本文關鍵詞：DNA的G四鏈體抗體的制備和鑒定，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的構建DNA的G四鏈體抗體的原核表達質粒,利用BL21(DE3)菌表達此抗體,并進行純化及鑒定。方法化學合成DNA的G四鏈體抗體的基因BG4,插入以p ET-26b(+)為骨架構建的載體p SANG10中,構建DNA的G四鏈體抗體表達載體p SANG10-BG4。以大腸桿菌BL21(DE3)為宿主菌進行該抗體的自誘導表達,滲透壓裂解法收集此抗體,并經(jīng)His親和層析純化,用SDS-PAGE及Western blot法鑒定此抗體,并在SW480結腸癌細胞中驗證此抗體功能。結果 DNA的G四鏈體抗體表達載體經(jīng)雙酶切及基因測序鑒定構建成功。該抗體相對分子質量(Mr)為30 000~37 000,以可溶性的形式表達于BL21菌細胞間質,表達產(chǎn)物與目的蛋白大小一致。結論成功制備了DNA的G四鏈體抗體。
【作者單位】： 山西醫(yī)科大學生物化學與分子生物學教研室;長治醫(yī)學院生化教研室;長治醫(yī)學院附屬和濟醫(yī)院腎內科;
【關鍵詞】： G四鏈體 原核表達載體 組氨酸標簽
【分類號】：R392
【正文快照】： DNA的G四鏈體(G-quadruplex),簡稱G4是一種非經(jīng)典的DNA二級結構,是由一些富含鳥嘌呤的序列構成。生物信息學分析表明該結構廣泛存在于人類基因組中[1-3],DNA的G四鏈體結構在人類基因組中主要位于染色體末端及一些癌基因的啟動子區(qū)域,如c-myc、c-kit、k-ras、vegf等[3-6],表明D

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