本文關(guān)鍵詞：三株A型流感病毒致小鼠肥大細胞系P815凋亡的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：本實驗室前期的研究證明,在A型流感病毒感染過程中,肥大細胞可被H5N1激活,釋放活性介質(zhì),引起感染組織炎性反應(yīng),并加劇感染組織的病理損傷：抑制肥大細胞活性,可明顯減輕靶器官的病理損傷,減少感染小鼠的死亡率。本研究以小鼠肥大細胞系P815為研究材料,觀察了A型流感病毒感染肥大細胞后細胞凋亡的發(fā)生情況與機理。 本研究采用透射電鏡觀察TUNEL染色,對攻毒之后的肥大細胞進行了檢測,結(jié)果證明H1N1(A/WSN/33). H5N1(A/Chicken/Henan/I/04)及H7N2(A/Chicken/Hebei/2/02)三種亞型的流感病毒均可誘導肥大細胞凋亡。采用磷脂酰絲氨酸染色法及后續(xù)的流式細胞儀分析,比較了三株不同亞型流感病毒誘導肥大細胞的凋亡比率,結(jié)果顯示三株病毒誘導肥大細胞凋亡的能力為H5N1H1N1H7N2。 此外,本研究采用了Western Blot, Caspase抑制實驗和磷脂酰絲氨酸染色法及后續(xù)的流式細胞儀分析,對A型流感病毒誘導肥大細胞凋亡的信號通路進行了研究。結(jié)果提示病毒主要通過線粒體介導的內(nèi)源性通路誘導細胞凋亡的發(fā)生,而死亡受體介導的通路的活化在病毒誘導的細胞凋亡中比較微弱。通過對Bcl-2家族中兩個促凋亡蛋白Puma及Bim的檢測,我們觀察到促凋亡蛋白Puma與Bim表達水平上調(diào),這暗示著它們在A型流感病毒感染誘導肥大細胞凋亡的過程中可能發(fā)揮了重要作用。
【關(guān)鍵詞】：A型流感病毒 細胞凋亡 肥大細胞 信號通路
【學位授予單位】：中國農(nóng)業(yè)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2014
【分類號】：R373.13
【目錄】：

• 摘要5-6
• Abstract6-7
• 目錄7-9
• 插圖和附表清單9-10
• ~.略詞表10-12
• 第一章 流感病毒與細胞凋亡(文獻綜述)12-32
• 1. A型流感病毒概述12-16
• 1.1 A型流感病毒歷史12-13
• 1.2 A型流感病毒結(jié)構(gòu)、分類和命名13-14
• 1.3 A型流感病毒的入侵與復制14-16
• 2. 細胞凋亡16-22
• 2.1 細胞凋亡簡介16
• 2.2 細胞凋亡形態(tài)學特點16-17
• 2.3 細胞凋亡的檢測方法17-22
• 3. A型流感病毒與細胞凋亡通路的關(guān)系22-28
• 3.1 誘導細胞凋亡的主要信號通路22-24
• 3.2 IAV與死亡受體介導的信號通路24-25
• 3.3 IAV與RIG-I樣受體介導的信號通路25-26
• 3.4 IAV與調(diào)控細胞凋亡的其它相關(guān)分子26-28
• 4. A型流感病毒與肥大細胞28-32
• 4.1 肥大細胞簡介28-29
• 4.2 肥大細胞在A型流感病毒感染中的作用29-32
• 第二章 A型流感病毒感染肥大細胞模型的建立32-43
• 1. 引言32
• 2. 材料與方法32-38
• 2.1 材料32-35
• 2.2 方法35-38
• 3. 結(jié)果38-41
• 3.1 三株A型流感病毒貯存原液毒力測定38-39
• 3.2 HA檢測病毒感染后細胞上清病毒血凝效價39
• 3.3 三株A型流感病毒的噬斑檢測39-40
• 3.4 定量PCR檢測A型流感病毒NS基因40-41
• 4. 討論41-42
• 5. 小結(jié)42-43
• 第三章 A型流感病毒誘導肥大細胞凋亡的研究43-52
• 1. 引言43
• 2. 材料與方法43-48
• 2.1 材料43-45
• 2.2 方法45-48
• 3. 結(jié)果48-50
• 3.1 透射電鏡檢測細胞凋亡48
• 3.2 TUNEL檢測細胞凋亡48-49
• 3.3 磷脂酰絲氨酸染色檢測細胞凋亡49-50
• 4. 討論50-51
• 5. 小結(jié)51-52
• 第四章 A型流感病毒誘導肥大細胞凋亡通路的研究52-64
• 1. 引言52
• 2. 材料與方法52-59
• 2.1 材料52-57
• 2.2 方法57-59
• 3. 結(jié)果59-62
• 3.1 Western Blot檢測病毒感染后細胞凋亡通路59-61
• 3.2 凋亡抑制劑處理后磷脂酰絲氨酸染色法檢測病毒感染后細胞凋亡率61
• 3.3 凋亡抑制劑處理后Western Blot檢測病毒感染后細胞凋亡61-62
• 4. 討論62-63
• 5. 小結(jié)63-64
• 第五章 結(jié)論64-66
• 參考文獻66-72
• 致謝72-74
• 個人簡介74

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 ;Mast Cell and Immune Inhibitory Receptors[J];Cellular & Molecular Immunology;2004年06期

  本文關(guān)鍵詞：三株A型流感病毒致小鼠肥大細胞系P815凋亡的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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本文編號：472160