目的了解淡色庫蚊與騷擾庫蚊觸角中差異性表達的嗅覺基因,為揭示二者遺傳分化特征提供參考依據(jù)。方法分別設(shè)置淡色庫蚊吸血前、后,騷擾庫蚊吸血前、后等4個實驗組。每組共設(shè)4個生物學(xué)重復(fù)樣品,每個樣品取20只蚊蟲觸角。采用TRIzol法提取各組樣品總RNA,采用NEBNext Ultra TM RNA R文庫構(gòu)建試劑盒構(gòu)建文庫。對轉(zhuǎn)錄組基因進行測序,通過FPKM值差異性分析,篩選淡色庫蚊與騷擾庫蚊分別在吸血前、后表達差異顯著的嗅覺基因,并進行實時熒光定量PCR (qRT-PCR)驗證。結(jié)果淡色庫蚊吸血前、后觸角轉(zhuǎn)錄組共注釋了50個氣味結(jié)合蛋白(OBP)和31個氣味受體(OR)基因,騷擾庫蚊吸血前、后觸角轉(zhuǎn)錄組共注釋了36個OBP和12個OR。淡色庫蚊吸血后較吸血前顯著上調(diào)的OBP有4個,無顯著下調(diào)的OBP。騷擾庫蚊吸血后較吸血前顯著上調(diào)和下調(diào)的OBP分別有3個。淡色庫蚊吸血后較吸血前無顯著上調(diào)的OR,顯著下調(diào)的OR有3個。騷擾庫蚊吸血后較吸血前無顯著上調(diào)的OR,顯著下調(diào)的OR有1個。qRT-PCR驗證結(jié)果顯示,淡色庫蚊吸血后OBP17顯著上調(diào);騷擾庫蚊吸血后OBP31、 OBP44表達量顯著上調(diào),其中OBP44與測序結(jié)果一致,OBP31與測序結(jié)果相反。吸血前,騷擾庫蚊OBP17顯著高于淡色庫蚊;吸血后,騷擾庫蚊OBP31、 OBP44顯著高于淡色庫蚊,OBP99a顯著低于淡色庫蚊。騷擾庫蚊吸血后OR31、 OR65、 CPIJ001069表達量均顯著上調(diào),其中OR65和CPIJ001069表達量顯著高于淡色庫蚊(P 0.05)。淡色庫蚊吸血后無顯著變化的OR基因。結(jié)論淡色庫蚊與騷擾庫蚊的嗅覺基因OBP和OR表現(xiàn)出了進化分化,OBP17、 OBP44可能參與調(diào)控騷擾庫蚊吸血后行為。OR31、OR65、 CPIJ001069可能參與調(diào)控騷擾庫蚊吸血后行為。
【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 蚊蟲來源
    1.2 主要試劑
    1.3 RNA提取
    1.4 文庫構(gòu)建
    1.5 生物信息學(xué)分析
    1.6 qRT-PCR檢測
    1.7 統(tǒng)計學(xué)分析
    1.8 倫理批準(zhǔn)和患者知情同意
2 結(jié)果
    2.1 OBP和OR基因表達量差異性分析
    2.2 OBP和OR基因qRT-PCR結(jié)果
3 討論

【參考文獻】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 趙彤言,董言德,朱禮華,陸寶麟;騷擾庫蚊與尖音庫蚊復(fù)合組其它亞種雜交的研究[J];寄生蟲與醫(yī)學(xué)昆蟲學(xué)報;1998年01期

相關(guān)博士學(xué)位論文 前2條

1 閻婷;致倦庫蚊和騷擾庫蚊差異表達的氣味受體（OR）基因的功能研究[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2014年

2 邢丹;中國尖音庫蚊復(fù)合組分子系統(tǒng)學(xué)的研究[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2013年

【共引文獻】

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1 游小花;方義亮;張建慶;高博;楊靚;吳祖建;;尖音庫蚊復(fù)合組的最新研究進展[J];中國國境衛(wèi)生檢疫雜志;2015年01期

2 邢丹;趙彤言;;騷擾庫蚊內(nèi)蒙古新記錄及其感染W(wǎng)olbachia的檢測[J];寄生蟲與醫(yī)學(xué)昆蟲學(xué)報;2013年04期

3 姬淑紅;張杰;徐湘;王金鳳;孫愛國;;上海市楊浦區(qū)淡色庫蚊對4種常用殺蟲劑的抗性調(diào)查[J];醫(yī)學(xué)動物防制;2013年10期

4 余靜;李春曉;趙彤言;;蚊蟲自育研究的現(xiàn)狀[J];昆蟲知識;2008年02期

5 宋社吾,趙彤言,董言德,蔣書楠,陸寶麟;幾種蚊蟲線粒體DNA-16S rRNA序列及其相互關(guān)系的研究[J];動物分類學(xué)報;2002年04期

6 宋社吾,趙彤言,董言德,陸寶麟;我國尖音庫蚊復(fù)合組蚊蟲的雜交及其與Wolbachia感染的關(guān)系[J];昆蟲學(xué)報;2002年06期

