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酶解法清除豬皮α-Gal抗原的研究

發(fā)布時間:2017-07-02 02:02

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【摘要】:目的利用脆弱擬桿菌來源的基因重組α-半乳糖苷酶清除豬皮細胞及基質(zhì)的異種抗原(α-Gal抗原),降低豬皮基質(zhì)敷料的免疫原性。方法 2月齡健康無皮膚疾患的豬皮皮片,經(jīng)剖層裁切成不同的規(guī)格后,分別經(jīng)碘酊和75%乙醇溶液浸泡消毒,隨后用PBS清洗后進行酶解條件的摸索;采用免疫熒光法檢測豬皮的α-Gal抗原,雙抗夾心ELISA法檢測殘留酶,通過對酶解豬皮的殘留酶和α-Gal抗原的檢測進而優(yōu)化、改進酶解條件和洗滌條件,以確立最佳酶解工藝。結(jié)果建立了有效的酶解方法和洗滌方法,酶解后豬皮的α-Gal抗原清除率90%,殘留酶不能檢出(間接ELISA法檢測微量α-半乳糖苷酶的下限為1 ng/ml)。結(jié)論所建立的酶解工藝和洗滌工藝可有效清除豬皮細胞及基質(zhì)的α-Gal抗原,建立了制備低免疫原性豬皮敷料的方法。
【作者單位】: 軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院野戰(zhàn)輸血研究所;
【關(guān)鍵詞】豬皮 免疫原性 α-半乳糖苷酶 α-Gal抗原 殘留酶
【基金】:國家科技重大專項資助項目(2013ZX09J13110B)
【分類號】:R392.4
【正文快照】: 創(chuàng)面修復(fù)是燒(創(chuàng))傷領(lǐng)域一個永恒的主題,人們在創(chuàng)面修復(fù)方面進行了不懈的研究與探索。用于創(chuàng)面修復(fù)材料除自體皮以外,其他種類還包括異體皮、異種皮以及人工合成敷料。雖然異體皮和人工合成敷料在臨床應(yīng)用中能達到良好的修復(fù)效果,但其來源有限,價格昂貴,因此異種(豬)皮成為臨

【參考文獻】

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