【摘要】：目的探討在體外共培養(yǎng)條件下,人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)肝星狀細(xì)胞增殖的調(diào)控機(jī)制。 方法采用Transwell間接共培養(yǎng)體系,實(shí)驗(yàn)組上層接種人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞(UCMSCs),下層接種肝星狀細(xì)胞(HSCs-LX-2);對(duì)照組僅肝星狀細(xì)胞單獨(dú)培養(yǎng)。MTT法測(cè)肝星狀細(xì)胞增殖抑制率；HOECHST染色法,直接觀察肝星狀細(xì)胞增殖抑制情況；流式分析技術(shù)檢測(cè)各組肝星狀細(xì)胞凋亡情況；ELISA法檢測(cè)各實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞上清液中TGF-β1蛋白的表達(dá)；熒光實(shí)時(shí)定量PCR檢測(cè)各組肝星狀細(xì)胞中TGF-β1、Smad3、Smad7mRNA的表達(dá)；Western blot法檢測(cè)各組肝星狀細(xì)胞TGF-β1、Smad3、Smad7蛋白的表達(dá)。 結(jié)果與對(duì)照組比較,實(shí)驗(yàn)組共培養(yǎng)24、48h,隨著時(shí)間延長(zhǎng)肝星狀細(xì)胞增殖抑制率明顯升高(P0.05)；HOECHST染色可見實(shí)驗(yàn)共培養(yǎng)組肝星狀細(xì)胞凋亡增多,且48h較24h更明顯(P0.05)；流式細(xì)胞分析示共培養(yǎng)組肝星狀細(xì)胞凋亡多于對(duì)照組,且48h較24h更明顯(P0.05)；上清液中,共培養(yǎng)組TGF-β1較對(duì)照組少,隨著時(shí)間增加,差異更明顯(P0.05)。共培養(yǎng)48h實(shí)驗(yàn)組TGF-β1及Smad3mRNA表達(dá)低于對(duì)照組,而Smad7mRNA表達(dá)高于對(duì)照組(P0.05)。共培養(yǎng)24h、48hTGF-β1、Smad3蛋白的表達(dá)均低于對(duì)照組,Smad7蛋白表達(dá)高于對(duì)照組(P0.05)。 結(jié)論人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞能夠抑制肝星狀細(xì)胞的增殖,促進(jìn)其凋亡,其機(jī)制可能是通過下調(diào)TGF-β1、Smad3,上調(diào)Smad7蛋白表達(dá)而實(shí)現(xiàn)的。
【學(xué)位授予單位】：蘭州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R329.2

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本文編號(hào)：2823908