【摘要】：目的探討在體外共培養(yǎng)條件下,人臍帶間充質(zhì)干細胞對肝星狀細胞增殖的調(diào)控機制。 方法采用Transwell間接共培養(yǎng)體系,實驗組上層接種人臍帶間充質(zhì)干細胞(UCMSCs),下層接種肝星狀細胞(HSCs-LX-2);對照組僅肝星狀細胞單獨培養(yǎng)。MTT法測肝星狀細胞增殖抑制率；HOECHST染色法,直接觀察肝星狀細胞增殖抑制情況；流式分析技術檢測各組肝星狀細胞凋亡情況；ELISA法檢測各實驗組細胞上清液中TGF-β1蛋白的表達；熒光實時定量PCR檢測各組肝星狀細胞中TGF-β1、Smad3、Smad7mRNA的表達；Western blot法檢測各組肝星狀細胞TGF-β1、Smad3、Smad7蛋白的表達。 結果與對照組比較,實驗組共培養(yǎng)24、48h,隨著時間延長肝星狀細胞增殖抑制率明顯升高(P0.05)；HOECHST染色可見實驗共培養(yǎng)組肝星狀細胞凋亡增多,且48h較24h更明顯(P0.05)；流式細胞分析示共培養(yǎng)組肝星狀細胞凋亡多于對照組,且48h較24h更明顯(P0.05)；上清液中,共培養(yǎng)組TGF-β1較對照組少,隨著時間增加,差異更明顯(P0.05)。共培養(yǎng)48h實驗組TGF-β1及Smad3mRNA表達低于對照組,而Smad7mRNA表達高于對照組(P0.05)。共培養(yǎng)24h、48hTGF-β1、Smad3蛋白的表達均低于對照組,Smad7蛋白表達高于對照組(P0.05)。 結論人臍帶間充質(zhì)干細胞能夠抑制肝星狀細胞的增殖,促進其凋亡,其機制可能是通過下調(diào)TGF-β1、Smad3,上調(diào)Smad7蛋白表達而實現(xiàn)的。
【學位授予單位】：蘭州大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2013
【分類號】：R329.2

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本文編號：2823908