【摘要】：目的 巨噬細(xì)胞是一類固有免疫細(xì)胞,在機(jī)體免疫應(yīng)答及炎癥反應(yīng)中發(fā)揮重要作用。微環(huán)境可影響巨噬細(xì)胞功能,迄今尚未見有關(guān)滲透壓調(diào)控其功能的報(bào)道。本課題觀察低滲環(huán)境對(duì)小鼠骨髓來源巨噬細(xì)胞(BMDM)的影響,并初步探討其分子機(jī)制。 方法 低滲環(huán)境刺激BMDM,觀察如下指標(biāo)： 1. BMDM吞噬能力的改變(對(duì)FITC標(biāo)記的葡聚糖及IgG包被的乳膠顆粒的吞噬功能)。 2. BMDM抗原提呈能力的改變(流式細(xì)胞術(shù)檢測BMDM表面CD80/86、 MHCⅡ分子表達(dá))。 3. ELISA檢測BMDM分泌炎性細(xì)胞因子(IL-10、TNF-α)的改變。 4. RT-PCR和Western blot檢測ClC-2(voltage-gated chloride channel)、 ClC-3mRNA及蛋白表達(dá)；免疫熒光技術(shù)檢測蛋白在細(xì)胞內(nèi)分布。 5.用siRNA沉默ClC-3,觀察對(duì)低滲調(diào)控BMDM吞噬功能的影響。 結(jié)果 1.微環(huán)境低滲可明顯增強(qiáng)BMDM對(duì)FITC標(biāo)記的葡聚糖及IgG包被的乳膠顆粒的吞噬能力。 2.低滲環(huán)境對(duì)BMDM抗原提呈功能(CD80/86、MHCⅡ分子表達(dá)水平)無明顯影響 3.低滲對(duì)BMDM分泌IL-10、TNF-α無明顯影響 4.C1C-3在未受刺激的BMDM內(nèi)均勻、彌散分布于胞漿。低滲刺激對(duì)BMDM內(nèi)C1C-3蛋白表達(dá)水平無明顯影響,但C1C-3逐漸向細(xì)胞膜聚集。 5.應(yīng)用siRNA沉默CIC-3基因,則低滲增強(qiáng)BMDM吞噬能力的作用明顯降低,提示低滲環(huán)境增強(qiáng)BMDM吞噬的作用依賴于C1C-3參與。 結(jié)論 1.微環(huán)境低滲可上調(diào)BMDM吞噬能力。 2.微環(huán)境低滲上調(diào)BMDM吞噬能力的作用有賴C1C-3參與。
【學(xué)位授予單位】：華中科技大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R363

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本文編號(hào)：2731840