發(fā)布時間：2017-06-27 22:11

  本文關(guān)鍵詞：法氏囊活性五肽BP5的抗腫瘤作用，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：【目的】法氏囊活性五肽Bursopentin(BP5)是一種多功能生物學(xué)活性因子,不僅具有免疫調(diào)節(jié)和抗氧化功能,還具有抗腫瘤活性。目前,BP5發(fā)揮抗腫瘤生物功能的作用機(jī)制尚不清晰�！痉椒ā勘狙芯坷肨7噬菌體展示技術(shù)構(gòu)建雞DT40細(xì)胞T7噬菌體c DNA文庫,以BP5-BSA為靶分子對文庫進(jìn)行親和淘選,通過序列測定和生物信息學(xué)分析,獲得BP5的結(jié)合蛋白。通過分析BP5誘導(dǎo)的雞DT40細(xì)胞mRNA基因表達(dá)譜和檢測BP5對HCT116細(xì)胞中p53 Luciferase活性和p53信號通路中相關(guān)蛋白表達(dá)的影響來探討B(tài)P5抗腫瘤的作用機(jī)制�！窘Y(jié)果】構(gòu)建的雞DT40細(xì)胞T7噬菌體c DNA文庫原始滴度為1.2×104pfu/m L,重組率為91.7%,擴(kuò)增后滴度為1.9×109pfu/m L;通過生物淘選獲得3條與BP5結(jié)合的雞源蛋白血管內(nèi)皮生長因子A(vascular endothelial growth factor A)、細(xì)胞周期蛋白E1(cyclin E1)和運輸?shù)鞍最w粒復(fù)合體2(trafficking protein particle complex 2)�；虮磉_(dá)譜分析結(jié)果顯示,BP5參與調(diào)節(jié)多條與抗腫瘤功能有關(guān)的通路,其中包括p53信號通路,且p53信號通路涉及的5個差異表達(dá)基因均與細(xì)胞周期調(diào)控或抗腫瘤相關(guān),其中SIAH1、TP53(p53)、CIP1(p21)基因被上調(diào),CHEK2、CCNE1基因被下調(diào)。RT-PCR方法檢測10個表達(dá)水平有明顯變化的差異基因,其結(jié)果與基因芯片分析結(jié)果相符;BP5對p53 Luciferase活性的影響實驗結(jié)果顯示,BP5在0.2-20μg/m L濃度下能夠明顯提高HCT116細(xì)胞中p53相對Luciferase活性,Western blotting結(jié)果證實,BP5能顯著促進(jìn)p53、p21蛋白的表達(dá)水平,而CCNE1和CHEK2蛋白的表達(dá)水平則明顯降低�！窘Y(jié)論】本研究結(jié)果表明BP5通過p53信號通路途徑發(fā)揮其抗腫瘤生物學(xué)功能,為進(jìn)一步研究BP5抗腫瘤具體的分子機(jī)制提供了參考依據(jù)。
【作者單位】： 河南科技大學(xué)獸醫(yī)腫瘤免疫學(xué)重點實驗室;南京農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)業(yè)部動物細(xì)菌學(xué)重點實驗室;
【關(guān)鍵詞】： Bursopentin(BP) 雞DT細(xì)胞 T噬菌體c DNA文庫 相互作用蛋白 p信號通路 抗腫瘤
【基金】：國家自然科學(xué)青年基金(31101792和31201928) 河南省高校青年骨干教師項目(2012GGJS-077)~~
【分類號】：R392
【正文快照】： 法氏囊(bursa of Fabricus,BF)是具有與胸腺相同地位的體液中樞器官,是禽類特有的免疫器官。禽類前體B細(xì)胞從骨髓遷移到BF,并在BF中分化、發(fā)育為成熟的B細(xì)胞,然后通過淋巴循環(huán)和血液循環(huán)遷移到外周淋巴器官參與免疫反應(yīng)[1]。已證實,BF組織中存在多種生物活性物質(zhì),囊素三肽(bur

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本文編號：491426