目的： 通過制備裸鼠胃癌轉(zhuǎn)移模型獲得轉(zhuǎn)移前后胃癌腫瘤組織，應(yīng)用雙向電泳相關(guān)技術(shù)分離并篩選裸鼠胃癌轉(zhuǎn)移前后腫瘤組織的差異表達(dá)蛋白，應(yīng)用基因芯片技術(shù)篩選胃癌轉(zhuǎn)移前后腫瘤組織的差異基因。為進(jìn)一步研究胃癌轉(zhuǎn)移機(jī)制及靶向治療奠定理論基礎(chǔ)。 方法： 1.體外培養(yǎng)低分化人胃腺癌細(xì)胞(BGC-823)，收集細(xì)胞并將其注射至裸鼠背部皮下，成瘤后經(jīng)傳代形成的實體瘤繼續(xù)種于裸鼠胃壁，等待其轉(zhuǎn)移。 2.獲得轉(zhuǎn)移前、后胃癌腫瘤組織（包括出現(xiàn)轉(zhuǎn)移前、后胃壁腫瘤組織，肝轉(zhuǎn)移腫瘤組織，腸系膜淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組織），分別提取蛋白并采用雙向電泳技術(shù)分離蛋白。用PDQest8.0圖像分析軟件對圖像進(jìn)行分析和差異點(diǎn)尋找。采用4800plus MALDITOF/TOF質(zhì)譜儀對綜合三組結(jié)果后的差異蛋白位點(diǎn)進(jìn)行質(zhì)譜鑒定。 3.制作裸鼠胃壁上轉(zhuǎn)移前、后腫瘤組織的基因表達(dá)譜以研究胃癌轉(zhuǎn)移前后的差異基因。將Cy3用單色標(biāo)記法標(biāo)記后與芯片雜交，得到不同基因的熒光信號，再將熒光信號轉(zhuǎn)變?yōu)閿?shù)字信號。經(jīng)過統(tǒng)計分析得出差異基因。 結(jié)果： 1.成功制備裸鼠胃癌轉(zhuǎn)移模型，胃壁種植9-10周后在部分裸鼠的肝臟及腸系膜淋巴結(jié)出現(xiàn)胃癌轉(zhuǎn)移灶。 2.應(yīng)用雙向電泳技...

【文章頁數(shù)】：61 頁

【學(xué)位級別】：碩士

圖1A1為背部皮下注射生理鹽水；A2為注射BGC-823胃癌細(xì)胞后2-3周的生長情況圖；B1為胃壁種植生理鹽水；B2為胃癌腫瘤組織塊3-4周后的生長情況圖；C1為胃壁種植9-10周腹部解剖后腫瘤轉(zhuǎn)移到腸；C2為腫瘤轉(zhuǎn)移到肝臟

圖2A為轉(zhuǎn)移到腸系膜淋巴結(jié)上的銀染雙向電泳結(jié)果圖；B為胃壁腫瘤轉(zhuǎn)移后銀染雙向電泳結(jié)果圖；C為胃壁腫瘤轉(zhuǎn)移前的銀染雙向電泳結(jié)果圖

圖3D1為胃壁轉(zhuǎn)移后與轉(zhuǎn)移到腸上差異點(diǎn)比較；D2為胃壁轉(zhuǎn)移前與轉(zhuǎn)移到腸上比D1D2D3

圖4A為轉(zhuǎn)移前胃癌差異基因的雜交芯片熒光圖，B轉(zhuǎn)移后胃癌差異基因雜交芯片

本文編號：3888127