發(fā)布時間：2017-07-02 01:00

  本文關鍵詞：丙型肝炎病毒多表位基因載體的構建與表達，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的構建編碼多個丙型肝炎病毒(HCV)抗原表位的真核表達載體,建立穩(wěn)定轉染的細胞株,并利用小鼠移植瘤模型初步評估疫苗在動物體內的免疫反應狀況。方法合成含10條CTL細胞表位的M2基因,與含多條B細胞及T細胞表位的M1基因連接合成M1M2基因;將M2、M1M2基因分別與pcDNA3.1(+)連接,構建真核表達載體pcDNA3.1(+)/M2及pcDNA3.1(+)/M1M2;將上述兩種載體與pcDNA3.1(+)/M1分別轉入SP2/0細胞中,并檢測目的蛋白表達;用3種重組質粒分別免疫BALB/c小鼠移植瘤模型,初步評估疫苗引起的免疫反應。結果 3種真核表達載體在SP2/0細胞中均能得到穩(wěn)定表達,免疫荷瘤小鼠后,小鼠瘤體的大小M1M2組M2組M1組空質粒對照組,實驗組均能觀察到腫瘤組織的壞死現(xiàn)象。結論成功構建了HCV多表位基因的真核表達載體pcDNA3.1(+)/M1M2,用該表達載體免疫小鼠可引起較強的特異性免疫應答。
【作者單位】： 四川大學基礎醫(yī)學與法醫(yī)學院微生物學教研室;
【關鍵詞】： 丙型肝炎病毒 多表位基因 核酸疫苗
【基金】：四川大學實驗技術立項資助課題(No.0083304116008)
【分類號】：R392;R373.2
【正文快照】： 丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)感染是慢性肝病的最主要病因之一。我國是丙肝的高發(fā)區(qū),一般人群感染率平均為3.2%[1-3]。HCV感染較其他類型肝炎病毒感染的危害性大,感染早期難以產生有效的抗病毒免疫,肝炎易慢性化,與肝硬化、肝癌的發(fā)生關系密切。HCV感染的標準治療手段

【參考文獻】

中國期刊全文數據庫 前3條

1 吳迪;寧琴;;2014年慢性病毒性肝炎臨床診療進展[J];實用肝臟病雜志;2015年01期

2 ;Construction and characterization of an HCV-derived multi-epitope peptide antigen containing B-cell HVR1 mimotopes and T-cell conserved epitopes[J];Science in China(Series C:Life Sciences);2006年05期

3 戚中田;;丙型肝炎疫苗研究現(xiàn)狀與方向[J];內科理論與實踐;2007年04期

【共引文獻】

中國期刊全文數據庫 前10條

1 陶靜;葉紅;;新城疫F蛋白基因工程疫苗的研究現(xiàn)狀[J];安徽農業(yè)科學;2011年17期

2 楊苗;趙平;邊中啟;任艷麗;龔育平;戚中田;;丙型肝炎病毒高變區(qū)1模擬表位的交叉反應性分析[J];病毒學報;2008年04期

3 楊小潔;張磊亮;;脂滴在丙肝病毒生命周期中的作用[J];病毒學報;2014年01期

4 谷婭楠;孫芹敏;姚冰潔;李士軍;王貞;;丙型肝炎病毒抗體及核酸測定的診斷效能分析[J];國際檢驗醫(yī)學雜志;2014年18期

5 陸冰云;李婷婷;;丙型肝炎病毒相關正向和負向T細胞免疫應答的研究進展[J];廣東醫(yī)學;2014年20期

6 夏白娟;李一欣;洪艷;韓晶;梁文妹;;不同時程海洛因依賴大鼠胃竇CD4、CD8和IL-2表達[J];貴陽醫(yī)學院學報;2015年03期

7 楊遠;鄺玉;袁敦;曹麗麗;王保寧;李明遠;張中偉;;CTS-Fe_3O_4介導丙型肝炎病毒多表位基因疫苗的研究[J];四川大學學報(醫(yī)學版);2011年06期

8 王文博;張緒清;陳曉玲;張夢軍;尚小云;牛薇;劉東;舒馳;王莉;吳玉章;;重慶地區(qū)慢性HBV感染與HLA-A超型相關性研究[J];免疫學雜志;2010年12期

9 趙寧;李智偉;;急性丙型肝炎的診斷及治療[J];臨床肝膽病雜志;2014年06期

10 Helal F Hetta;Minesh J Mehta;Mohamed Tarek M Shata;;Gut immune response in the presence of hepatitis C virus infection[J];World Journal of Immunology;2014年02期

中國博士學位論文全文數據庫 前10條

1 蔡維嘉;利用畢赤酵母系統(tǒng)的丙型肝炎病毒重組E1E2糖蛋白的表達、純化和性質研究[D];武漢大學;2010年

2 宋小凱;柔嫩艾美耳球蟲免疫調節(jié)型多價DNA疫苗的構建及免疫效果觀察[D];南京農業(yè)大學;2008年

3 任艷麗;HCV E2蛋白促進B淋巴細胞活化和增殖的機制及E2蛋白突變體免疫原性分析[D];第二軍醫(yī)大學;2009年

4 楊振;中國獻血員人群丙型肝炎病毒“窗口期”感染分析[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學;2009年

