本文關(guān)鍵詞：甘油二酯激酶γ和ζ在大鼠胚胎發(fā)育過(guò)程中的時(shí)空表達(dá)，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的： 檢測(cè)大鼠胚胎期甘油二酯激酶γ(DGKyγ)和(DGKζ)在mRNA和蛋白水平的表達(dá),探討DGKγ和DGKζ生大鼠胚胎發(fā)育過(guò)程中的時(shí)空表達(dá)規(guī)律。方法： (1)用地高辛配基標(biāo)記的DGKγ和DGKζ寡核苷酸探針,與E8.5-E12.5大鼠胚胎進(jìn)行整體原位雜交,檢測(cè)DGKγmRNA和DGKζmRNA在大鼠胚胎不同發(fā)育階段的時(shí)空表達(dá)變化； (2)應(yīng)用免疫組織化學(xué)方法觀察DGKy蛋白和DGKζ蛋白在E12.5-E18.5大鼠胚胎神經(jīng)系統(tǒng)的表達(dá)。 結(jié)果： (1)整體胚胎原位雜交(WMISH)檢測(cè)結(jié)果： WMISH檢測(cè)發(fā)現(xiàn),DGKy mRNA在E10.5胚胎的前神經(jīng)孔、頭端神經(jīng)管和后神經(jīng)孔的壁呈陽(yáng)性表達(dá)；E11.5胚胎的端腦泡、中腦泡、上頜突和前肢芽明顯呈陽(yáng)性；E12.5胚胎陽(yáng)性信號(hào)較強(qiáng),集中表達(dá)在腦泡。 DGKζ mRNA在E8.5胚盤的外胚層呈現(xiàn)陽(yáng)性,E9.5胚盤原條末端和原溝呈雜交陽(yáng)性；E10.5胚胎出現(xiàn)較強(qiáng)的陽(yáng)性信號(hào),分布在前神經(jīng)孔壁和頭端神經(jīng)管；E11.5胚胎的端腦泡、中腦泡、上頜突呈較強(qiáng)陽(yáng)性；E12.5胚胎在端腦、中腦、背根神經(jīng)節(jié)、三叉神經(jīng)節(jié)、視泡、上頜突、下頜突等處呈陽(yáng)性信號(hào)。 大鼠胚胎WMISH后冰凍切片觀察可見：DGKγ mRNA在腦泡和部分神經(jīng)管的神經(jīng)上皮呈陽(yáng)性信號(hào),DGKζ mRNA主要表達(dá)在神經(jīng)上皮的游離面,體節(jié)也可見陽(yáng)性。 (2)免疫組織化學(xué)結(jié)果： DGKyγ蛋白在E12.5大鼠胚胎的腦和脊髓的神經(jīng)上皮呈陽(yáng)性表達(dá),并且在底板的表達(dá)較強(qiáng),背根神經(jīng)節(jié)也呈陽(yáng)性表達(dá)；在E13.5和E14.5大鼠胚胎腦和脊髓的神經(jīng)上皮陽(yáng)性表達(dá)減弱,但在其底板的表達(dá)仍較強(qiáng),在背根神經(jīng)節(jié)和三叉神經(jīng)節(jié)有陽(yáng)性表達(dá)；在E15.5-18.5胚胎,DGKyγ表達(dá)在脊髓基板和灰質(zhì)的前角,在背根神經(jīng)節(jié)的表達(dá)增強(qiáng)。 DGKζ蛋白在E12.5-18.5大鼠胚胎的表達(dá)模式與DGKyγ相似,但在E18.5DGKζ的表達(dá)明顯降低,在脊髓灰質(zhì)前角和背根神經(jīng)節(jié)呈弱陽(yáng)性表達(dá)。結(jié)論： 1.DGKζmRNA在外胚層和原條有明顯表達(dá),提示DGKζ可能參與了三胚層的形成。 2. DGKγ mRNA在前后神經(jīng)孔呈強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá),而DGKζ mRNA在前神經(jīng)孔呈強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá),提示DGKy和DGKζ均參與了神經(jīng)孔的閉合。 3. DGKγ和DGKζ在腦、脊髓和背根神經(jīng)節(jié)的表達(dá)變化提示它們與神經(jīng)系統(tǒng)器官的早期發(fā)育有關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：甘油二酯激酶γ 甘油二酯激酶ξ 胚胎發(fā)育 時(shí)空表達(dá) 整體原位雜交 免疫組化 大鼠
【學(xué)位授予單位】：山西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R321
【目錄】：

• 摘要6-8
• ABSTRACT8-10
• 第一部分 E8.5 -E12.5大鼠胚胎整體原位雜交技術(shù)的建立10-19
• 前言10-11
• 材料與方法11-14
• 1. 實(shí)驗(yàn)材料11-12
• 1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物11
• 1.2 主要試劑11
• 1.3 探針設(shè)計(jì)11-12
• 2. 實(shí)驗(yàn)方法12-14
• 2.1 大鼠胚胎標(biāo)本的收集12
• 2.2 整體胚胎原位雜交12-14
• 2.3 陰性對(duì)照14
• 結(jié)果14-15
• 1. 蛋白酶K消化結(jié)果14
• 2. 寡核苷酸探針WMISH結(jié)果14-15
• 討論15-17
• 參考文獻(xiàn)17-19
• 第二部分 DGK_γ和DGKζ在大鼠胚胎發(fā)育過(guò)程中的時(shí)空表達(dá)19-29
• 前言19-20
• 材料與方法20-21
• 1. E8.5-E12.5大鼠胚胎整體原位雜交20
• 2. WMISH后冰凍切片20
• 3. 免疫組織化學(xué)染色20-21
• 3.1 石蠟切片制備20
• 3.2 SABC法檢測(cè)20-21
• 結(jié)果21-22
• 1. DGK_γmRNA和DGKζmRNA在E8.5-E12.5大鼠胚胎的表達(dá)21-22
• 2. DGK_γ和DGKζ蛋白在E12.5-E18.5大鼠胚胎的表達(dá)22
• 討論22-24
• 小結(jié)24-25
• 參考文獻(xiàn)25-29
• 附圖29-38
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表論文情況38-39
• 致謝39-40
• 個(gè)人簡(jiǎn)歷40

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 吳燕,馬子敏,劉淑紅,范文紅,范明;小鼠胚胎整體原位雜交實(shí)用技術(shù)的建立[J];解剖學(xué)報(bào);2004年04期

  本文關(guān)鍵詞：甘油二酯激酶γ和ζ在大鼠胚胎發(fā)育過(guò)程中的時(shí)空表達(dá)，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：478793