本文關(guān)鍵詞：人白細胞介素7在CHO細胞中的表達及活性鑒定

  更多相關(guān)文章： 人白細胞介素- CHO細胞 外周血單核細胞

【摘要】：目的:用CHO細胞表達人白細胞介素7(IL-7),并驗證其促細胞增殖功能。方法:構(gòu)建表達質(zhì)粒pc DNA5/FRT-IL-7,用Lipo2000將輔助質(zhì)粒p OG44和表達質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染Flp-In-CHO細胞,潮霉素B篩選并單克隆化穩(wěn)定表達目的蛋白的細胞;通過Western印跡、ELISA方法驗證上清中的目的蛋白,并對其定量;用流式細胞儀檢測該蛋白促外周血單核細胞增殖的能力。結(jié)果:獲得了2株穩(wěn)定表達IL-7的細胞,IL-7的表達量均為3 mg/(L·d);流式細胞術(shù)檢測表明,所表達的IL-7的促外周血單核細胞增殖能力強于RD原核系統(tǒng)表達的IL-7。結(jié)論:獲得了穩(wěn)定表達人IL-7的CHO細胞系,且表達的蛋白具有促外周血單核細胞增殖的功能。
【作者單位】： 中國疾病預(yù)防控制中心病毒病預(yù)防控制所;
【關(guān)鍵詞】： 人白細胞介素- CHO細胞 外周血單核細胞
【基金】：國家科技重大專項(2014ZX10004002-004-001)
【分類號】：R392
【正文快照】： 白細胞介素(interleukins,IL)是指在白細胞或免疫細胞間相互作用的淋巴因子,具有重要的免疫調(diào)節(jié)作用。白細胞介素7(IL-7)是由腸道上皮細胞,淋巴結(jié)的濾泡樹突狀細胞和網(wǎng)狀纖維細胞,脾、骨髓和胸腺等基質(zhì)細胞產(chǎn)生的一種多功能細胞因子[1-2]。IL-7通過CD127和CD132受體復(fù)合物激活

【共引文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前9條

1 黃妙容;陽建輝;劉德武;黃曉靈;蔡更元;吳珍芳;;黑曲霉β-葡萄糖苷酶基因(bgl1)的克隆及其在中國倉鼠卵巢(CHO)細胞中的表達[J];農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學報;2012年12期

2 劉穎慰;周祥山;劉海峰;宋志偉;張元興;;胞外唾液酸酶造成工程中國倉鼠卵巢細胞株所產(chǎn)人源重組促紅素唾液酸含量降低[J];生物工程學報;2012年12期

3 陳麗娟;張麗華;李杰;陳永新;;小分子抗體制備技術(shù)及臨床應(yīng)用進展[J];實用醫(yī)藥雜志;2014年03期

4 黃曉平;王曉;楊春雪;賈東方;林俊生;刁勇;;長效人促卵泡激素CHO細胞株的構(gòu)建及其體內(nèi)活性[J];生物工程學報;2014年06期

5 陶維紅;秦民民;張哲如;;CHO細胞株開發(fā)技術(shù)策略探討[J];生物技術(shù)進展;2014年06期

6 范任華;向延根;楊勵;劉艷科;陳平圣;尹柯;許憶新;封文軍;傅滿姣;吳佳玲;;CD4~+CD25~+CD127~(low)調(diào)節(jié)性T細胞和CD3~-CD56~+CD69~+NK細胞在肺結(jié)核患者中的意義[J];現(xiàn)代醫(yī)學;2015年06期

7 何太平;唐菁燕;宋春雷;聶艷桃;雷韜;楊波;;抗調(diào)亡基因bcl-xl過表達提高工程細胞IVCC及目的蛋白表達的研究[J];中國細胞生物學學報;2012年07期

8 劉娜;袁寶珠;;利用細胞工程技術(shù)改造重組蛋白生產(chǎn)用CHO細胞的研究進展[J];中國醫(yī)藥生物技術(shù);2014年05期

9 張兵兵;侯汝濤;李磊;張瑩;潘長江;;miRNA-20a作為CHO-K1細胞抗凋亡調(diào)控靶標的研究[J];中國科技論文;2015年06期

中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 劉穎慰;CHO細胞生產(chǎn)rhEPO的N-糖基化形態(tài)及影響因素的研究[D];華東理工大學;2012年

