本文關(guān)鍵詞：利用乙型肝炎病毒共價閉合環(huán)狀DNA構(gòu)建慢性乙型肝炎病毒感染的小鼠模型，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的通過水動力法注射乙型肝炎病毒(HBV)共價閉合環(huán)狀DNA(cccDNA)構(gòu)建C57BL/6小鼠慢性乙型肝炎病毒感染的模型。方法取29只C57BL/6小鼠,分為實驗組、對照組和空白組,應(yīng)用水動力法分別注射HBV cccDNA、pAAV-HBV1.2及等滲鹽水,于注射后收集不同時間點的血清和肝組織。利用放射免疫法檢測血清樣本中乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)和乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg);熒光定量PCR檢測血清和肝組織中HBV DNA拷貝數(shù);免疫組織化學法檢測肝組織中HBsAg和乙型肝炎病毒核心抗原(HBc Ag)的表達;蘇木精-伊紅(HE)染色觀察肝組織病理變化;使用SPSS 17.0對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學分析。結(jié)果實驗組HBsAg和HBeAg表達均呈現(xiàn)4個上升-下降曲線:HBsAg峰值分別出現(xiàn)在第3天、第3周、第7周和第9周;HBeAg峰值分別出現(xiàn)在第1天、第1周、第4周和第10周。對照組HBsAg和HBeAg表達分別呈現(xiàn)2個或3個明顯的峰:HBsAg峰值分別出現(xiàn)在第3天和第8周;HBeAg峰值分別出現(xiàn)在第1天、第3周和第10周。空白組未檢測出HBsAg和HBeAg。實驗組HBV DNA拷貝數(shù)高于對照組的拷貝數(shù)(P0.01);肝組織中HBV DNA拷貝數(shù)高于同期血清中的拷貝數(shù)(P0.01);實驗組和對照組的肝組織中均有HBsAg和HBc Ag的表達;實驗組與對照組出現(xiàn)肝臟細胞炎癥、肝細胞纖維化、肝細胞壞死等病理變化,而空白組正常。結(jié)論利用水動力法向C57BL/6小鼠體內(nèi)轉(zhuǎn)入HBV cccDNA,成功建立了慢性乙型肝炎病毒感染的小鼠模型,與對照組比較,新建立的小鼠乙肝模型具有更高的HBV表達,動物模型為研究乙型肝炎病毒HBV cccDNA的感染及其引起肝損傷的機制奠定了基礎(chǔ)。
【作者單位】： 重慶醫(yī)科大學實驗動物中心;重慶醫(yī)科大學感染性疾病分子生物學教育部重點實驗室;
【關(guān)鍵詞】： 乙型肝炎病毒 HBV共價閉合環(huán)狀DNA 水動力法 小鼠模型
【基金】：重慶市科委重大項目(CSTC2013yykfc1005)
【分類號】：R512.62;R-332
【正文快照】： 乙型肝炎病毒(Hepatitis B Virus,HBV)是一種嗜肝DNA病毒,有較強的種屬特異性,自然條件下只感染人和非人靈長類動物(如黑猩猩等),主要通過血液及體液傳播感染(GuidottiChisari,2006)。HBV感染不僅可以導(dǎo)致急、慢性病毒性肝炎和重性肝炎,而且還與肝硬化(liver cirrhosis,LC)和

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1 張v

本文編號：475087