本文關(guān)鍵詞：體外共培養(yǎng)大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞對牙囊細胞增殖、成骨分化影響的早期研究

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【摘要】：目的： 構(gòu)建大鼠牙囊細胞（dental follicle cells, DFCs）、骨髓間充質(zhì)干細胞（bone marrow-derived mesenchymal stem cells, BMSCs）體外共培養(yǎng)模型，初步研究與大鼠BMSCs共培養(yǎng)對DFCs增殖、成骨分化的影響。 方法： 1.大鼠DFCs、BMSCs的體外分離、培養(yǎng)和鑒定。 2.模型構(gòu)建與分組。采用0.4um孔徑Transwell小室構(gòu)建大鼠DFCs、BMSCs體外共培養(yǎng)模型。共培養(yǎng)組：DFCs接種于Transwell小室配套孔板，BMSCs接種于Transwell小室，建立上下雙層細胞共培養(yǎng)模型；對照組：僅將DFCs接種于Transwell小室配套孔板，單獨培養(yǎng)。 3.DFCs增殖活力檢測。采用Transwell小室（24孔板規(guī)格）構(gòu)建共培養(yǎng)模型，每組4個復孔，于共培養(yǎng)后第1、3、5、7天應用CCK-8檢測法對DFCs增殖活力進行檢測。 4.DFCs ALP活性檢測。采用Transwell小室（24孔板規(guī)格）構(gòu)建共培養(yǎng)模型，每組6個復孔，于共培養(yǎng)后第7、14天對DFCs進行ALP活性檢測。 5.FQ-PCR檢測DFCs成骨基因表達。采用Transwell小室（12孔板規(guī)格）構(gòu)建共培養(yǎng)模型，，每組6個復孔，共培養(yǎng)10天對DFCs成骨基因OCN、COL-I、BSP、Runx2進行基因檢測，并計算其相對表達量。 結(jié)果： 1.成功制取、鑒定大鼠DFCs、BMSCs。 2.DFCs增殖活力檢測結(jié)果：與對照組相比，與BMSCs共培養(yǎng)后第1天，DFCs增殖活力未見明顯變化，第3天DFCs增殖活力開始增強；第5天、7天共培養(yǎng)組DFCs增殖活力單獨培養(yǎng)組DFC（sP0.05）。 3.DFCs ALP活性檢測結(jié)果：共培養(yǎng)第7天、14天，共培養(yǎng)組DFCsALP活性均單獨培養(yǎng)組DFCs（P0.05）。 4.FQ-PCR檢測DFCs成骨基因表達：與BMSCs共培養(yǎng)10天，共培養(yǎng)組OCN、COL-I、BSP、Runx2基因相對表達量均對照組（P0.05）。 結(jié)論： 與BMSCs共培養(yǎng)可以增強DFCs增殖活力、ALP活性，及上調(diào)成骨基因OCN、COL-I、BSP、Runx2表達。DFCs、BMSCs復合培養(yǎng)在牙周組織缺損修復再生研究中具有潛在的應用價值。
【關(guān)鍵詞】：骨髓間充質(zhì)干細胞 牙囊細胞 共培養(yǎng) 細胞增殖 成骨分化
【學位授予單位】：重慶醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2014
【分類號】：R329
【目錄】：

• 英漢縮略語名詞對照6-8
• 摘要8-10
• ABSTRACT10-13
• 前言13-16
• 第一部分 大鼠 DFCs 和 BMSCs 的分離、培養(yǎng)及鑒定16-28
• 第一節(jié) 大鼠 DFCs 的分離、培養(yǎng)及鑒定16-23
• 1 材料和方法16-19
• 2 結(jié)果19-21
• 3 討論21-22
• 4 小結(jié)22-23
• 第二節(jié) 大鼠 BMSCs 分離、培養(yǎng)及鑒定23-28
• 1 材料和方法23-25
• 2 結(jié)果25-27
• 3 討論27
• 4 小結(jié)27-28
• 第二部分 體外共培養(yǎng)大鼠 BMSCs 對 DFCs 增殖活力的影響28-32
• 1 材料與方法28-30
• 2 結(jié)果30
• 3 討論30-31
• 4 小結(jié)31-32
• 第三部分 體外共培養(yǎng) BMSCs 對 DFCs 成骨分化的影響32-42
• 第一節(jié) 體外共培養(yǎng)大鼠 BMSCs 對 DFCsALP 活性的影響33-35
• 1 材料與方法33-34
• 2 結(jié)果34
• 3 討論34-35
• 4 小結(jié)35
• 第二節(jié) 體外共培養(yǎng)大鼠 BMSCs 對 DFCs 成骨基因表達的影響35-42
• 1 材料與方法35-39
• 2 結(jié)果39-40
• 3 討論40-41
• 4 小結(jié)41-42
• 全文總結(jié)42-43
• 參考文獻43-49
• 文獻綜述49-57
• 參考文獻53-57
• 致謝57-58
• 攻讀碩士學位期間發(fā)表的論文58-59

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前7條

1 葉國;董偉;陳宇;吳亞菲;;牙囊細胞在牙周組織工程中的應用前景[J];國際口腔醫(yī)學雜志;2006年06期

2 凌均h

本文編號：573306