本文關(guān)鍵詞：電針改善致衰模型大鼠術(shù)后認(rèn)知功能障礙的海馬炎癥反應(yīng)調(diào)控機制，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的探討致衰模型大鼠術(shù)后認(rèn)知功能障礙(postoperative cognitive dysfunction, POCD)與海馬炎癥反應(yīng)的關(guān)系以及電針通過調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)對POCD起到的干預(yù)效果。 方法清潔級雄性SD大鼠(1月齡)90只,隨機分為成年組(A組,15只)和致衰模型組(75只)。其中,致衰模型組分為老年組(E組,15只),術(shù)后3天組(P3d組,15只),術(shù)后7天組(P7d組,15只),電針3天組(EA3d組,15只)和電針7天組(EA7d組,15只)五個亞組。A組腹腔注射0.9%生理鹽水(60mg/kg/d,42天),用于與致衰模型組相對照,其余五組均通過腹腔注射5%D-半乳糖(60mg/kg/d,42天)制備衰老模型。P組和EA組均行肝部分切除術(shù),其中P3d組于術(shù)后24小時行Y迷宮,每日一次,持續(xù)3天；EA3d組于術(shù)后24小時給予電針干預(yù)后行Y迷宮,每日一次,持續(xù)3天,此兩組于術(shù)后3天處死取材。P7d組于術(shù)后第5天開始行Y迷宮,每日一次,持續(xù)3天；EA7d組于術(shù)后24小時開始給予電針干預(yù),至第5天開始先給予電針干預(yù),后行Y迷宮,每日一次,持續(xù)3天,此兩組于術(shù)后7天處死取材。A組和E組均于各自干預(yù)后24小時直接行Y迷宮,每日一次,持續(xù)3天,于3天后處死取材。觀察指標(biāo)(1)采用Y迷宮檢測大鼠認(rèn)知功能(正確次數(shù)和平均反應(yīng)時間)；(2)采用ELISA法檢測血清中IL-1β、IL-6、TNF-α水平；(3)免疫組織化學(xué)法檢測海馬中CD200、CD200R及活化的小膠質(zhì)細(xì)胞、星形膠質(zhì)細(xì)胞的含量。 結(jié)果(1)Y迷宮檢測大鼠認(rèn)知功能。A組大鼠毛色潔白有光澤,反應(yīng)迅速、動作敏捷、活動量大,E組較A組毛色暗淡偏黃無光澤,反應(yīng)遲鈍、活動量少,體重?zé)o明顯差異,正確次數(shù)減少,平均反應(yīng)時間延長,但差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)；P3d組大鼠于術(shù)后1天開始出現(xiàn)較E組更為明顯的反應(yīng)遲緩現(xiàn)象,活動量明顯減少,正確次數(shù)減少(P0.01),平均反應(yīng)時間延長(P0.01),差異均有統(tǒng)計學(xué)意義。P7d組于術(shù)后1天開始出現(xiàn)反應(yīng)遲鈍現(xiàn)象,持續(xù)3天左右,隨后癥狀逐漸好轉(zhuǎn),反應(yīng)和活動量有所恢復(fù),與E組相較,正確次數(shù)稍有所減少(P0.05),平均反應(yīng)時間延長(P0.05),但差異均無統(tǒng)計學(xué)意義。EA3d組相較P3d組動作靈活,活動量大,正確次數(shù)增多(P0.01),平均反應(yīng)時間縮短(P0.05),差異均有統(tǒng)計學(xué)意義。EA7d組較P7d組反應(yīng)速度和活動量無明顯改善,正確次數(shù)稍有增多(P0.05),平均反應(yīng)時間縮短(P0.05),差異均無統(tǒng)計學(xué)意義。(2)ELISA檢測大鼠血清中主要促炎細(xì)胞因子水平。E組較A組IL-1β、 IL-6、TNF-α水平升高,但無明顯差異(P0.05)；P3d組較E組IL-1β、IL-6水平顯著升高(P0.01),TNF-α水平無明顯升高(P0.05)；EA3d組較P3d組IL-1βIL-6水平顯著降低(P0.05),TNF-α水平無明顯變化(P0.05)；P7d組較E組和EA7d組較P7d組IL-1β、IL-6、TNF-α水平均無顯著差異(P0.05)。(3)免疫組化檢測海馬中Ⅰba-1、GFAP、CD200和CD200R的陽性細(xì)胞表達(dá)。E組較A組Iba-1、GFAP、CD200和CD200R陽性細(xì)胞數(shù)無明顯差異(P0.05)；P3d組較E組Iba-1、GFAP陽性細(xì)胞數(shù)顯著增多(P0.01),CD200陽性細(xì)胞數(shù)明顯降低(P0.01),CD200R無明顯變化(P0.05)；EA3d組較P3d組Ⅰba-1、GFAP(?)