本文關鍵詞：腸道病毒71型VP1蛋白在昆蟲桿狀病毒表達系統(tǒng)的表達，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的利用昆蟲桿狀病毒表達系統(tǒng)表達腸道病毒71型VP1蛋白并對其進行純化。方法首先通過化學合成法合成EV71 VP1基因,然后將EV71 VP1基因插入到供體質粒pFast Bac1中,構成重組質粒pFast Bac1-VP1,再轉入JM190感受態(tài)細菌擴增,然后提取重組質粒pFast Bac1-VP1轉入DH10BacTM感受態(tài)細胞,通過轉座從而獲得重組質粒bacmid-VP1,采用脂質體Cellfectin Reagent將重組質粒bacmid-VP1轉染Sf9細胞。通過SDS-PAGE、Western blot法檢測目的蛋白的水平,經鎳離子親和層析,純化VP1蛋白。結果 SDS-PAGE及Western blot法檢測獲得蛋白的相對分子質量與預期結果一致。Bradford分析純化后蛋白的濃度為70μg/m L,純化度達90%。結論利用昆蟲桿狀病毒表達系統(tǒng)成功表達EV71 VP1蛋白。
【作者單位】： 江蘇大學檢驗醫(yī)學研究所;江蘇大學附屬人民醫(yī)院檢驗科;鎮(zhèn)江市疾病預防控制中心檢驗科;
【關鍵詞】： EV VP蛋白 昆蟲-桿狀病毒表達系統(tǒng)
【基金】：國家自然科學基金(81101227) 鎮(zhèn)江市社會發(fā)展項目(SH2012036)
【分類號】：R392
【正文快照】： 腸道病毒71型(enterovirus type 71,EV71)是引起手足口病(hand-foot-mouth disease,HFMD)的主要病原之一[1-2],多發(fā)生于5歲以下兒童,其最主要臨床癥狀表現(xiàn)為發(fā)熱,手、足、口腔黏膜等部位出現(xiàn)皰疹。少數(shù)患兒可出現(xiàn)嚴重的與神經系統(tǒng)有關的并發(fā)癥,如腦干腦炎、腦脊髓炎、無菌性腦

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  本文關鍵詞：腸道病毒71型VP1蛋白在昆蟲桿狀病毒表達系統(tǒng)的表達，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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本文編號：417933