發(fā)布時(shí)間：2020-08-28 14:55

　　 硫氧還蛋白(Trx)是一種廣泛表達(dá)于多種生物的小分子蛋白質(zhì)。它與Trx還原酶及NADPH組成了Trx系統(tǒng)。雖然Trx具有多種生理功能,但其最基本的功能是通過(guò)其活性位點(diǎn)(Cys-Gly-Pro-Cys)調(diào)節(jié)體內(nèi)氧化還原平衡及抗氧化損傷。硫氧還蛋白結(jié)合蛋白2(TBP-2)則是一種Trx的負(fù)調(diào)節(jié)蛋白。它能抑制Trx的氧化還原調(diào)節(jié)活性并能下調(diào)Trx的表達(dá)量。 隨生物學(xué)的發(fā)展,氧化還原調(diào)節(jié)在細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)中的作用已成為研究的熱點(diǎn)之一。而且已有大量的研究顯示,氧化還原調(diào)節(jié)在免疫應(yīng)答反應(yīng)中有重要作用。雖然Trx系統(tǒng)只是人體內(nèi)多種抗氧化分子系統(tǒng)(如Cys、谷光苷肽、超氧化物岐化酶)中的一種,但已經(jīng)有研究顯示Trx直接參與了免疫反應(yīng)的調(diào)節(jié)。然而,目前對(duì)于Trx的免疫調(diào)節(jié)作用還沒(méi)有完整統(tǒng)一的認(rèn)識(shí),主要原因之一是免疫系統(tǒng)網(wǎng)絡(luò)的復(fù)雜性(包括免疫細(xì)胞的多態(tài)性)。 由于Trx在免疫應(yīng)答反應(yīng)中有一定的作用(如先前一些報(bào)道所提示的抑制炎癥作用),本論文主要研究了Trx與白介素10(IL-10)的相關(guān)性。其次,本論文還研究了嗎啡刺激對(duì)小鼠脾臟Trx表達(dá)的調(diào)節(jié)作用。 本研究主要通過(guò)RT-PCR和蛋白質(zhì)免疫印跡分析,檢測(cè)了Jurkat細(xì)胞(一種CD4+T細(xì)胞)和U937細(xì)胞(一種單核細(xì)胞)在IL-10作用下的胞內(nèi)Trx表達(dá)變化,以及嗎啡對(duì)小鼠脾臟組織Trx表達(dá)的影響。 定量PCR結(jié)果顯示：在選擇的時(shí)間內(nèi)(6 h、12 h、16 h),IL-10的加入輕微上調(diào)了Jurkat細(xì)胞的Trx mRNA水平,同時(shí)下調(diào)了TBP-2 mRNA水平。蛋白質(zhì)檢測(cè)說(shuō)明IL-10作用16h后誘導(dǎo)Jurkat細(xì)胞的Trx表達(dá),而P13K抑制劑能部分阻斷這種誘導(dǎo)作用。 此外,在U937細(xì)胞培養(yǎng)物中加入IL-10(終濃度為20 ng/ml)后,U937細(xì)胞的胞內(nèi)Trx表達(dá)在一些時(shí)間點(diǎn)(1h、4h、16 h)明顯下降。在16h作用時(shí)間的實(shí)驗(yàn)中,在預(yù)先加入P13K抑制劑的情況下,IL-10對(duì)U937細(xì)胞Trx表達(dá)的抑制作用幾乎被阻斷。 最后,嗎啡調(diào)節(jié)小鼠脾臟Trx表達(dá)的研究顯示：在急性嗎啡給藥時(shí),雄性昆明種小鼠脾臟的Trx表達(dá)被抑制,而雌性小鼠則有相反的表現(xiàn)。在慢性嗎啡給藥時(shí),雄性C57BL/6鼠脾臟的Trx表達(dá)被抑制。
【學(xué)位單位】：昆明理工大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2009
【中圖分類】：R392
【部分圖文】：

圖1.IJ’rX的蛋白質(zhì)分子一級(jí)結(jié)構(gòu)Fig1.1.PrimarystructureofTrxProtein:圖中顯示了人Trx的實(shí)際氨基酸序列(從N端到C端)。圖中2個(gè)箭頭所指位點(diǎn)及它們之間的位形成Trx80的潛在切割位點(diǎn)區(qū)域。

圖1.2Trx的X射線品體衍射結(jié)構(gòu)圖Fig1.2TheerystalstruetureofTrXbyXraydiffraetionanalysis能體外進(jìn)行的電泳遷移率分析說(shuō)明:AP一1、NF一KB、Myb、Ets等核因子的DNA結(jié)合

圖1.3Trx進(jìn)行氧化還原調(diào)節(jié)的示意圖Fig1.3SketehmaPofredoxregulationbyTrX通過(guò)外源加入Trx(20群歲ml)，或者轉(zhuǎn)染Tix表達(dá)質(zhì)粒，都能顯著增強(qiáng)細(xì)胞的AP一1活

【共引文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2807718