表沒(méi)食子兒茶素沒(méi)食子酸酯對(duì)過(guò)氧化氫預(yù)處理的昆明小鼠1-細(xì)胞胚體外發(fā)育以及2-細(xì)胞胚內(nèi)雌激素受體α分布的影響
發(fā)布時(shí)間:2017-07-08 04:10
本文關(guān)鍵詞:表沒(méi)食子兒茶素沒(méi)食子酸酯對(duì)過(guò)氧化氫預(yù)處理的昆明小鼠1-細(xì)胞胚體外發(fā)育以及2-細(xì)胞胚內(nèi)雌激素受體α分布的影響
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【摘要】:目的: 1、觀察不同濃度H_2O_2短時(shí)間處理對(duì)昆明(KM)小鼠1-細(xì)胞胚體外發(fā)育的影響。 2、觀察表沒(méi)食子兒茶素沒(méi)食子酸酯(EGCG)是否能逆轉(zhuǎn)H_2O_2預(yù)處理導(dǎo)致的小鼠早胚體外發(fā)育阻滯。 3、檢測(cè)EGCG培養(yǎng)后小鼠2-細(xì)胞胚中總ERα和磷酸化ERα(Ser167)分布和表達(dá)水平的變化,探討EGCG促進(jìn)小鼠早胚體外發(fā)育的機(jī)制。 方法: 1、取KM小鼠1-細(xì)胞胚,置于不同終濃度H_2O_2的M16培養(yǎng)液中培養(yǎng)25min后,分別移入M16或M16+EGCG培養(yǎng)液中培養(yǎng),觀察各組發(fā)育情況。 2、取KM小鼠1-細(xì)胞胚,分別置于M16和M16+EGCG培養(yǎng)液中,體外培養(yǎng)至2-細(xì)胞胚期(hCG后50h),用激光掃描共聚焦顯微鏡檢測(cè)胚內(nèi)ERα與磷酸化ERα(Ser167)的表達(dá)和定位情況。 結(jié)果: 1、較低濃度(1μM、10μM)H_2O_2處理1-細(xì)胞胚25min可以促進(jìn)KM小鼠早胚體外發(fā)育;較高濃度(20μM、40μM)H_2O_2抑制早胚體外發(fā)育。 2、用10μg/mL EGCG可以逆轉(zhuǎn)由20μM H_2O_2預(yù)處理導(dǎo)致的早胚發(fā)育阻滯,使4-細(xì)胞和桑葚胚發(fā)育率恢復(fù)空白對(duì)照水平,但無(wú)法提高囊胚發(fā)育率。 3、激光掃描共聚焦顯微鏡觀察顯示,10μg/mL EGCG培養(yǎng)KM小鼠2-細(xì)胞胚的胞質(zhì)中磷酸化ERα (Ser167)水平升高。 結(jié)論: 在小鼠早胚1-細(xì)胞和2-細(xì)胞階段維持適宜濃度的氧自由基可能具有重要意義。高濃度的氧自由基可對(duì)早胚發(fā)育產(chǎn)生不可逆的傷害,較低濃度的氧自由基可以提高早胚發(fā)育率。適宜濃度的EGCG可逆轉(zhuǎn)高濃度H_2O_2引起的早胚發(fā)育阻滯,但無(wú)法提高囊胚發(fā)育率。所以推測(cè)EGCG可能是通過(guò)清除氧自由基維持正常的卵裂,,但是不能恢復(fù)由H_2O_2預(yù)處理引起的囊胚形成障礙。EGCG作用導(dǎo)致小鼠2-細(xì)胞胚磷酸化ERα(Ser167)水平升高,但是總ERα含量及定位不變,提示EGCG促進(jìn)小鼠早胚體外發(fā)育的機(jī)制可能是通過(guò)對(duì)ERα轉(zhuǎn)錄后修飾途徑,而不引起ERα蛋白表達(dá)水平的改變。
【關(guān)鍵詞】:表沒(méi)食子兒茶素沒(méi)食子酸酯 過(guò)氧化氫 雌激素受體α 植入前胚 體外培養(yǎng)
【學(xué)位授予單位】:福建醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2013
【分類號(hào)】:R329
【目錄】:
- 英文縮略詞4-5
- 中文摘要5-7
- Abstract7-9
- 第一部分9-19
- 材料和方法9-12
- 結(jié)果12-17
- 討論17-19
- 第二部分19-28
- 材料和方法20-23
- 結(jié)果23-27
- 討論27-28
- 小結(jié)28-29
- 參考文獻(xiàn)29-32
- 致謝32-33
- 綜述33-39
- 參考文獻(xiàn)37-39
【參考文獻(xiàn)】
中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條
1 陳安安;汪炬;;腫瘤中雌激素信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的研究進(jìn)展[J];中國(guó)病理生理雜志;2012年03期
本文編號(hào):532968
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