發(fā)布時間：2020-10-15 06:18

　　 目的:探討肥胖相關(guān)的晚期糖基化終產(chǎn)物對胚胎植入孕鼠內(nèi)膜功能和胚胎著床能力的影響。方法:選取30只雌性BABL/c小鼠,將其隨機分為3組,即模型5 W組、模型10 W組及正常組,每組10只。采用高脂飼料喂養(yǎng)模型組小鼠,構(gòu)建肥胖模型;正常組喂養(yǎng)與模型組等量的普通飼料。在造模后對小鼠進行植入胚胎。20 d后眼球取血檢測各項指標,應(yīng)用RT-PCR以及Western blotting檢測基因和蛋白表達量。結(jié)果:在造模10周后,正常組小鼠的體質(zhì)量基本不變;模型10 W組在第3、5和7周,模型5 W組在第5和7周與正常組相比體質(zhì)量變化差異均具有統(tǒng)計學意義(P0.05)。血漿膽固醇、三酰甘油、血糖、胰島素含量模型5、10 W組與正常組相比差異均有統(tǒng)計學意義(P0.05)。正常組胚胎存活率整體無太大差異,而模型10 W組由原來的存活93粒最終降低為25粒,在妊娠第10、20天模型組的胚胎存活率與正常組相比差異均有統(tǒng)計學意義(P0.05)。與正常組比較,模型5、10 W組組織中的RAGE基因表達量呈增高趨勢,HOXA10基因表達量呈下降趨勢;RAGE蛋白表達量呈增高趨勢,HOXA10、P/CAF、FKBP52、PTEN蛋白表達量呈下降趨勢。結(jié)論:肥胖相關(guān)的晚期糖基化終產(chǎn)物是通過影響RAGE受體的表達,進而影響小鼠胚胎著床重要蛋白的表達,最終影響胎盤植入孕鼠內(nèi)膜功能和胚胎著床能力。
【部分圖文】：

表5ＲT-PCＲ過程中引物序列(n=10)基因前引(5'-3')后引(5'-3')長度/bpHOXA10CAAAGATGACTGTCAGCTGCATTTGCTTGGTCTCTAAGCAT153ＲAGEGCATTGTTTCCGCGCTAGGTGGCCTAGTGGAATCTGTAGAA142p/CAFGAGATCTGACTTAATCGTCTCAGTCGATCCATGCTCGCTCGTA131β-actinCGTAGTGCTGTAGCCAGGAACGGTCATACATGGAGAGGCA126圖1ＲT-PCＲ法檢測ＲAGE基因表達情況圖2ＲT-PCＲ法檢測P/CAF和HOXA10基因表達情況圖3Westernblotting法檢測ＲAGE和p/CAF受體蛋白表達情況圖4Westernblotting檢測HOXA10和FKBP52蛋白表達情況圖5Westernblotting檢測PTEN蛋白表達情況運動量的減少，肥胖問題比以往任何時候都更為突出。本實驗通過研究肥胖與胚胎著床率的關(guān)系［14-15］，以期找到不孕不育的輔助治療方法。本實驗通過攝入高脂飼料來構(gòu)建肥胖模型，并以小鼠的體質(zhì)量、血漿中膽固醇、三酰甘油、血糖和胰島素來作為造模是否成功的評判標準。胚胎存活率結(jié)果顯示，正常組的胚胎存活率前后無太大差異，而模型10W組由原來的存活93粒最終降低為25粒。以上結(jié)果初步證實肥胖對植入孕鼠的胚胎存活率有顯著影響。糖基化終產(chǎn)物會使人體衰老加快［16-17］，除此之外，其也和慢性疾病產(chǎn)生有關(guān)。HOXA10是介導(dǎo)FK-BP52的信號分子之一，在HOCXA10基因敲除的小鼠細胞中，F(xiàn)KBP52蛋白會發(fā)生下調(diào)作用。本實驗ＲT-PCＲ和Westernblotting檢測結(jié)果均顯示，與正常組比較，模型5、10W組組織中ＲAGE蛋白表達量呈現(xiàn)增高的趨勢，HOXA10蛋白表達量呈現(xiàn)下降的趨勢。這可能與胚胎著床有關(guān)系。p/CAF是重要的組蛋白轉(zhuǎn)移酶，催化核心組蛋白的乙�；嬖谟谧訉m內(nèi)膜的基質(zhì)細胞中，促進相關(guān)基因轉(zhuǎn)錄。Ｒustandi等［18-19］研究證實，p/CAF是HOXA10

