本文關(guān)鍵詞：三株A型流感病毒致小鼠肥大細(xì)胞系P815凋亡的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：本實(shí)驗(yàn)室前期的研究證明,在A型流感病毒感染過程中,肥大細(xì)胞可被H5N1激活,釋放活性介質(zhì),引起感染組織炎性反應(yīng),并加劇感染組織的病理?yè)p傷：抑制肥大細(xì)胞活性,可明顯減輕靶器官的病理?yè)p傷,減少感染小鼠的死亡率。本研究以小鼠肥大細(xì)胞系P815為研究材料,觀察了A型流感病毒感染肥大細(xì)胞后細(xì)胞凋亡的發(fā)生情況與機(jī)理。 本研究采用透射電鏡觀察TUNEL染色,對(duì)攻毒之后的肥大細(xì)胞進(jìn)行了檢測(cè),結(jié)果證明H1N1(A/WSN/33). H5N1(A/Chicken/Henan/I/04)及H7N2(A/Chicken/Hebei/2/02)三種亞型的流感病毒均可誘導(dǎo)肥大細(xì)胞凋亡。采用磷脂酰絲氨酸染色法及后續(xù)的流式細(xì)胞儀分析,比較了三株不同亞型流感病毒誘導(dǎo)肥大細(xì)胞的凋亡比率,結(jié)果顯示三株病毒誘導(dǎo)肥大細(xì)胞凋亡的能力為H5N1H1N1H7N2。 此外,本研究采用了Western Blot, Caspase抑制實(shí)驗(yàn)和磷脂酰絲氨酸染色法及后續(xù)的流式細(xì)胞儀分析,對(duì)A型流感病毒誘導(dǎo)肥大細(xì)胞凋亡的信號(hào)通路進(jìn)行了研究。結(jié)果提示病毒主要通過線粒體介導(dǎo)的內(nèi)源性通路誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的發(fā)生,而死亡受體介導(dǎo)的通路的活化在病毒誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡中比較微弱。通過對(duì)Bcl-2家族中兩個(gè)促凋亡蛋白Puma及Bim的檢測(cè),我們觀察到促凋亡蛋白Puma與Bim表達(dá)水平上調(diào),這暗示著它們?cè)贏型流感病毒感染誘導(dǎo)肥大細(xì)胞凋亡的過程中可能發(fā)揮了重要作用。
【關(guān)鍵詞】：A型流感病毒 細(xì)胞凋亡 肥大細(xì)胞 信號(hào)通路
【學(xué)位授予單位】：中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R373.13
【目錄】：

• 摘要5-6
• Abstract6-7
• 目錄7-9
• 插圖和附表清單9-10
• ~.略詞表10-12
• 第一章 流感病毒與細(xì)胞凋亡(文獻(xiàn)綜述)12-32
• 1. A型流感病毒概述12-16
• 1.1 A型流感病毒歷史12-13
• 1.2 A型流感病毒結(jié)構(gòu)、分類和命名13-14
• 1.3 A型流感病毒的入侵與復(fù)制14-16
• 2. 細(xì)胞凋亡16-22
• 2.1 細(xì)胞凋亡簡(jiǎn)介16
• 2.2 細(xì)胞凋亡形態(tài)學(xué)特點(diǎn)16-17
• 2.3 細(xì)胞凋亡的檢測(cè)方法17-22
• 3. A型流感病毒與細(xì)胞凋亡通路的關(guān)系22-28
• 3.1 誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的主要信號(hào)通路22-24
• 3.2 IAV與死亡受體介導(dǎo)的信號(hào)通路24-25
• 3.3 IAV與RIG-I樣受體介導(dǎo)的信號(hào)通路25-26
• 3.4 IAV與調(diào)控細(xì)胞凋亡的其它相關(guān)分子26-28
• 4. A型流感病毒與肥大細(xì)胞28-32
• 4.1 肥大細(xì)胞簡(jiǎn)介28-29
• 4.2 肥大細(xì)胞在A型流感病毒感染中的作用29-32
• 第二章 A型流感病毒感染肥大細(xì)胞模型的建立32-43
• 1. 引言32
• 2. 材料與方法32-38
• 2.1 材料32-35
• 2.2 方法35-38
• 3. 結(jié)果38-41
• 3.1 三株A型流感病毒貯存原液毒力測(cè)定38-39
• 3.2 HA檢測(cè)病毒感染后細(xì)胞上清病毒血凝效價(jià)39
• 3.3 三株A型流感病毒的噬斑檢測(cè)39-40
• 3.4 定量PCR檢測(cè)A型流感病毒NS基因40-41
• 4. 討論41-42
• 5. 小結(jié)42-43
• 第三章 A型流感病毒誘導(dǎo)肥大細(xì)胞凋亡的研究43-52
• 1. 引言43
• 2. 材料與方法43-48
• 2.1 材料43-45
• 2.2 方法45-48
• 3. 結(jié)果48-50
• 3.1 透射電鏡檢測(cè)細(xì)胞凋亡48
• 3.2 TUNEL檢測(cè)細(xì)胞凋亡48-49
• 3.3 磷脂酰絲氨酸染色檢測(cè)細(xì)胞凋亡49-50
• 4. 討論50-51
• 5. 小結(jié)51-52
• 第四章 A型流感病毒誘導(dǎo)肥大細(xì)胞凋亡通路的研究52-64
• 1. 引言52
• 2. 材料與方法52-59
• 2.1 材料52-57
• 2.2 方法57-59
• 3. 結(jié)果59-62
• 3.1 Western Blot檢測(cè)病毒感染后細(xì)胞凋亡通路59-61
• 3.2 凋亡抑制劑處理后磷脂酰絲氨酸染色法檢測(cè)病毒感染后細(xì)胞凋亡率61
• 3.3 凋亡抑制劑處理后Western Blot檢測(cè)病毒感染后細(xì)胞凋亡61-62
• 4. 討論62-63
• 5. 小結(jié)63-64
• 第五章 結(jié)論64-66
• 參考文獻(xiàn)66-72
• 致謝72-74
• 個(gè)人簡(jiǎn)介74

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 ;Mast Cell and Immune Inhibitory Receptors[J];Cellular & Molecular Immunology;2004年06期

  本文關(guān)鍵詞：三株A型流感病毒致小鼠肥大細(xì)胞系P815凋亡的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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本文編號(hào)：472160