突狀細(xì)胞
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(31370899) 江蘇省高�？蒲谐晒a(chǎn)業(yè)化推進(jìn)項(xiàng)目(JHB2011-1)資助
【分類號(hào)】：R329.2
【正文快照】： 間充質(zhì)干細(xì)胞(MSCs)是一群具有自我更新能 力和多向分化潛能的多功能干細(xì)胞[1]。MSCs具有低的免疫原性和免疫調(diào)節(jié)能力,能夠通過直接的細(xì)胞接觸或者分泌細(xì)胞因子的方式調(diào)控多種免疫細(xì)胞的功能[2-7]。MicroRNA(miRNA)是一類由內(nèi)源基因編碼的長(zhǎng)約22個(gè)核苷酸的非編碼單鏈RNA分子,

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本文編號(hào)：573056