devR基因調(diào)控的結(jié)核分枝桿菌細胞毒性的研究
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【摘要】:目的闡明dev R基因表達對分枝桿菌生長及感染能力的影響。方法確認野生型牛分支桿菌卡介苗(M.bovis BCG,簡稱BCG)、dev R基因敲除的BCG菌株(簡稱Δdev R)和dev R基因回補的BCG菌株(簡稱dev R.com)的dev R序列正確;在不同時間點測定600 nm下的吸光度(A)值,繪制3種細菌的生長曲線;以感染復數(shù)(MOI)=10感染人肺泡Ⅱ型上皮細胞A549(簡稱A549細胞)和小鼠巨噬細胞Raw264.7(簡稱Raw264.7細胞),分別采用流式細胞儀和酶聯(lián)免疫吸附試驗于0、24、48、72 h測定細胞凋亡率和乳酸脫氫酶(LDH)釋放水平;采用實時定量PCR(RT-PCR)測定凋亡相關(guān)基因bcl-2和bad的表達水平。結(jié)果Δdev R菌株在早期(培養(yǎng)2~10 d)生長較BCG菌株和dev R.com菌株明顯加快(P0.01)。Δdev R菌株感染A549細胞和Raw264.7細胞后,細胞的凋亡和壞死效應(yīng)明顯增加,與BCG菌株和dev R.com菌株比較差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。3種菌株感染A549細胞均導致凋亡相關(guān)基因bcl-2表達上調(diào),且Δdev R菌株感染組bcl-2基因表達明顯高于BCG和dev R.com菌株感染組;3種菌株感染Raw264.7細胞均導致凋亡相關(guān)基因bad表達上調(diào),且Δdev R菌株感染組bad基因表達明顯高于BCG和dev R.com菌株感染組。結(jié)論 dev R基因敲除的BCG菌株毒力明顯增強。
【作者單位】: 第四軍醫(yī)大學西京醫(yī)院檢驗科;
【關(guān)鍵詞】: devR基因 卡介苗 感染 凋亡 乳酸脫氫酶
【基金】:國家自然科學基金資助項目(81371857)
【分類號】:R378.911
【正文快照】: 結(jié)核病(tuberculosis,TB)是由結(jié)核分枝桿菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)感染引起的危害全球公眾健康的重要傳染性疾病。根據(jù)世界衛(wèi)生組織(World Health Organization,WHO)的最新報告,2012年全球約有860萬人患結(jié)核病,死亡人數(shù)約為130萬。在人類免疫缺陷病毒(HIV)感染人群
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本文編號:478426
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