【摘要】： 肺炎克雷伯菌β 內(nèi)酰胺酶編碼基因的克隆、測序及基因定位 本文以一株臨床分離的肺炎克雷伯菌99-799株為研究對(duì)象，對(duì)其所產(chǎn)β-內(nèi)酰胺酶的編碼基因進(jìn)行了研究。肺炎克雷伯菌99-799株對(duì)頭孢菌素類包括第三代頭孢菌素、氨曲南、環(huán)丙沙星、酶抑制劑和慶大霉素均呈高度耐藥，僅對(duì)亞胺培南、頭孢西丁敏感。這株細(xì)菌包括大、中、小3個(gè)不同的質(zhì)粒，共編碼了3種pI值分別為5.4、7.8和9.0的β-內(nèi)酰胺酶。 用β-內(nèi)酰胺酶通用引物、blaTEM、blaSHV和blaAmpC共4對(duì)引物進(jìn)行聚合酶鏈反應(yīng)（PCR），結(jié)果分別得到480、748、867和395bp的陽性片段。序列測定和同源性分析表明，3種編碼基因分別屬于TEM、SHV和AmpC型β-內(nèi)酰胺酶，其中TEM和SHV型的氨基酸序列分別與TEM-1和SHV-28完全相同，AmpC型與國外報(bào)道的一株肺炎克雷伯菌中質(zhì)粒介導(dǎo)的MIR-1 AmpC酶具有90%的同源性。 為了獲得每一個(gè)質(zhì)粒并對(duì)其編碼基因進(jìn)行初步定位，我們做了轉(zhuǎn)化、接合和PCR研究。通過轉(zhuǎn)化，使大、小質(zhì)粒從肺炎克雷伯菌99-799株轉(zhuǎn)移到了大腸埃希菌DH5α中，這2個(gè)質(zhì)粒上均存在TEM-1的編碼基因，且大質(zhì)粒上還存在SHV-28的編碼基因；通過接合，使大、中質(zhì)粒從肺炎克雷伯菌99-799 株轉(zhuǎn)移到了大腸埃希菌DH5α中，中質(zhì)粒上存在AmpC的編碼基因。此外，肺炎克雷伯菌99-799株的染色體上也存在AmpC的編碼基因。 綜上所述，肺炎克雷伯菌99-799株產(chǎn)3種β-內(nèi)酰胺酶，分別是TEM-1、SHV-28和AmpC型β-內(nèi)酰胺酶
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2002
【分類號(hào)】：R346
【圖文】：

圖 1-1 肺炎克雷伯菌 99-799β-內(nèi)酰胺酶等電聚焦電泳分析1、2-肺炎克雷伯菌 99-799 的β-內(nèi)酰胺酶Fig 1-1 The isoelectric focusing analysisof theβ-lactamases in K.pneumoniae 99-79nd lane 2 indicatedβ-lactamases in K.pneumonia1 2 3 4 5

圖 1-1 肺炎克雷伯菌 99-799β-內(nèi)酰胺酶等電聚焦電泳分析1、2-肺炎克雷伯菌 99-799 的β-內(nèi)酰胺酶Fig 1-1 The isoelectric focusing analysisof theβ-lactamases in K.pneumoniae 99-799ne 1 and lane 2 indicatedβ-lactamases in K.pneumoniae 99-71 2 3 4 5

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前5條

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本文編號(hào)：2725612