本文關(guān)鍵詞：Kiss-1受體Gpr54對(duì)T細(xì)胞發(fā)育的調(diào)節(jié)作用及其對(duì)免疫功能的影響

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【摘要】：Gpr54及其配體Kiss1在機(jī)體中行使多種功能,已經(jīng)被報(bào)道參與調(diào)控癌癥、激素、能量代謝等。Gpr54/Kiss1在正常生理情況下能調(diào)節(jié)哺乳動(dòng)物中促性腺激素釋放激素(GnRH)、黃體生成素(LH)、卵泡刺激素(FSH)等的分泌,促進(jìn)青春期的正常啟動(dòng)。眾所周知,胸腺發(fā)育與激素和青春期發(fā)育相關(guān),所以我們對(duì)Gpr54是否參與調(diào)節(jié)胸腺的發(fā)育進(jìn)行研究。本課題主要利用Gpr54基因敲除小鼠,研究Gpr54/Kiss1信號(hào)對(duì)胸腺T細(xì)胞發(fā)育的影響,尤其是研究Gpr54/Kiss1信號(hào)是否能直接調(diào)控T細(xì)胞的分化成熟。我們發(fā)現(xiàn),Gpr54基因敲除小鼠的胸腺明顯增大,其組織結(jié)構(gòu)異于野生型小鼠,皮質(zhì)變薄。另外在實(shí)驗(yàn)性自身免疫性腦脊髓炎(EAE)模型中,GPR54基因敲除小鼠表現(xiàn)出更加嚴(yán)重的臨床病癥,說(shuō)明對(duì)自身免疫性疾病的易感性增加。為盡量降低性激素的影響,探討Gpr54對(duì)T細(xì)胞發(fā)育不依賴(lài)于經(jīng)典激素的調(diào)控作用,我們進(jìn)一步以青春期前小鼠及去勢(shì)小鼠為研究對(duì)象進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。青春期前的Gpr54基因敲除小鼠的胸腺?zèng)]有顯示有顯著性增大,但胸腺細(xì)胞發(fā)育也受到了影響。通過(guò)對(duì)胸腺細(xì)胞進(jìn)行流式細(xì)胞分析,發(fā)現(xiàn)從CD4-CD8-雙陰性到CD4+或CD8+單陽(yáng)性階段都出現(xiàn)了明顯的異常。另外發(fā)現(xiàn)Gpr54基因敲除小鼠的Treg細(xì)胞比例顯著下降,這種功能性T細(xì)胞的比例改變顯然影響到了小鼠的免疫功能。在去勢(shì)小鼠的EAE實(shí)驗(yàn)中Gpr54基因敲除小鼠表現(xiàn)出更加嚴(yán)重的臨床病癥。另外,在研究T細(xì)胞的體外增殖與分化時(shí),還發(fā)現(xiàn)Gpr54缺陷會(huì)影響T細(xì)胞在多種情況下的增殖能力,同時(shí)Gpr54基因敲除小鼠的Thl細(xì)胞比例升高,向此方向分化的趨勢(shì)明顯。綜上所述,Gpr54對(duì)胸腺T細(xì)胞發(fā)育成熟有直接調(diào)控作用,并能影響T細(xì)胞亞群的平衡。Gpr54缺陷加重EAE模型小鼠病癥,且使T細(xì)胞增殖能力受損。
【關(guān)鍵詞】：Gpr54 T細(xì)胞發(fā)育 Treg細(xì)胞 EAE 細(xì)胞增殖
【學(xué)位授予單位】：華東師范大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類(lèi)號(hào)】：R392
【目錄】：