5 李丹;血紅蛋白β亞基對豬瘟病毒增殖的調控作用及其調節(jié)機制[D];中國農業(yè)科學院;2013年

6 李媛;慢性丙型肝炎抗病毒療效及其與NK和特異性CD8~+T細胞活性的關系[D];華中科技大學;2013年

7 關默;丙型肝炎病毒高變區(qū)1中存在介導病毒入侵和免疫逃避的三個不同結構域[D];第二軍醫(yī)大學;2013年

8 孫海波;慢丙肝抗病毒治療中依從性和療效的關系及CD24預測病毒清除的價值[D];吉林大學;2014年

9 宮曉煒;牛病毒性腹瀉病毒感染形成和復制的分子機制研究[D];中國農業(yè)科學院;2014年

10 閆舫;hESCs來源的肝系細胞構建HCV易感的細胞模型和人源化小鼠模型研究[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學科學院;2014年

中國碩士學位論文全文數據庫 前10條

1 王健;HLA-A33分子的體外表達及鑒定[D];山東農業(yè)大學;2011年

2 王文博;HBV相關抗原HLA-A3超型CTL表位的預測與鑒定[D];第三軍醫(yī)大學;2011年

3 侯磊;ALV-J分離株Hrb-1 gp85基因蛋白的單克隆抗體制備及抗原表位初步分析[D];西北農林科技大學;2009年

4 安媛;丙型肝炎病毒第一高變區(qū)嵌合抗原的純化及其在血液篩查中的應用[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學科學院;2010年

5 李向紅;利用噬菌體12肽庫篩選針對雞IBDV單抗的模擬表位[D];安徽農業(yè)大學;2012年

6 余曉杰;HCV-F蛋白的原核表達以及對Th1/Th2型細胞因子的影響[D];南京醫(yī)科大學;2013年

7 鄧文蕾;豬流行性乙型腦炎單克隆抗體的制備及對病毒蛋白EDIII表位的鑒定[D];南京農業(yè)大學;2011年

8 朱季香;HCV核心蛋白氨基酸變異與干擾素應答關系研究[D];第三軍醫(yī)大學;2013年

9 龔旭陽;1、丙型肝炎病毒核心蛋白通過自誘導方式可溶性表達及其生物學功能鑒定 2深度測序分析HBV感染中多基因型混合感染[D];重慶醫(yī)科大學;2013年

10 張玉娟;豬IFITM基因分析及過量表達細胞系構建[D];河南農業(yè)大學;2013年

【二級參考文獻】

中國期刊全文數據庫 前9條

1 畢勝利,白憲鶴,叢勉爾,田厚文,孫得貴,H.S.Margolis,劉崇柏;中國人丙型肝炎病毒基因組的一級結構及其變異[J];病毒學報;1993年02期

2 解瑩;謝晨;;丙型肝炎病毒基因分型的研究進展[J];大連醫(yī)科大學學報;2010年04期

3 ;慢性乙型肝炎防治指南(2010年版)[J];實用肝臟病雜志;2011年02期

4 李崢;高玉紅;畢勝;楊曦;張桂前;臺虹;;云南省丙型肝炎病毒基因型及3b型遺傳進化樹分析[J];國際檢驗醫(yī)學雜志;2006年11期

5 蘇英豪;;丙型肝炎病毒基因分型及其意義:近3年的研究進展[J];國外醫(yī)學(微生物學分冊);1999年01期

6 黃永建;劉劍榮;夏洪嬌;李鳳中;楊劍;;102例丙型肝炎病毒基因分型結果分析[J];檢驗醫(yī)學與臨床;2010年19期

7 張繼明,尹有寬,謝怡,盧清,張清波,鄔祥惠,翁心華;基于丙型肝炎病毒NS5B基因序列分析的基因分型[J];中國抗感染化療雜志;2003年05期

8 祁欣,賈文祥,楊春,楊遠,曾蔚,陳恬;我國西部1a型丙肝病毒結構區(qū)的cDNA克隆和序列分析[J];生物技術通訊;2004年02期

9 王志強;王怡;詹林盛;;丙型肝炎病毒感染性細胞模型的研究進展[J];生物技術通訊;2009年01期

【相似文獻】

中國期刊全文數據庫 前10條

1 張舒林,張汴娜,徐興芳;應用雙重聚合酶鏈反應檢測乙型、丙型肝炎病毒[J];中華實驗和臨床病毒學雜志;2000年03期

2 李克;丙型肝炎病毒與脂質系統(tǒng)關系的研究進展[J];國外醫(yī)學.病毒學分冊;2002年01期

3 趙丹燕;丙型肝炎病毒分型的研究進展[J];臨床肝膽病雜志;2002年05期

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本文編號：507999