多重耐藥鮑曼不動桿菌關(guān)鍵耐藥基因的研究
發(fā)布時間:2017-06-17 02:07
本文關(guān)鍵詞:多重耐藥鮑曼不動桿菌關(guān)鍵耐藥基因的研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:目的:了解皖北地區(qū)3家教學(xué)醫(yī)院臨床分離的多重耐藥鮑曼不動桿菌的耐藥情況,探討其關(guān)鍵耐藥分子機(jī)制:β-內(nèi)酰胺水解酶及主動外排機(jī)制,為臨床抗菌藥物治療提供合理的指導(dǎo)和參考。 方法:收集皖北地區(qū)3家教學(xué)醫(yī)院2010年3月至2012年3月多重耐藥鮑曼不動桿菌無重復(fù)分離株共43株,采用全自動細(xì)菌鑒定與藥敏分析儀對收集菌株進(jìn)行種屬鑒定并測定其對15種抗菌藥物的敏感性,采用PCR方法對關(guān)鍵的β-內(nèi)酰胺酶基因(包括TEM、IMP、VIM、OXA-23、ISAba1-OXA-23)和外排泵基因AdeB進(jìn)行了篩選,并對擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行測序分析;采用逆轉(zhuǎn)錄PCR(RT-PCR)檢測AdeB基因的mRNA表達(dá)水平,分析其表達(dá)與細(xì)菌耐藥性之間的關(guān)系。 結(jié)果: 1.43株非重復(fù)鮑曼不動桿菌病室來源以重癥監(jiān)護(hù)室最多(26株),其余為呼吸內(nèi)科(5株)、神經(jīng)外科(3株)、神經(jīng)內(nèi)科(2株)、燒傷整形科(2株),剩余5株來源于其他科室。標(biāo)本來源分布情況:36株(83.7%)來源于痰液,4株來源于分泌物,其余3株分別來源于血液、腦脊液和尿液。 2.15種抗菌藥物中,臨床常用藥物(阿米卡星、環(huán)丙沙星、慶大霉素、頭孢曲松、左氧氟沙星等)的耐藥率均達(dá)到95%以上,碳青霉烯類抗生素(亞胺培南、美羅培南)有較高的耐藥率,均為81.4%,頭孢哌酮舒巴坦耐藥率為69.8%,多粘菌素E耐藥率為7.0%,替加環(huán)素為4.7%,利福平為16.3%。 3.耐藥基因檢測:43株多耐藥鮑曼不動桿菌中TEM陽性株數(shù)41株,,陽性率95.3%;35株碳青霉烯耐藥鮑曼不動桿菌中IMP、VIM、OXA-23、ISAba1-OXA-23的陽性株數(shù)分別為20株、1株、29株、25株,陽性率分別為57.1%、2.9%、82.9%、71.4%,29株OXA-23基因中25株上游檢測到插入序列ISAba1,ISAba1-OXA-23經(jīng)測序比對,與Genbank上的該序列同源性為100%。 4.外排基因AdeB基因檢測均為陽性,逆轉(zhuǎn)錄PCR(RT-PCR)方法檢測AdeB基因表達(dá)水平結(jié)果:碳青霉烯耐藥組和碳青霉烯相對敏感組菌株AdeB/GAPDH計算結(jié)果分別為(2.13±0.35)和(0.92±0.16),差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。碳青霉烯類抗生素耐藥組的AdeB基因mRNA水平高于相對敏感組(P0.05)。 結(jié)論: 1.皖北地區(qū)3家教學(xué)醫(yī)院的臨床分離的鮑曼不動桿菌耐藥情況較為嚴(yán)重,是值得關(guān)注的醫(yī)院感染病原菌,其中以ICU臨床分離率最高,呼吸系統(tǒng)感染更為常見。本地不動桿菌對多粘菌素、替加環(huán)素等耐藥率仍較低,可作為臨床治療備選藥物。 2.本地鮑曼不動桿菌檢測出β-內(nèi)酰胺類藥物水解酶主要包括:超廣譜β-內(nèi)酰胺酶blaTEM、金屬酶blaVIM和blaIMP以及碳青霉烯酶blaOXA-23。 3.本地鮑曼不動桿菌攜帶的blaOXA-23碳青霉烯酶基因序列上游普遍含有插入序列ISAba1,其比例為86.2%。 4.主動外排基因AdeB的mRNA轉(zhuǎn)錄水平與碳青霉烯類耐藥關(guān)系密切。
【關(guān)鍵詞】:鮑曼不動桿菌 耐藥性 β-內(nèi)酰胺酶 外排泵 逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)
【學(xué)位授予單位】:蚌埠醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2013
【分類號】:R378;R3416
【目錄】:
- 中文摘要5-7
- 英文摘要7-9
- 前言9-12
- 第一部分 鮑曼不動桿菌耐藥性研究12-20
- 材料與方法12-14
- 結(jié)果14-16
- 討論16-20
- 第二部分 多耐藥鮑曼不動桿菌β- 內(nèi)酰胺酶基因及插入序列的檢測20-29
- 材料與方法20-23
- 結(jié)果23-26
- 討論26-29
- 第三部分 鮑曼不動桿菌外排泵基因AdeB的篩查及AdeBmRNA表達(dá)水平研究29-37
- 材料與方法29-33
- 結(jié)果33-35
- 討論35-37
- 結(jié)論37-38
- 參考文獻(xiàn)38-41
- 致謝41-42
- 附錄42-54
- A 中英文縮寫全稱對照42-43
- B 測序圖譜43-45
- C 個人簡歷45-46
- D 綜述46-54
【參考文獻(xiàn)】
中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前5條
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本文編號:457054
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