表5ＲT-PCＲ過程中引物序列(n=10)基因前引(5'-3')后引(5'-3')長度/bpHOXA10CAAAGATGACTGTCAGCTGCATTTGCTTGGTCTCTAAGCAT153ＲAGEGCATTGTTTCCGCGCTAGGTGGCCTAGTGGAATCTGTAGAA142p/CAFGAGATCTGACTTAATCGTCTCAGTCGATCCATGCTCGCTCGTA131β-actinCGTAGTGCTGTAGCCAGGAACGGTCATACATGGAGAGGCA126圖1ＲT-PCＲ法檢測ＲAGE基因表達情況圖2ＲT-PCＲ法檢測P/CAF和HOXA10基因表達情況圖3Westernblotting法檢測ＲAGE和p/CAF受體蛋白表達情況圖4Westernblotting檢測HOXA10和FKBP52蛋白表達情況圖5Westernblotting檢測PTEN蛋白表達情況運動量的減少，肥胖問題比以往任何時候都更為突出。本實驗通過研究肥胖與胚胎著床率的關(guān)系［14-15］，以期找到不孕不育的輔助治療方法。本實驗通過攝入高脂飼料來構(gòu)建肥胖模型，并以小鼠的體質(zhì)量、血漿中膽固醇、三酰甘油、血糖和胰島素來作為造模是否成功的評判標準。胚胎存活率結(jié)果顯示，正常組的胚胎存活率前后無太大差異，而模型10W組由原來的存活93粒最終降低為25粒。以上結(jié)果初步證實肥胖對植入孕鼠的胚胎存活率有顯著影響。糖基化終產(chǎn)物會使人體衰老加快［16-17］，除此之外，其也和慢性疾病產(chǎn)生有關(guān)。HOXA10是介導(dǎo)FK-BP52的信號分子之一，在HOCXA10基因敲除的小鼠細胞中，F(xiàn)KBP52蛋白會發(fā)生下調(diào)作用。本實驗ＲT-PCＲ和Westernblotting檢測結(jié)果均顯示，與正常組比較，模型5、10W組組織中ＲAGE蛋白表達量呈現(xiàn)增高的趨勢，HOXA10蛋白表達量呈現(xiàn)下降的趨勢。這可能與胚胎著床有關(guān)系。p/CAF是重要的組蛋白轉(zhuǎn)移酶，催化核心組蛋白的乙�；嬖谟谧訉m內(nèi)膜的基質(zhì)細胞中，促進相關(guān)基因轉(zhuǎn)錄。Ｒustandi等［18-19］研究證實，p/CAF是HOXA10

表5ＲT-PCＲ過程中引物序列(n=10)基因前引(5'-3')后引(5'-3')長度/bpHOXA10CAAAGATGACTGTCAGCTGCATTTGCTTGGTCTCTAAGCAT153ＲAGEGCATTGTTTCCGCGCTAGGTGGCCTAGTGGAATCTGTAGAA142p/CAFGAGATCTGACTTAATCGTCTCAGTCGATCCATGCTCGCTCGTA131β-actinCGTAGTGCTGTAGCCAGGAACGGTCATACATGGAGAGGCA126圖1ＲT-PCＲ法檢測ＲAGE基因表達情況圖2ＲT-PCＲ法檢測P/CAF和HOXA10基因表達情況圖3Westernblotting法檢測ＲAGE和p/CAF受體蛋白表達情況圖4Westernblotting檢測HOXA10和FKBP52蛋白表達情況圖5Westernblotting檢測PTEN蛋白表達情況運動量的減少，肥胖問題比以往任何時候都更為突出。本實驗通過研究肥胖與胚胎著床率的關(guān)系［14-15］，以期找到不孕不育的輔助治療方法。本實驗通過攝入高脂飼料來構(gòu)建肥胖模型，并以小鼠的體質(zhì)量、血漿中膽固醇、三酰甘油、血糖和胰島素來作為造模是否成功的評判標準。胚胎存活率結(jié)果顯示，正常組的胚胎存活率前后無太大差異，而模型10W組由原來的存活93粒最終降低為25粒。以上結(jié)果初步證實肥胖對植入孕鼠的胚胎存活率有顯著影響。糖基化終產(chǎn)物會使人體衰老加快［16-17］，除此之外，其也和慢性疾病產(chǎn)生有關(guān)。HOXA10是介導(dǎo)FK-BP52的信號分子之一，在HOCXA10基因敲除的小鼠細胞中，F(xiàn)KBP52蛋白會發(fā)生下調(diào)作用。本實驗ＲT-PCＲ和Westernblotting檢測結(jié)果均顯示，與正常組比較，模型5、10W組組織中ＲAGE蛋白表達量呈現(xiàn)增高的趨勢，HOXA10蛋白表達量呈現(xiàn)下降的趨勢。這可能與胚胎著床有關(guān)系。p/CAF是重要的組蛋白轉(zhuǎn)移酶，催化核心組蛋白的乙�；嬖谟谧訉m內(nèi)膜的基質(zhì)細胞中，促進相關(guān)基因轉(zhuǎn)錄。Ｒustandi等［18-19］研究證實，p/CAF是HOXA10
【參考文獻】

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【共引文獻】

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【二級參考文獻】

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本文編號：2841815