本文關(guān)鍵詞：重組人鼠嵌合抗CD20單克隆抗體免疫原性檢測方法的建立

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【摘要】：目的:建立一種靈敏、特異、操作簡單的ELISA方法,用于檢測食蟹猴血清中抗CD20單克隆抗體的免疫原性。方法:首先采用橋連ELISA法對抗藥物抗體(ADA)進(jìn)行定性篩選,以抗CD20單克隆抗體作為包被抗體,以生物素標(biāo)記的抗CD20單克隆抗體作為檢測抗體,二者共同結(jié)合血清中存在的ADA,以D450/560nm值超過臨界值作為陽性判斷標(biāo)準(zhǔn);初篩為陽性的樣本采用免疫清除法進(jìn)一步確證,并同時(shí)進(jìn)行免疫交叉試驗(yàn)考察ADA對供試品和原研對照品的免疫反應(yīng)有無差異。結(jié)果:建立了檢測ADA的篩選方法和確證方法,確定了檢測的臨界值和歸一化因子,血清中抗藥物抗體的檢測靈敏度達(dá)3.5 ng/m L,批內(nèi)/批間精密度介于3.1%~7.4%,準(zhǔn)確度介于-1.2%~9.5%;食蟹猴連續(xù)給藥后,部分個(gè)體產(chǎn)生特異性抗體,且抗體滴度隨時(shí)間延長而增高。結(jié)論:建立的ADA篩選方法和確證方法可用于毒性試驗(yàn)的免疫原性檢測;動物給藥劑量對抗體的產(chǎn)生有較大影響,低劑量連續(xù)給藥更易誘發(fā)特異性抗體產(chǎn)生。
【作者單位】： 北京理工大學(xué)生命學(xué)院;軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院微生物流行病研究所;軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院放射醫(yī)學(xué)研究所國家蛋白質(zhì)組學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室北京蛋白質(zhì)組研究中心;
【關(guān)鍵詞】： 抗CD單克隆抗體 橋聯(lián)ELISA 免疫原性
【分類號】：R392.1
【正文快照】： 3.軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院放射醫(yī)學(xué)研究所,國家蛋白質(zhì)組學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,北京蛋白質(zhì)組研究中心,北京102206CD20是B淋巴細(xì)胞表面特異性抗原之一,在淋巴細(xì)胞分化早期表達(dá)并且能激活淋巴細(xì)胞,導(dǎo)致淋巴細(xì)胞增殖分化。CD20分子在95%以上的B細(xì)胞性非霍奇金淋巴瘤(NHL)中均有表達(dá),是治療B細(xì)胞淋

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