【摘要】：自身免疫性內(nèi)耳病(Autoimmune inner ear disease，AIED)是目前少數(shù)幾種經(jīng)恰當(dāng)治療可獲得較好療效的內(nèi)耳病之一。因?yàn)樯袩o滿意的檢查方法以確定內(nèi)耳自身免疫的進(jìn)程，而且人的內(nèi)耳疾病不能經(jīng)活檢診斷，故建立該病的動(dòng)物模型對(duì)于揭示其發(fā)病機(jī)理有重要的實(shí)際意義。現(xiàn)有的AIED動(dòng)物模型還有很多缺點(diǎn)。Fas-FasL信號(hào)系統(tǒng)通過介導(dǎo)凋亡在各種生物進(jìn)程中起重要的作用，包括發(fā)育及組織穩(wěn)態(tài)。Bcl-2可通過多種途徑對(duì)凋亡進(jìn)行有效的抑制。在器官特異性自身免疫病的組織破壞階段，F(xiàn)as-FasL的相互作用可能是共同的致病機(jī)制。 目的 1．建立一種自身免疫性內(nèi)耳病的動(dòng)物模型，應(yīng)具有可重復(fù)性高，適于進(jìn)行深入的免疫學(xué)分析的優(yōu)點(diǎn)。以有助于進(jìn)一步闡明AIED的發(fā)病機(jī)制、病理特點(diǎn)及內(nèi)耳免疫反應(yīng)進(jìn)程。 2．了解凋亡與AIED發(fā)病機(jī)制的關(guān)系，明確凋亡及其相關(guān)分子Fas、FasL和Bcl-2在AIED小鼠的耳蝸中的表達(dá)，及其在AIED的產(chǎn)生和發(fā)展中的作用。 方法 1．提取豚鼠內(nèi)耳膜迷路組織為內(nèi)耳抗原(Inner ear antigens，IEAg)，皮下注射等量IEAg與完全弗氏佐劑(Complete Freund's adjuvant，CFA)的乳劑，加用百日咳減毒活菌免疫近交系動(dòng)物，C57BL／6小鼠，僅此一次，不再進(jìn)行加強(qiáng)免疫。 2．ABR法檢測反應(yīng)閾的改變，ELISA法檢測血清中抗IEAg抗體水平，光鏡下對(duì)H.E.染色的切片進(jìn)行內(nèi)耳形態(tài)學(xué)改變的評(píng)價(jià)，免疫組化法鑒定內(nèi)耳中浸潤的炎性細(xì)胞。 3．提取小鼠耳蝸組織RNA，免疫前后耳蝸中Fas、FasL和Bcl-2 mRNA的變化由RT-PCR法半定量檢測，以β-actin mRNA為內(nèi)對(duì)照。 4．TUNEL法檢測耳蝸組織內(nèi)凋亡的表達(dá)，耳蝸中Fas，F(xiàn)asL和Bcl-2分子的表達(dá)變化由免疫組化法檢測。 5．實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示，行方差分析或t檢驗(yàn)等統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。
【學(xué)位授予單位】：中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2003
【分類號(hào)】：R-332;R764

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前5條

1 王大君,韓東一,楊偉炎,姜泗長;硫酸慶大霉素對(duì)小鼠耳蝸螺旋神經(jīng)節(jié)細(xì)胞生長的影響[J];臨床耳鼻咽喉科雜志;1998年07期

2 龔樹生，汪吉寶;自身免疫性內(nèi)耳病動(dòng)物模型的建立[J];臨床耳鼻咽喉科雜志;1995年01期

3 陶澤璋,劉劍鋒,肖伯奎;卡那霉素耳中毒后豚鼠耳蝸細(xì)胞凋亡的研究[J];聽力學(xué)及言語疾病雜志;2001年04期

4 王鵬舉,吳展元,肖伯奎,鄔堂春;熱休克蛋白70及其抗體與實(shí)驗(yàn)性自身免疫性內(nèi)耳病[J];中華耳鼻咽喉科雜志;2000年01期

5 楊湘寧,葉小平,袁永林,王鵬;自身免疫性內(nèi)耳疾病實(shí)驗(yàn)診斷盒研制及初步應(yīng)用[J];中華耳鼻咽喉科雜志;1998年03期

本文編號(hào)：2776901