• 摘要6-7
• ABSTRACT7-12
• 第一章 引言12-20
• 1.1 胸腺與T細(xì)胞發(fā)育12
• 1.2 胸腺發(fā)育相關(guān)的基因12-16
• 1.3 CD_4~+T淋巴細(xì)胞亞群與自身免疫性疾病16-18
• 1.4 Gpr54/Kiss1簡(jiǎn)介18-20
• 第二章 材料與方法20-42
• 2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物20
• 2.2 主要試劑與試劑盒20-22
• 2.3 實(shí)驗(yàn)儀器22-23
• 2.4 實(shí)驗(yàn)耗材23
• 2.5 常用試劑配制23-24
• 2.6 小鼠基因型鑒定24-26
• 2.7 EAE模型的建立與臨床評(píng)分26-28
• 2.8 小鼠的去勢(shì)手術(shù)28-29
• 2.9 CD4+細(xì)胞的分離純化29-30
• 2.10 組織化學(xué)染色30-33
• 2.11 細(xì)胞的流式分析33-34
• 2.12 細(xì)胞因子mRNA檢測(cè)34-39
• 2.13 T細(xì)胞的體外分化實(shí)驗(yàn)39-40
• 2.14 淋巴細(xì)胞的體外增殖實(shí)驗(yàn)40-41
• 2.15 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析41-42
• 第三章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果42-60
• 3.1 Gpr54敲除小鼠的胸腺發(fā)育及免疫狀況發(fā)生顯著變化42-45
• 3.1.1 Gpr54對(duì)胸腺大小的影響42-43
• 3.1.2 Gpr54對(duì)胸腺細(xì)胞數(shù)量的影響43-44
• 3.1.3 Gpr54敲除小鼠的胸腺皮質(zhì)明顯變薄44
• 3.1.4 Gpr54對(duì)EAE發(fā)病狀況的影響44-45
• 3.2 GPR54在胸腺上的表達(dá)情況45-48
• 3.2.1 Gpr54在胸腺及純化的T細(xì)胞上有明顯的表達(dá)45-46
• 3.2.2 Gpr54在胸腺上皮細(xì)胞與淋巴細(xì)胞上的表達(dá)46-48
• 3.3 Gpr54對(duì)青春期前小鼠淋巴器官及T細(xì)胞發(fā)育的影響48-52
• 3.3.1 Gpr54對(duì)青春期前小鼠淋巴器官的影響48-49
• 3.3.2 Gpr54缺失導(dǎo)致淋巴細(xì)胞增殖缺陷49-50
• 3.3.3 Gpr54對(duì)免疫器官淋巴細(xì)胞的亞群構(gòu)成的影響50-51
• 3.3.4 Gpr54對(duì)Treg細(xì)胞比例的影響51-52
• 3.4 Gpr54敲除小鼠EAE的發(fā)病癥狀及炎性細(xì)胞因子的表達(dá)52-55
• 3.4.1 去勢(shì)后Gpr54對(duì)小鼠EAE發(fā)病狀況的影響52-53
• 3.4.2 Gpr54對(duì)EAE小鼠Treg細(xì)胞比例的影響53-54
• 3.4.3 EAE小鼠炎性細(xì)胞因子的表達(dá)差異54-55
• 3.5 去勢(shì)后Gpr54對(duì)小鼠淋巴器官及T細(xì)胞增殖的影響55-57
• 3.5.1 Gpr54影響EAE小鼠脾臟細(xì)胞數(shù)量55-56
• 3.5.2 Gpr54缺失導(dǎo)致淋巴細(xì)胞特異性增殖缺陷56-57
• 3.6 Gpr54在T細(xì)胞分化中的影響57-58
• 3.7 Gpr54可能調(diào)節(jié)的T細(xì)胞發(fā)育相關(guān)基因的初步篩查58-60
• 第四章 討論60-64
• 4.1 Gpr54對(duì)T細(xì)胞發(fā)育有直接影響60-61
• 4.2 Gpr54的調(diào)控機(jī)理淺析61-62
• 4.3 Gpr54缺失對(duì)EAE疾病模型的影響62-64
• 第五章 全文總結(jié)64-66
• 參考文獻(xiàn)66-73
• 附錄1 英文縮寫(xiě)對(duì)照表73-75
• 附錄2 學(xué)術(shù)論文及科研項(xiàng)目75-76
• 致謝76-77

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 杜占文,張昕,張俊武;一個(gè)可能與T細(xì)胞發(fā)育相關(guān)的新的C2H2型鋅指蛋白基因的克隆(英文)[J];生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展;2004年07期

2 ;[J];;年期

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 劉方;Kiss-1受體Gpr54對(duì)T細(xì)胞發(fā)育的調(diào)節(jié)作用及其對(duì)免疫功能的影響[D];華東師范大學(xué);2014年

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本文編號(hào)：512213