日性細(xì)胞數(shù)顯著減少(P0.01),CD200陽性細(xì)胞數(shù)顯著增高(P0.01),CD200R無明顯變化(P0.05)；P7d組較E組和EA7d組較P7d組各項指標(biāo)陽性細(xì)胞數(shù)均無顯著差異(P0.05)。 結(jié)論(1)術(shù)后外周血中促炎細(xì)胞因子含量上調(diào)并通過多種途徑引發(fā)海馬炎癥反應(yīng),可能與致衰模型大鼠術(shù)后認(rèn)知功能障礙的發(fā)生有關(guān)。(2)術(shù)后海馬中小膠質(zhì)細(xì)胞、星形膠質(zhì)細(xì)胞活化增強和CD200調(diào)控小膠質(zhì)細(xì)胞活化能力減弱可加重海馬炎性反應(yīng)。(3)電針可以通過抑制致衰模型大鼠術(shù)后外周血中促炎細(xì)胞因子影響海馬炎癥反應(yīng)改善術(shù)后認(rèn)知功能障礙。(4)電針可以通過抑制海馬小膠質(zhì)細(xì)胞、星形膠質(zhì)細(xì)胞活化和增強CD200調(diào)控小膠質(zhì)細(xì)胞活化能力來抑制海馬炎癥反應(yīng),從而改善術(shù)后認(rèn)知功能障礙。
【關(guān)鍵詞】：術(shù)后認(rèn)知功能障礙 致衰模型 海馬炎癥反應(yīng) 電針
【學(xué)位授予單位】：浙江中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：R-332;R245
【目錄】：

• 特別鳴謝3-4
• 目錄4-6
• 中文摘要6-8
• ABSTRACT8-11
• 前言11-13
• 一.實驗材料與方法13-20
• (一) 實驗材料13-15
• 1. 實驗動物13
• 2. 主要試劑與藥品13-14
• 3. 試劑配置14
• 4. 主要實驗設(shè)備14-15
• (二) 實驗方法15-18
• 1. 實驗分組及處理15-16
• 2. 動物模型的制備16
• (1) 動物飼養(yǎng)16
• (2) D-半乳糖致衰模型制備方法16
• (3) POCD模型制備——肝部分切除術(shù)16
• 3. 電針干預(yù)方法16
• 4. Y迷宮檢測方法16-17
• 5. 動物的組織取材17
• 6. 相關(guān)指標(biāo)及檢測方法17-18
• (1) 石蠟切片制備17
• (2) GFAP、Iba-1、CD200、CD200R免疫組化染色17-18
• (3) ELISA法檢測血清中IL-1β、IL-6、TNF-α水平18
• (三) 統(tǒng)計方法18-20
• 二、結(jié)果20-26
• (一) Y迷宮檢測結(jié)果20-21
• (二) 血清中IL-1β、IL-6、TNF-α水平檢測結(jié)果21-23
• (三) 海馬中GFAP、Iba-1、CD200和CD200R陽性細(xì)胞數(shù)的表達(dá)23-26
• 三、分析與討論26-33
• (一) 現(xiàn)代醫(yī)學(xué)對POCD的認(rèn)識26-27
• (二) 本實驗動物模型的選擇依據(jù)27-28
• 1. 選擇D-半乳糖致衰老模型的依據(jù)27
• 2. 選擇肝部分切除術(shù)的依據(jù)27-28
• (三) 本實驗的選穴依據(jù)28
• (四) 電針對促炎細(xì)胞因子水平的調(diào)節(jié)28-30
• 1. 電針對IL-1β水平的調(diào)節(jié)29
• 2. 電針對IL-6水平的調(diào)節(jié)29-30
• 3. 電針對TNF-α水平的調(diào)節(jié)30
• (五) 電針對神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞活化的調(diào)節(jié)30-32
• 1. 電針對小膠質(zhì)細(xì)胞活化的調(diào)節(jié)31
• 2. 電針對星形膠質(zhì)細(xì)胞活化的調(diào)節(jié)31-32
• (六) 電針對CD200和CD200R表達(dá)的調(diào)節(jié)32-33
• 四、結(jié)論33-34
• 參考文獻(xiàn)34-40
• 附圖40-44
• 致謝44-45
• 文獻(xiàn)綜述45-50
• 參考文獻(xiàn)48-50

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：277797