目的研究Prkra小耳小鼠動(dòng)物模型的構(gòu)建方法,并探討其用于先天性小耳畸形研究的可行性。方法從美國JAX實(shí)驗(yàn)室引進(jìn)同窩Prkra little ear（小耳）小鼠6只,通過繁育共獲得13只Prkra小耳小鼠孕鼠。其中10只孕鼠共取75只胎齡為14.5 d的胎鼠尾,提取DNA進(jìn)行Sanger法測序;3只孕鼠正常生產(chǎn),幼鼠出生后常規(guī)飼養(yǎng),取耳廓畸形和耳廓正常的40 d子鼠各3只,進(jìn)行骨骼阿利新藍(lán)染色,并作對比分析。結(jié)果 Prkra小耳純合型小鼠耳廓明顯比其同胞正常耳廓小,失去了正常小鼠耳廓的亞結(jié)構(gòu)形態(tài)。DNA測序結(jié)果表明,突變位點(diǎn)為在2號染色體76、643、218 bp（GRCm38）上的G向A突變,該突變位點(diǎn)位于第3外顯子之后。阿利新藍(lán)染色結(jié)果顯示,Prkra小耳純合型小鼠體型較正常野生型小,四肢骨發(fā)育基本正常,但較細(xì)短,后肢表現(xiàn)尤為明顯,肋骨發(fā)育較細(xì)小,尾骨發(fā)育較細(xì)短,頭顱發(fā)育略小。結(jié)論成功構(gòu)建了Prkra小耳小鼠模型,而且該模型是研究先天性小耳畸形胚胎發(fā)育機(jī)制比較合適的動(dòng)物模型。 

【文章來源】：中華整形外科雜志. 2019,35(08)北大核心

【文章頁數(shù)】：5 頁


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