炎癥失控是感染性疾病并發(fā)多器官功能障礙的主要發(fā)病機制，單核-巨噬細胞的活化在誘導(dǎo)炎癥反應(yīng)中起關(guān)鍵作用。在脂多糖(lipopolysaccharide，LPS)或其它致炎因素作用下，巨噬細胞生成并釋放大量的促炎細胞因子，包括TNT-α、IL-1β、IL-6等，這些細胞因子的過量釋放可引起機體自身組織損傷，導(dǎo)致過度的全身性炎癥反應(yīng)，最終導(dǎo)致多器官功能障礙以至死亡。肺臟是公認的較早發(fā)生功能障礙的器官。肺巨噬細胞包括分布在肺泡腔表面及肺泡腔內(nèi)的肺泡巨噬細胞(alveolar macrophages，AMs)，分布在肺泡隔、支氣管及血管旁的肺間質(zhì)巨噬細胞(pulmonary interstitial macrophages，PIMs)和肺血管內(nèi)的巨噬細胞。近來對PIMs研究的不斷深入表明，在內(nèi)毒素血癥時PIMs較AMs更早受到LPS攻擊，其吞噬功能、對補體的趨化作用及產(chǎn)生氧自由基的能力明顯強于AMs，在肺組織炎癥反應(yīng)中起重要作用。因此，有效控制肺PIMs的過度激活將對減輕肺組織炎癥反應(yīng)起到積極的保護作用。 體內(nèi)一些神經(jīng)肽／激素如生長激素、生長抑素、血管活性腸肽(vasoactive intestinal peptide，VIP)、降鈣素基因相關(guān)肽、八肽膽囊收縮素(cholecystokinin octapeptide，CCK-8)、神經(jīng)肽Y、神經(jīng)加壓素等具有一定的抗炎及抗休克作用，構(gòu)成了神經(jīng)-內(nèi)分泌-免疫調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò)的重要物質(zhì)基礎(chǔ)。本室一直致力于研究CCK-8的抗內(nèi)毒素休克(endotoxin shock，ES)及抗炎作用，用CCK-8預(yù)處理ES大鼠可使平均動脈壓回升而肺動脈壓降低，并明顯減輕ES時肺臟、肝臟、脾臟、腎臟間質(zhì)水腫及白細胞浸潤等炎性病理損傷，降低死亡率。CCK-8緩解ES大鼠早期肺動脈高壓的作用與其減輕肺臟炎癥反應(yīng)有關(guān)。但有關(guān)CCK-8的抗炎作用及其機制尚未完全闡明，仍存在許多問題亟待解決。我們的新近研究表明肺巨噬細胞存在CCK受體基因表達，并可被LPS誘導(dǎo)表達 中文摘要 增加，提示CCK七可能通過與其受體相互作用而干預(yù)LPS激活巨噬細 胞的過程，從而調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)。 LPS介導(dǎo)巨噬細胞活化的信號通路錯綜復(fù)雜，但目前認為LPS一 CD14TLR4一IRAKIKKIKB－－am＊x－h(huán)了rolnfiammatory cytoklnes 是其中一條關(guān)鍵的信號通路，即LPS與巨噬細胞膜表面LPS受體CD14 結(jié)合后，激活 Toll樣受體 4（TOll like receptor 4，TLR4）并與之結(jié)合形 成受體復(fù)合物，募集適配分子 MyD88，MyD88的死亡結(jié)構(gòu)域再募集下 游的L－l受體相關(guān)激酶（IL－lreceptor－associated kinase，I�。┑绞荏w 復(fù)合物。IRAK隨后發(fā)生自磷酸化，從受體復(fù)合物解離，募集’－’v－’受 體相關(guān)因子 6（1’i－ receptor－associated factor 6，T附6），］順次激活 下游激酶，包括 W－h(huán)誘導(dǎo)激酶（W－h(huán)－inducing kinase NIK）和絲裂 素活化蛋白激酶a皿激酶激酶（mitogen－activated Protein klnase億RK kinase kinase，MEKKI）。激活的MK或MEKKI 都能獨自激活I(lǐng)皿 復(fù)合物，導(dǎo)致Ich磷酸化降解，NF－h(huán)移位入核，啟動目的基因轉(zhuǎn)錄。 因此本實驗以體外培養(yǎng)的大鼠PIMS為對象，系統(tǒng)研究CCK8對 LPS作用下細胞內(nèi) LPS——CD14——TLR4－I－I皿一Ith一h一 prolnflammatory cytokines s條信號通路的影響，探討 CCK七對 LPS誘 導(dǎo)PIMS活化的作用及其信號通路，以揭示CCK七抑制LPS致肺組織 炎癥反應(yīng)的作用機制。 ICCK－呂對LPS誘導(dǎo)大鼠肺間質(zhì)巨噬細胞產(chǎn)生促炎因子及基因表 達的影響 應(yīng)用膠原酶消化法結(jié)合肺泡耗竭灌洗和肺循環(huán)灌洗技術(shù)分離純化 SD大鼠PIMS，在加入或不加人CCK七的情況下，用LPS刺激細胞一 定時間，用ELISA7L檢測細胞培養(yǎng)上清中TNF咀的含量，用RTPCR。” 技術(shù)分析細胞中 ’vmv咀及 ILl InRNA的表達。數(shù)據(jù)用王土s表示，用 SPSS統(tǒng)計分析軟件進行統(tǒng)計學(xué)分析，各組均數(shù)的比較行單因素方差分 析（ANOVA人用最小顯著差法 （leastsignifican differenCe，LSD）作 兩兩比較，P＜O刀5為有顯著性差異。結(jié)果顯示：（）NMs自發(fā)性產(chǎn)生 IN17億的量非常少，低于我們檢測的下限。LPS lm叭孵育 PIMs 12 h 時，細胞上清中的 TNF心含量明顯增多 門66．61土 124．40 pg／ml， P＜0刀1）；CCK．8（10｛ mol／L－10－‘mol／L）可劑量依賴性地抑制 LPS誘 2 中文摘要 導(dǎo)的 INF叱生成增多，10－‘mol／L CCK七輕微降低 LPS誘生的 INI7咀， 但無統(tǒng)計學(xué)意義（497＊ 1士 132．25 pg／ffil， P＞0＊5），而 10－’mol幾 CCK－8 抑制LPS誘導(dǎo)的T’i－－Q生成達44％（3 19＊ 士62．ZI pg／ffil，P＜0＊1）， 10“mol幾 CCK－8抑鎬率達刀％ （16．99士63．49 p吻l，P＜0＊1），但仍 明顯高于對照組（P＜0刀5人＊＊卜8單獨孵育對TNF心的生成無明顯影 響（P＞0刀5）。（2）LPS叭孵育 PIMs 3 h可導(dǎo)致細胞 1’i－’－a mRNA 表達明顯增高（P＜O．01人而＊陀與＊＊義8共同孵育的NMs，其TNF咀 ＜ RNRNA表達水平明顯低于＊＊S組，并呈劑量依
【學(xué)位單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位年份】：2002
【中圖分類】：R363

