目的:通過對常規(guī)菌落PCR方法進行優(yōu)化,探索提高幽門螺桿菌(H.pylori)菌落PCR擴增效率的方法。方法:提取H.pylori 26695基因組DNA作為陽性對照組,以未經任何處理的H.pylori 26695菌落作為陰性對照組,經煮沸裂解速凍法獲得的H.pylori 26695菌落作為試驗組,隨機選擇8個不同的基因(16S r DNA、cag A-U、cag A-D、ice A、ure A、het A、rop N、Hp0792)作為菌落PCR的候選基因進行菌落PCR驗證,最后以1%瓊脂糖凝膠進行電泳檢測。結果:在選擇的目標基因中,陰性對照組未擴增出目的條帶,試驗組與陽性對照組均擴增出目的相應大小的條帶;與常規(guī)菌落PCR比較,煮沸速凍裂解法能顯著提高H.pylori菌落PCR的擴增效率。結論:煮沸速凍裂解法可用于H.pylori的高通量篩選鑒定和分子診斷。

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圖1菌落PCＲ擴增電泳圖

本文編號：3886730