過表達FOXN1基因誘導人胚胎干細胞向胸腺上皮細胞定向分化的研究
本文關(guān)鍵詞:過表達FOXN1基因誘導人胚胎干細胞向胸腺上皮細胞定向分化的研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:通過在人胚胎干細胞中過表達轉(zhuǎn)錄因子FOXN1(forkhead box protein N1),觀察細胞形態(tài)變化并檢測標志基因的表達,成功地將其定向分化為胸腺上皮細胞。利用TALEN介導的同源重組在人胚胎干細胞中敲入FOXN1-m Cherry報告元件,使其能夠指示內(nèi)源FOXN1的表達。通過Teton誘導表達慢病毒系統(tǒng)在人胚胎干細胞系X-01中過表達FOXN1,發(fā)現(xiàn)人胚胎干細胞逐漸分化,細胞形態(tài)變扁平,細胞體積變大,表現(xiàn)出類似胸腺上皮細胞的形態(tài)。RT-PCR結(jié)果表明,過表達FOXN1后胸腺上皮細胞的標志基因TBX1、HOXA3、EYA1、K5、K8和內(nèi)源FOXN1的m RNA水平都顯著上調(diào),并且隨著誘導時間的延長而增加,在第12 d達到最高。對誘導后第12 d所得的細胞進行免疫染色可觀察到K5(keratin 5)和K8(keratin 8)的表達,其中19%的細胞表達K5,45%的細胞表達K8。上述結(jié)果表明,通過過表達FOXN1可誘導人胚胎干細胞定向分化為胸腺上皮細胞。
【作者單位】: 浙江大學動物科學學院;
【關(guān)鍵詞】: 人胚胎干細胞 FOXN 胸腺上皮細胞 定向分化
【分類號】:R329
【正文快照】: #共同第一作者網(wǎng)絡(luò)出版時間:2015-12-28 10:18:52 URL:http://www.cnki.net/kcms/detail/31.2035.Q.20151228.1018.004.html胸腺是機體關(guān)鍵的中樞免疫器官,它不僅是哺乳動物T細胞發(fā)育分化和成熟的場所,而且還可以通過消除自體反應(yīng)T細胞從而形成自身免疫耐受[1-2]。胸腺機能障
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