7 宋社吾,趙彤言,董言德,蔣書楠,陸寶麟;我國蚊蟲體內(nèi)感染的Wolbachia的wsp基因序列測定與分析[J];昆蟲學(xué)報;2002年05期

8 宋社吾,趙彤言,董言德,蔣書楠,陸寶麟;Wolbachia的wsp基因片段在我國尖音庫蚊復(fù)合組蚊蟲中的PCR擴增[J];寄生蟲與醫(yī)學(xué)昆蟲學(xué)報;2000年02期

9 余靜;李春曉;董言德;趙彤言;;成蚊營養(yǎng)和交配對騷擾庫蚊自育的影響[J];寄生蟲與醫(yī)學(xué)昆蟲學(xué)報;2009年03期

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1 馬明海;城市河道水環(huán)境修復(fù)對蚊蟲孳生影響的模擬試驗與現(xiàn)場實證研究[D];華東師范大學(xué);2017年

2 張恒端;南京市白紋伊蚊種群遺傳學(xué)研究[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2015年

【二級參考文獻】

相關(guān)博士學(xué)位論文 前2條

1 汪中明;我國重要蚊蟲感染和傳播西方馬腦炎病毒的實驗研究[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2007年

2 姜淑芳;中國重要庫蚊屬蚊蟲傳播西尼羅病毒的實驗研究[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2006年

【相似文獻】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 張靜;張建新;;嗅覺研究的發(fā)展進程及動態(tài)[J];中國行為醫(yī)學(xué)科學(xué);2006年04期

2 江建勛;神秘的嗅覺[J];科技潮;2005年08期

3 ;以科學(xué)家研究嗅覺傳播技術(shù)取得進展[J];世界科技研究與發(fā)展;2000年S1期

4 王海泉,楊長偉,陳哲宇;嗅覺研究新進展[J];中國神經(jīng)科學(xué)雜志;2000年04期

5 ;嗅覺[J];醫(yī)學(xué)文摘(耳鼻咽喉科學(xué));1965年02期

6 張靜;;嗅覺:讓生活的味道更濃郁[J];科學(xué)世界;2006年06期

7 林昌鉍;;動物嗅覺趣聞[J];科學(xué)世界;1996年10期

8 王洋;;昆蟲嗅覺通路的研究進展[J];生物技術(shù)世界;2016年05期

9 趙溧涓;;沒有嗅覺是什么感受[J];大科技(百科新說);2015年11期

10 鄭茜茜;;嗅覺識別模型研究新進展[J];溫州醫(yī)學(xué)院學(xué)報;2009年01期

相關(guān)博士學(xué)位論文 前9條

1 饒小平;哺乳動物嗅覺學(xué)習(xí)與記憶的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)研究[D];中國科學(xué)院研究生院（武漢物理與數(shù)學(xué)研究所）;2013年

2 曹德盼;生物信息學(xué)方法在昆蟲嗅覺基因識別的應(yīng)用研究[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年

3 于保庭;淡色庫蚊攝糖習(xí)性及嗅覺相關(guān)基因研究[D];浙江大學(xué);2016年

4 董琪;基于植入電極的大鼠嗅覺與味覺檢測及識別方法的研究[D];浙江大學(xué);2014年

5 劉青;病理和生理狀態(tài)對嗅球功能活動和連接的影響[D];中國科學(xué)院研究生院（武漢物理與數(shù)學(xué)研究所）;2013年

6 Tofael Ahmed;腰帶長體繭蜂嗅覺相關(guān)蛋白基因的鑒定和功能驗證[D];中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2014年

7 張麗;嗅覺經(jīng)驗對非洲爪蛙嗅球顆粒細胞樹突棘可塑性的動態(tài)調(diào)節(jié)[D];中國科學(xué)技術(shù)大學(xué);2017年

8 馬明;小鼠主嗅球及內(nèi)側(cè)韁核—腳間核通路中膽堿能系統(tǒng)的功能研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2013年

9 唐宇翀;蝴蝶覓食過程中的嗅覺和視覺行為反應(yīng)研究[D];中國林業(yè)科學(xué)研究院;2013年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 羅影濤;腺苷酸環(huán)化酶3基因敲除小鼠主要嗅覺表皮基因表達譜分析[D];河北大學(xué);2015年

2 孫偉;嗅質(zhì)丁香酚改善嗅覺認知及其機制的探討[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2008年

3 張秀秀;基于轉(zhuǎn)錄組分析菲牛蛭吸血相關(guān)基因的表達[D];陜西師范大學(xué);2018年

4 韓京華;秀麗隱桿線蟲對苯甲醛嗅覺適應(yīng)信號途徑中Gα的鑒定及功能的研究[D];云南大學(xué);2016年

5 胥媛;仿生“光學(xué)鼻”系統(tǒng)的研究[D];浙江大學(xué);2001年

6 顧國曉;早期嗅覺剝奪對SD大鼠海馬的影響的研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

7 楊天鵬;丁香酚通過嗅覺通路改善昆明鼠學(xué)習(xí)記憶的機制研究[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2007年

8 趙華渠;長角血蜱唾液腺功能蛋白發(fā)掘與吸血適應(yīng)機制研究[D];河北師范大學(xué);2017年

9 白旭;章魚胺、多巴胺對蟋蟀獎罰性嗅覺學(xué)習(xí)記憶的影響[D];沈陽師范大學(xué);2014年

10 蔡榮鳳;丁香酚、甲苯的嗅覺印跡對神經(jīng)發(fā)育影響及其機制研究[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2008年

本文編號：2848302