本文關鍵詞：表沒食子兒茶素沒食子酸酯對過氧化氫預處理的昆明小鼠1-細胞胚體外發(fā)育以及2-細胞胚內雌激素受體α分布的影響

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【摘要】：目的： 1、觀察不同濃度H_2O_2短時間處理對昆明（KM）小鼠1-細胞胚體外發(fā)育的影響。 2、觀察表沒食子兒茶素沒食子酸酯（EGCG）是否能逆轉H_2O_2預處理導致的小鼠早胚體外發(fā)育阻滯。 3、檢測EGCG培養(yǎng)后小鼠2-細胞胚中總ERα和磷酸化ERα（Ser167）分布和表達水平的變化，探討EGCG促進小鼠早胚體外發(fā)育的機制。 方法： 1、取KM小鼠1-細胞胚，置于不同終濃度H_2O_2的M16培養(yǎng)液中培養(yǎng)25min后，分別移入M16或M16+EGCG培養(yǎng)液中培養(yǎng)，觀察各組發(fā)育情況。 2、取KM小鼠1-細胞胚，分別置于M16和M16+EGCG培養(yǎng)液中，體外培養(yǎng)至2-細胞胚期（hCG后50h），用激光掃描共聚焦顯微鏡檢測胚內ERα與磷酸化ERα(Ser167)的表達和定位情況。 結果： 1、較低濃度（1μM、10μM）H_2O_2處理1-細胞胚25min可以促進KM小鼠早胚體外發(fā)育；較高濃度（20μM、40μM）H_2O_2抑制早胚體外發(fā)育。 2、用10μg/mL EGCG可以逆轉由20μM H_2O_2預處理導致的早胚發(fā)育阻滯，使4-細胞和桑葚胚發(fā)育率恢復空白對照水平，但無法提高囊胚發(fā)育率。 3、激光掃描共聚焦顯微鏡觀察顯示，10μg/mL EGCG培養(yǎng)KM小鼠2-細胞胚的胞質中磷酸化ERα (Ser167)水平升高。 結論： 在小鼠早胚1-細胞和2-細胞階段維持適宜濃度的氧自由基可能具有重要意義。高濃度的氧自由基可對早胚發(fā)育產生不可逆的傷害，較低濃度的氧自由基可以提高早胚發(fā)育率。適宜濃度的EGCG可逆轉高濃度H_2O_2引起的早胚發(fā)育阻滯，但無法提高囊胚發(fā)育率。所以推測EGCG可能是通過清除氧自由基維持正常的卵裂，，但是不能恢復由H_2O_2預處理引起的囊胚形成障礙。EGCG作用導致小鼠2-細胞胚磷酸化ERα(Ser167)水平升高，但是總ERα含量及定位不變，提示EGCG促進小鼠早胚體外發(fā)育的機制可能是通過對ERα轉錄后修飾途徑，而不引起ERα蛋白表達水平的改變。
【關鍵詞】：表沒食子兒茶素沒食子酸酯 過氧化氫 雌激素受體α 植入前胚 體外培養(yǎng)
【學位授予單位】：福建醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2013
【分類號】：R329
【目錄】：

• 英文縮略詞4-5
• 中文摘要5-7
• Abstract7-9
• 第一部分9-19
• 材料和方法9-12
• 結果12-17
• 討論17-19
• 第二部分19-28
• 材料和方法20-23
• 結果23-27
• 討論27-28
• 小結28-29
• 參考文獻29-32
• 致謝32-33
• 綜述33-39
• 參考文獻37-39

【參考文獻】

中國期刊全文數據庫 前1條

1 陳安安;汪炬;;腫瘤中雌激素信號轉導通路的研究進展[J];中國病理生理雜志;2012年03期

本文編號：532968