本文關(guān)鍵詞：微小RNA-27b過表達(dá)對(duì)殘粒脂蛋白誘導(dǎo)的小鼠內(nèi)皮祖細(xì)胞衰老的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：背景內(nèi)皮祖細(xì)胞(endothelial progenitor cells,EPCs)是血管內(nèi)皮細(xì)胞的前體細(xì)胞,有保持血管內(nèi)皮細(xì)胞完整和維持正常血管內(nèi)皮功能的作用。EPCs的衰老和數(shù)量減少與冠心病等缺血性心腦血管疾病的發(fā)生和發(fā)展密切相關(guān)。p16INK4α是調(diào)控干/祖細(xì)胞衰老的重要轉(zhuǎn)錄因子。餐后高甘油三酯血癥患者血漿中的殘粒脂蛋白(remnant-like particles, RLPs)能夠誘導(dǎo)人外周血來源的EPCs衰老,劑量依賴性地上調(diào)p16INK4α的蛋白水平。微小RNA(microRNA,miRNA/miR)是一類高度保守的、由18～22個(gè)核苷酸構(gòu)成的非編碼單鏈RNA,在轉(zhuǎn)錄后水平負(fù)向調(diào)控靶基因的表達(dá)。已知人RLPs可促進(jìn)小鼠EPCs的衰老,伴miR-27b表達(dá)顯著下調(diào)。由此推測miR-27b可能參與調(diào)控RLPs誘導(dǎo)的小鼠EPCs衰老。 目的用miR-27b模擬物(mimic)轉(zhuǎn)染小鼠骨髓來源EPCs,觀察niR-27b過表達(dá)對(duì)RLPs誘導(dǎo)的EPCs衰老過程的影響。 方法密度梯度離心法提取小鼠雙下肢骨髓單個(gè)核細(xì)胞,4天后棄去未貼壁細(xì)胞。用EBM-2完全培養(yǎng)基培養(yǎng)至第7天后,將細(xì)胞分為miR-27b過表達(dá)組和對(duì)照組,分別轉(zhuǎn)染miR-27b mimic及其對(duì)照物,24h后用0.2mg/mL的RLPs同時(shí)干預(yù)兩組細(xì)胞。24h后行衰老相關(guān)-β-半乳糖苷酶(senescense associated-β-galactosidase,SA-β-Gal)染色、分別計(jì)數(shù)兩組衰老細(xì)胞百分率；提取總RNA,測定兩組細(xì)胞中miR-27b、衰老相關(guān)基因p16INK4α的mRNA水平。 結(jié)果成功分離培養(yǎng)出小鼠骨髓源性EPCs,使miR-27b在EPCs中表達(dá)水平顯著上調(diào)37倍。miR-27b過表達(dá)組的衰老細(xì)胞百分率為29.4%,對(duì)照組為21.4%。miR-27b過表達(dá)組的衰老相關(guān)基因p16INK4α的mRNA水平低于對(duì)照組,但無統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性。 結(jié)論miR-27b過表達(dá)可能對(duì)RLPs誘導(dǎo)的小鼠骨髓源性EPCs衰老起負(fù)性調(diào)節(jié)作用,但機(jī)制還需要進(jìn)一步探討。
【關(guān)鍵詞】：miR-27b 內(nèi)皮祖細(xì)胞衰老 p16~(INK4α)
【學(xué)位授予單位】：中南大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R363
【目錄】：

• 摘要5-7
• ABSTRACT7-10
• ~.略語10-11
• 第一章 前言11-12
• 第二章 材料與方法12-25
• 2.1 材料12-14
• 2.2 方法14-25
• 第三章 結(jié)果25-29
• 3.1 小鼠EPCs體外培養(yǎng)和鑒定25-27
• 3.2 MiR-27b在EPCs中過表達(dá)27
• 3.3 MiR-27b過表達(dá)可抑制RLPs誘導(dǎo)的EPCs衰老27-28
• 3.4 MiR-27b過表達(dá)對(duì)衰老相關(guān)基因mRNA表達(dá)的影響28-29
• 第四章 討論29-33
• 第五章 結(jié)論33-34
• 參考文獻(xiàn)34-39
• 綜述39-52
• 參考文獻(xiàn)45-52
• 致謝52

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 周曉峰;王佐;;內(nèi)皮祖細(xì)胞在動(dòng)脈粥樣硬化進(jìn)程中的作用[J];中國動(dòng)脈硬化雜志;2007年12期

2 李美玲;劉鳳姣;劉玲;;小鼠骨髓源性內(nèi)皮祖細(xì)胞的分離培養(yǎng)與鑒定[J];中國動(dòng)脈硬化雜志;2011年06期

3 寇恂;曾春雨;;微小RNA在心血管疾病發(fā)生中的作用研究進(jìn)展[J];中華高血壓雜志;2011年08期

  本文關(guān)鍵詞：微小RNA-27b過表達(dá)對(duì)殘粒脂蛋白誘導(dǎo)的小鼠內(nèi)皮祖細(xì)胞衰老的影響，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：485855