2 付托;過表達人TIGAR的CHO細胞株構(gòu)建及其抗凋亡機制研究[D];蘇州大學;2013年

3 徐洪記;MGF遺傳重構(gòu)CHO細胞提高應(yīng)激耐受力的研究[D];重慶大學;2014年

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 李明才,何韶衡;白細胞介素-28和白細胞介素-29的研究進展[J];醫(yī)學研究生學報;2004年07期

2 齊法蓮,徐軍,杜秀敏;白細胞介素-18與臨床疾病關(guān)系的研究(文獻綜述)[J];放射免疫學雜志;2005年05期

3 馬立民;段明科;;白細胞介素-10與肺缺血-再灌注損傷[J];汕頭大學醫(yī)學院學報;2005年04期

4 張麗霞;趙瑞芹;李貴霞;徐曉紅;;中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染患兒腦脊液中白細胞介素6的變化[J];臨床薈萃;2006年04期

5 黃俊瓊;孫萬邦;楊吉成;;人白細胞介素31基因克隆及在大腸桿菌中的表達[J];遵義醫(yī)學院學報;2006年02期

6 白曉誼;劉美霞;米杰;;急性冠狀動脈綜合征患者妊娠相關(guān)血漿蛋白A和白細胞介素6的變化[J];河北醫(yī)藥;2006年12期

7 井申榮;鄒全明;;白細胞介素10的研究進展[J];免疫學雜志;2006年S1期

8 唐園園;龍明智;陳磊磊;;白細胞介素-18與急性冠狀動脈綜合征的相關(guān)性研究[J];國際內(nèi)科學雜志;2007年06期

9 陳英;高巖;;白細胞介素在小兒原發(fā)性腎病綜合征發(fā)病機制中作用的研究現(xiàn)狀[J];醫(yī)學綜述;2008年06期

10 郭靜;唐仁泉;于霄;孫雷;;白細胞介素18在急性冠狀動脈綜合征的研究進展[J];醫(yī)學綜述;2008年17期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 姜曉君;魏海明;孫lm;田志剛;;白細胞介素2保護刀豆蛋白A誘導(dǎo)的肝損傷[A];第六屆全國免疫學學術(shù)大會論文集[C];2008年

2 劉玉春;林士軍;葉建華;劉美描;陳雄;張靜;;白細胞介素2、可溶性白細胞介素2受體在慢性阻塞性肺疾病表達的研究[A];中華醫(yī)學會呼吸病學年會——2013第十四次全國呼吸病學學術(shù)會議論文匯編[C];2013年

3 曹艷華;張蕊;余奕;張威;祝成亮;王青;宋煜;白蘭;劉映樂;鄔開朗;吳建國;;由白細胞介素-29介導(dǎo)的白細胞介素-27抑制乙型肝炎病毒復(fù)制機制的研究[A];2013年湖北省暨武漢微生物學會會員代表大會暨學術(shù)年會論文摘要集[C];2013年

4 張曉光;惠延年;韓泉洪;馬吉獻;;培養(yǎng)人視網(wǎng)膜色素上皮細胞受附加磁場作用后單核細胞趨化蛋白-1和白細胞介素-8的表達[A];中國眼底病論壇·全國眼底病專題學術(shù)研討會論文匯編[C];2008年

5 曹艷華;吳建國;;由白細胞介素-29介導(dǎo)的白細胞介素-27抑制乙型肝炎病毒復(fù)制機制的研究[A];2012年鄂粵微生物學學術(shù)年會——湖北省暨武漢微生物學會成立六十年慶祝大會論文集[C];2012年

6 鄭夢凝;張湘燕;葉賢偉;余紅;李翠;;四種白細胞介素與阻塞性睡眠呼吸暫停低通氣綜合征[A];中華醫(yī)學會呼吸病學年會——2013第十四次全國呼吸病學學術(shù)會議論文匯編[C];2013年

7 李素，

本文編號：519356