【參考文獻】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 呂長俊,李明娥,劉俊英,劉花香;大鼠肺間質(zhì)巨噬細胞的分離及有關(guān)特征[J];濱州醫(yī)學(xué)院學(xué)報;1998年01期

2 劉軒,魏育林;LPS受體CD14的最新研究進展[J];解剖科學(xué)進展;1999年02期

3 趙虎,周庭銀,孔憲濤;CD14的結(jié)構(gòu)和功能[J];免疫學(xué)雜志;2000年01期

4 谷振勇;過氧亞硝基陰離子介導(dǎo)內(nèi)毒素致肺血管損傷及膽囊收縮素的保護作用[J];生理科學(xué)進展;2001年02期

5 朱文玉,金雨蓀;八肽膽囊收縮素對鏈佐霉素引起的小鼠糖尿病的保護作用[J];生理學(xué)報;1985年06期

6 孟愛宏,凌亦凌,王殿華,谷振勇,李淑瑾,朱鐵年;八肽膽囊收縮素減輕腫瘤壞死因子誘導(dǎo)的離體兔肺動脈反應(yīng)性變化及內(nèi)皮細胞損傷[J];生理學(xué)報;2000年06期

7 孟愛宏,凌亦凌,王殿華,谷振勇,李淑瑾,朱鐵年;NO在CCK-8減輕腫瘤壞死因子誘導(dǎo)兔肺動脈反應(yīng)性變化中的作用[J];生理學(xué)報;2001年06期

8 凌亦凌，黃善生，王樂豐，張君嵐，萬梅，郝榮利;八肽膽囊收縮素抗內(nèi)毒素休克的實驗研究[J];生理學(xué)報;1996年04期

9 叢斌,凌亦凌,谷振勇,王俊霞,姚玉霞;八肽膽囊收縮素對脂多糖誘導(dǎo)大鼠肺組織NF-κB活性增高的抑制作用[J];中國病理生理雜志;2000年10期

10 李淑瑾,凌亦凌,王殿華,谷振勇,孟愛宏,朱鐵年,賀穎;八肽膽囊收縮素對脂多糖誘導(dǎo)離體兔胸主動脈反應(yīng)性改變的影響[J];中國病理生理雜志;2001年11期

本文編號：2824901