TLN1-PI3K/AKT通路調(diào)控骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化
發(fā)布時(shí)間:2021-04-19 17:19
目的探討Talin1在骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(Mesenchymal stem cell,MSC)成骨分化中的作用及其調(diào)控機(jī)制。方法誘導(dǎo)MSC成骨分化后通過(guò)qRT-PCR及Western blot檢測(cè)TLN1的表達(dá)變化,在MSC中敲低TLN1后采用CCK-8檢測(cè)細(xì)胞增殖能力改變,利用ALP活性檢測(cè)及茜素紅染色觀察成骨分化變化情況。通過(guò)Western blot實(shí)驗(yàn)研究TLN1在MSC成骨分化過(guò)程中參與的分子機(jī)制。結(jié)果 qPCR及Western blot結(jié)果提示,TLN1在成骨分化過(guò)程中表達(dá)上升;siRNA敲低TLN1表達(dá)后,MSC增殖無(wú)明顯差異,ALP活性及礦化結(jié)節(jié)定量較對(duì)照組下降(P<0.05)。Western blot結(jié)果顯示敲低TLN1表達(dá)后p-AKT表達(dá)下降,回補(bǔ)實(shí)驗(yàn)證明激活PI3K-AKT表達(dá)可回復(fù)MSC的成骨分化能力。結(jié)論誘導(dǎo)MSC成骨分化后TLN1表達(dá)逐漸上調(diào),敲低TLN1后通過(guò)PI3K-AKT通路抑制骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化。
【文章來(lái)源】:嶺南現(xiàn)代臨床外科. 2019,19(04)
【文章頁(yè)數(shù)】:5 頁(yè)
【文章目錄】:
1 材料與方法
1.1 實(shí)驗(yàn)材料
1.2 實(shí)驗(yàn)方法
1.2.1 MSC的分離與培養(yǎng)
1.2.2 成骨分化誘導(dǎo)
1.2.3 茜素紅染色及定量
1.2.4 堿性磷酸酶(ALP)活性檢測(cè)
1.2.5 siRNA轉(zhuǎn)染細(xì)胞
1.2.6 細(xì)胞增殖試驗(yàn)
1.2.7 實(shí)時(shí)熒光定量PCR
1.2.8 Western blot檢測(cè)
1.2.9 PI3K/AKT通路激活劑SC-79回補(bǔ)實(shí)驗(yàn)
1.2.1 0 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
2 結(jié)果
2.1 TLN1與MSC成骨分化功能呈正性相關(guān)
2.2 敲低TLN1后抑制MSC成骨分化功能
2.3 敲低TLN1后抑制PI3K/AKT通路
2.4 激活PI3K/AKT通路可回復(fù)成骨分化功能
3 討論
本文編號(hào):3147977
【文章來(lái)源】:嶺南現(xiàn)代臨床外科. 2019,19(04)
【文章頁(yè)數(shù)】:5 頁(yè)
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1 材料與方法
1.1 實(shí)驗(yàn)材料
1.2 實(shí)驗(yàn)方法
1.2.1 MSC的分離與培養(yǎng)
1.2.2 成骨分化誘導(dǎo)
1.2.3 茜素紅染色及定量
1.2.4 堿性磷酸酶(ALP)活性檢測(cè)
1.2.5 siRNA轉(zhuǎn)染細(xì)胞
1.2.6 細(xì)胞增殖試驗(yàn)
1.2.7 實(shí)時(shí)熒光定量PCR
1.2.8 Western blot檢測(cè)
1.2.9 PI3K/AKT通路激活劑SC-79回補(bǔ)實(shí)驗(yàn)
1.2.1 0 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
2 結(jié)果
2.1 TLN1與MSC成骨分化功能呈正性相關(guān)
2.2 敲低TLN1后抑制MSC成骨分化功能
2.3 敲低TLN1后抑制PI3K/AKT通路
2.4 激活PI3K/AKT通路可回復(fù)成骨分化功能
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