本文關(guān)鍵詞：骨髓源性血管內(nèi)皮祖細(xì)胞體外分離、培養(yǎng)及分化為內(nèi)皮細(xì)胞的研究

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【摘要】：目的探討骨髓源性血管內(nèi)皮祖細(xì)胞(EPCs)在體外分離、培養(yǎng)、誘導(dǎo)分化及鑒定的方法。方法抽取SD大鼠的骨髓細(xì)胞,離心法提取骨髓液中單個(gè)核細(xì)胞,用含有血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)、堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(b FGF)、表皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(EGF)的培養(yǎng)液誘導(dǎo)培養(yǎng)EPCs,觀察并記錄EPCs的生長(zhǎng)分化過(guò)程;對(duì)培養(yǎng)后的細(xì)胞進(jìn)行免疫熒光染色,鑒定細(xì)胞表面標(biāo)志物,同時(shí),RT-PCR法檢測(cè)EPCs特異性分子標(biāo)志物。結(jié)果培養(yǎng)24 h后細(xì)胞開始貼壁,4 d后細(xì)胞呈集落樣生長(zhǎng),細(xì)胞從集落中央向外周生長(zhǎng),至培養(yǎng)的第7天成片生長(zhǎng)的細(xì)胞集落相互連接,10 d后細(xì)胞形態(tài)明顯改變,呈現(xiàn)典型的"鵝卵石樣"外觀。貼壁細(xì)胞免疫熒光檢測(cè)顯示CD34、CD133、VEGFR-2、FGFR1均陽(yáng)性,經(jīng)RT-PCR法檢測(cè),EPCs表達(dá)的特異性分子標(biāo)志物均為陽(yáng)性。結(jié)論以梯度離心法獲得骨髓單個(gè)核細(xì)胞經(jīng)培養(yǎng)后,可擴(kuò)增出具有典型特征的EPCs,呈貼壁增殖狀態(tài)且具有分化能力,經(jīng)體外誘導(dǎo)可分化為成熟的血管內(nèi)皮細(xì)胞。
【作者單位】： 河北省邯鄲市中心醫(yī)院;
【關(guān)鍵詞】： 骨髓 內(nèi)皮祖細(xì)胞 細(xì)胞分離 誘導(dǎo) 血管內(nèi)皮細(xì)胞
【分類號(hào)】：R329.2
【正文快照】： 血管內(nèi)皮祖細(xì)胞(endothelial progenitor cells,EPCs)是具有增殖、擴(kuò)增并分化為成熟血管內(nèi)皮細(xì)胞的一類多潛能細(xì)胞。近年來(lái),EPCs在血管內(nèi)皮功能受損和缺血梗阻性疾病中的治療作用受到越來(lái)越多專家學(xué)者的重視,其相關(guān)的基礎(chǔ)研究亦受到廣泛關(guān)注。目前EPCs主要從骨髓、臍帶血及外

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本文編號(hào)：519285