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激活素受體II結(jié)合蛋白基因的克

發(fā)布時(shí)間:2021-01-12 02:20
  為了詳細(xì)探討激活素的信號(hào)傳遞機(jī)制,以激活素受體ⅡA的細(xì)胞內(nèi)段作餌用酵母雙雜交方法篩選得到一個(gè)新的PDZ蛋白,命名為ARIP2,以ARIP2 cDNA為探針篩選鼠腦cDNA文庫,得到ARIP2的全長cDNA序列及另一個(gè)新的PDZ蛋白,因其缺乏ARIP2的C末端序列,命名為ARIP2-short,通過ELISA、哺乳動(dòng)物雙雜交及免疫沉淀鑒定二者均可通過其N末端的PDZ功能區(qū)與ActRⅡA的C末端結(jié)合; ARIP2在CHO-K1細(xì)胞中的超表達(dá)可促進(jìn)ActRⅡA的內(nèi)化,而ARIP2-short則減少其內(nèi)化; ARIP2可抑制FSH啟動(dòng)子的活性,并減少FSH mRNA的表達(dá),而ARIP2-short則可增強(qiáng)FSH的活性并增加FSH mRNA的表達(dá)。為了研究激活素對(duì)胎鼠紋狀體多巴胺能神經(jīng)的誘導(dǎo)作用,我們?nèi)14胎鼠紋狀體,用ActivinA及bFGF刺激,用RT-PCR及免疫熒光染色對(duì)多巴胺能神經(jīng)相關(guān)因子進(jìn)行檢測,結(jié)果顯示ActivinA和bFGF可協(xié)同作用誘導(dǎo)紋狀體干細(xì)胞向多巴胺能神經(jīng)進(jìn)行分化。 

【文章來源】:吉林大學(xué)吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】:71 頁

【學(xué)位級(jí)別】:博士

【文章目錄】:
提要
英文縮寫詞表
前言
文獻(xiàn)回顧
    一、Activin的結(jié)構(gòu)
    二、Activin的功能
    三、激活素的信號(hào)傳遞機(jī)制
    四、PDZ domain和細(xì)胞膜蛋白質(zhì)網(wǎng)絡(luò)的構(gòu)筑
    五、Activin在神經(jīng)干細(xì)胞誘導(dǎo)中的作用
    六、本文的立題依據(jù)及創(chuàng)新點(diǎn)
材料與方法
    一、材料
    二、方法
        (一) 酵母雙雜交篩選Activin受體ⅡA結(jié)合蛋白
2cDNA和ARIP2-short cDNA的克隆">        (二) 鼠ARIP2cDNA和ARIP2-short cDNA的克隆
        (三) 鼠ARIPs基因組的克隆
        (四) 將外源基因?qū)肱囵B(yǎng)細(xì)胞的方法
結(jié)果分析
2及ARIP2-short的克隆">    一、ARIP2及ARIP2-short的克隆
    二、ARIPs部分基因組的克隆
    三、ARIPs啟動(dòng)子的分析
2轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)的確定">    四、ARIP2轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)的確定
2和ARIP2-short均可與ActRⅡA結(jié)合">    五、ARIP2和ARIP2-short均可與ActRⅡA結(jié)合
2和ARIP2-short通過PDZ domain與ActRⅡAC末端相互作用">    六、ARIP2和ARIP2-short通過PDZ domain與ActRⅡAC末端相互作用
2也可與ActRⅡA 相互作用">    七、內(nèi)源性ARIP2也可與ActRⅡA 相互作用
2可形成同源二聚體">    八、ARIP2可形成同源二聚體
2mRNA 廣泛存在于鼠組織中">    九、ARIP2mRNA 廣泛存在于鼠組織中
    十、ARIPs 在鼠組織中的分布
2及ARIP2-short對(duì)ActivinA 誘導(dǎo)的轉(zhuǎn)錄的影響">    十一、ARIP2及ARIP2-short對(duì)ActivinA 誘導(dǎo)的轉(zhuǎn)錄的影響
2和ARIP2-short可調(diào)節(jié)受體ⅡA 的內(nèi)化">    十二、ARIP2和ARIP2-short可調(diào)節(jié)受體ⅡA 的內(nèi)化
2和ARIP2-short對(duì)FSH 啟動(dòng)子活性的影響">    十三、ARIP2和ARIP2-short對(duì)FSH 啟動(dòng)子活性的影響
2和ARIP2-short對(duì)LβT2 細(xì)胞中 FSHβ表達(dá)的影響">    十四、ARIP2和ARIP2-short對(duì)LβT2 細(xì)胞中 FSHβ表達(dá)的影響
    十五、Activin對(duì)LβT2 細(xì)胞中FSHβ及insulin表達(dá)的影響
    十六、ActivinA對(duì)E14 胎鼠大腦干細(xì)胞中ARIPs及insulin表達(dá)的影響
    十七、激活素A對(duì)E14小鼠紋狀體多巴胺能神經(jīng)相關(guān)因子表達(dá)的影響
討論
小結(jié)
參考文獻(xiàn)
中文摘要
    一、Activin受體結(jié)合蛋白的克隆及鑒定
    二、ActivinA和bFGF對(duì)胎鼠紋狀體多巴胺能神經(jīng)的協(xié)同誘導(dǎo)
    三、ActivinA誘導(dǎo)胎鼠干細(xì)胞向insulin分泌細(xì)胞分化
英文摘要
個(gè)人簡歷
攻讀博士學(xué)位期間發(fā)表文章



本文編號(hào):2971943

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